| 致谢 | 第1-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 1. 文献综述 | 第15-33页 |
| ·双生病毒的分布及危害 | 第15-16页 |
| ·Begomovirus研究进展 | 第16-21页 |
| ·Begomovirus的分类 | 第16-17页 |
| ·Begomovirus的基因组结构和功能 | 第17-19页 |
| ·Begomovirus伴随的betasatellite | 第19-20页 |
| ·Begomovirus伴随的alphasatellite | 第20-21页 |
| ·Begomovirus/betasatellite/alphasatellite形成的病害复合体 | 第21-26页 |
| ·Begomovirus伴随的卫星分子的进化 | 第21-22页 |
| ·Begomovirus及其伴随的卫星分子的复制 | 第22-25页 |
| ·Begomovirus/betasatellite/alphasatellite编码的基因间的相互作用 | 第25-26页 |
| ·双生病毒与RNA沉默 | 第26-31页 |
| ·RNA沉默途径的基本机制 | 第26-27页 |
| ·植物中的RNA沉默途径 | 第27-28页 |
| ·RNA沉默与双生病毒间的相互作用 | 第28-31页 |
| ·研究的目的与意义 | 第31-33页 |
| 2. 常规实验方法 | 第33-46页 |
| ·常规克隆技术 | 第33-37页 |
| ·普通PCR反应 | 第33页 |
| ·PCR产物纯化 | 第33-34页 |
| ·载体的去磷酸化 | 第34页 |
| ·连接 | 第34-35页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第35页 |
| ·转化 | 第35页 |
| ·碱裂解法 | 第35-36页 |
| ·质粒微量提取试剂盒 | 第36-37页 |
| ·PCR鉴定 | 第37页 |
| ·酶切鉴定 | 第37页 |
| ·重组质粒导入根癌农杆菌 | 第37-38页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞制备 | 第37页 |
| ·重组质粒电击转化根癌农杆菌 | 第37-38页 |
| ·植物总DNA提取和Southern印迹分析 | 第38-40页 |
| ·植物总DNA提取(CTAB法) | 第38页 |
| ·电泳及转膜 | 第38-39页 |
| ·探针标记 | 第39-40页 |
| ·预杂交和杂交 | 第40页 |
| ·植物总RNA提取和Northern印迹分析 | 第40-43页 |
| ·器皿和容器的处理 | 第40页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第40-42页 |
| ·甲醛变性凝胶电泳 | 第42页 |
| ·RNA转膜 | 第42页 |
| ·预杂交和杂交 | 第42-43页 |
| ·SDS-PAGE与Western印迹分析 | 第43-46页 |
| ·植物可溶性蛋白样品的制备 | 第43页 |
| ·蛋白质含量测定(Bradford法) | 第43-44页 |
| ·SDS-PAGE | 第44页 |
| ·电转移 | 第44-45页 |
| ·Western印迹分析 | 第45-46页 |
| 3. Alphasatellite编码的Rep蛋白抑制子活性鉴定 | 第46-68页 |
| ·材料与方法 | 第46-50页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·载体构建 | 第47-48页 |
| ·浸润 | 第48-49页 |
| ·GFP荧光观察、拍照并采集样品 | 第49页 |
| ·大量提取RNA和Northern印迹分析 | 第49页 |
| ·SDS-PAGE电泳和Western印迹分析 | 第49页 |
| ·植物总DNA提取和Southern印迹分析 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-64页 |
| ·DNA1编码的Rep蛋白是PTGS弱抑制子 | 第50-55页 |
| ·DNA1编码的Rep蛋白抑制系统沉默 | 第55-58页 |
| ·DNA1编码的Rep蛋白能够回复转录水平基因沉默 | 第58-61页 |
| ·DNA1编码的Rep蛋白能够增加辅助病毒的积累 | 第61-64页 |
| ·讨论 | 第64-68页 |
| 4. 病害复合体中Begomovirus及其伴随卫星间相互作用的探究 | 第68-91页 |
| ·材料与方法 | 第68-73页 |
| ·材料 | 第68-69页 |
| ·Y10DNA1便染性克隆构建 | 第69页 |
| ·酵母双杂交重组质粒构建 | 第69-70页 |
| ·农杆菌介导的植株接种 | 第70-71页 |
| ·接种病毒检测 | 第71-72页 |
| ·病毒DNA及其伴随的satellites Southern印迹分析 | 第72页 |
| ·酵母双杂交验证两种已知蛋白的互作 | 第72-73页 |
| ·结果与分析 | 第73-86页 |
| ·DNA1对同源辅助病毒和同源betasatellite的影响 | 第73-79页 |
| ·DNA1对异源辅助病毒和异源betasatellite的影响 | 第79-84页 |
| ·DNA1 Rep与辅助病毒及betasatelliate编码的蛋白间的互作 | 第84-86页 |
| ·讨论 | 第86-91页 |
| 参考文献 | 第91-99页 |
| 附录A：本论文中所用病毒缩写及中英文对照 | 第99-100页 |
| 附录B：本论文所用缩写词及中英文对照 | 第100-101页 |
| 附录C：常用化学试剂、分子生物学试剂 | 第101-102页 |
| 附录D：常用缓冲液及培养基配方 | 第102-108页 |
