| 前言 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-10页 |
| Abstract | 第10-15页 |
| 英文缩写词表 | 第15-19页 |
| 第1章 绪论 | 第19-33页 |
| ·文献综述：细胞间紧密连接蛋白 CLDNs 与肿瘤的研究现状 | 第19-33页 |
| ·紧密连接和 CLDNs 的概述 | 第19-20页 |
| ·CLDNs 的分子结构 | 第20页 |
| ·CLDNs 的功能 | 第20-21页 |
| ·CLDNs 的表达与分布 | 第21-22页 |
| ·CLDNs 与人类疾病 | 第22-23页 |
| ·CLDNS 在癌组织中的表达 | 第23-27页 |
| ·CLDNs 在肿瘤发生中的作用 | 第27-28页 |
| ·CLDNs 的相关信号通路研究 | 第28-30页 |
| ·CLDNs 蛋白的应用 | 第30-33页 |
| 第2章 材料与方法 | 第33-51页 |
| ·实验材料 | 第33-39页 |
| ·细胞株 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34-36页 |
| ·主要试剂配制 | 第36页 |
| ·引物设计合成及抗体 | 第36-37页 |
| ·CLDN6 基因真核表达载体 pIRES2 -EGFP-CLDN6 的构建 | 第37-39页 |
| ·实验方法 | 第39-51页 |
| ·检测 CLDN6 在多种肿瘤细胞株中的表达 | 第39-41页 |
| ·阳性克隆鉴定 | 第41-43页 |
| ·真核表达载体 pIRES2 -EGFP-CLDN6 的转染及鉴定 | 第43-44页 |
| ·实验分组 | 第44页 |
| ·CLDN6 对 H1299 细胞增殖的影响 | 第44-46页 |
| ·CLDN6 对 H1299 细胞凋亡的影响 | 第46-47页 |
| ·CLDN6 对 H1299 细胞转移能力的影响 | 第47-49页 |
| ·CLDN6 对 H1299 细胞紧密连接功能的影响 | 第49页 |
| ·CLDN6 对肺腺癌 H1299 细胞生物学行为影响的相关机制研究 | 第49-51页 |
| 第3章 结果 | 第51-93页 |
| ·检测 CLDN6 在多种细胞株中的表达 | 第51-52页 |
| ·RT-PCR 检测多种细胞株中 CLDN6 的表达水平 | 第51页 |
| ·Western Blot 检测多种细胞株中 CLDN6 的表达水平 | 第51-52页 |
| ·CLDN6 转染肺腺癌 H1299 细胞稳定克隆的筛选和鉴定 | 第52-65页 |
| ·pIRES2-EGFP-CLDN6 质粒的鉴定 | 第52-54页 |
| ·转染 48 小时内 H1299 细胞形态的比较 | 第54-56页 |
| ·挑取单克隆 | 第56-57页 |
| ·转染 1 个月后 H1299 细胞形态的比较 | 第57-58页 |
| ·RT-PCR 鉴定转染后 H1299 细胞中 CLDN6 的表达 | 第58页 |
| ·Western blot 鉴定转染后 H1299 细胞中 CLDN6 的表达 | 第58-59页 |
| ·细胞免疫荧光染色法对 CLDN6 进行定位检测 | 第59-61页 |
| ·稳定转染 pIRES2-EGFP-CLDN6 质粒的肺腺癌 H1299 细胞中CLDN6基因的测序 | 第61-65页 |
| ·CLDN6 对肺腺癌 H1299 细胞生长的影响 | 第65-69页 |
| ·CCK8 法检测细胞增殖 | 第65页 |
| ·二维克隆形成实验检测 H1299 细胞的二维克隆形成能力 | 第65-66页 |
| ·三维克隆形成实验检测 H1299 细胞的三维克隆形成能力 | 第66-67页 |
| ·流式细胞术检测细胞增殖周期 | 第67-69页 |
| ·CLDN6 过表达对 H1299 细胞凋亡的影响 | 第69-73页 |
| ·DAPI 检测细胞凋亡 | 第69-70页 |
| ·Hoechst33342/PI 双染法检测细胞凋亡 | 第70-71页 |
| ·流式细胞术 Hoechst33342/PI 双染法检测细胞凋亡 | 第71-73页 |
| ·CLDN6 过表达对 H1299 细胞转移能力的影响 | 第73-76页 |
| ·划痕实验检测细胞体外迁移能力 | 第73-74页 |
| ·Transwell 小室实验检测细胞体外侵袭能力 | 第74-75页 |
| ·粘附实验检测 H1299 细胞粘附能力 | 第75-76页 |
| ·CLDN6 过表达对 H1299 细胞紧密连接功能的影响 | 第76页 |
| ·CLDN6 过表达影响 H1299 细胞生物学行为可能机制的研究 | 第76-93页 |
| ·H1299 细胞中 CLDN6 和 P38 的表达水平 | 第76-78页 |
| ·CLDN6 对 P38 活化的影响 | 第78-79页 |
| ·CLDN6 对 ASK1 活化的影响 | 第79-80页 |
| ·CLDN6 对 STAT3 活化的影响 | 第80-81页 |
| ·P38 抑制剂 SB203580 的最适作用浓度的选择 | 第81-82页 |
| ·P38 抑制剂 SB203580 的最适作用时间的选择 | 第82-84页 |
| ·P38 抑制剂 SB203580 对 ASK1 表达的影响 | 第84-85页 |
| ·P38 抑制剂 SB203580 对 STAT3 表达的影响 | 第85-86页 |
| ·P38 MAPK 信号途径对过表达 CLDN6 的 H1299 细胞增殖的调控作用 | 第86-87页 |
| ·P38 MAPK 信号途径对过表达 CLDN6 的 H1299 细胞凋亡的调控作用 | 第87-90页 |
| ·P38 MAPK 信号途径对过表达 CLDN6 的 H1299 细胞迁移的调控作用 | 第90-93页 |
| 第4章 讨论 | 第93-103页 |
| ·序言 | 第93-94页 |
| ·CLDN6 在肺腺癌细胞株中表达的意义 | 第94页 |
| ·CLDN6 真核表达载体的构建 | 第94-95页 |
| ·pIRES2-EGFP-CLDN6 质粒的转染 | 第95-96页 |
| ·CLDN6 过表达对肺腺癌细胞生物学行为的影响 | 第96-100页 |
| ·CLDN6 影响肺腺癌细胞 H1299 生物学行为的机制 | 第100-101页 |
| ·CLDN6 调节 P38 信号通路对肺腺癌细胞 H1299 增殖、凋亡和迁移的影响 | 第101-103页 |
| 第5章 结论 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-121页 |
| 作者在学期间所取得的科研成果 | 第121-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
