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双酶共表达重组菌不对称还原制备光学纯(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
目录第5-7页
第一章 绪论第7-15页
   ·手性醇的概述第7-8页
     ·手性化合物简介第7页
     ·手性醇的重要作用第7-8页
   ·(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯第8-10页
     ·(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯简介第8页
     ·高血压药物市场概况第8-9页
     ·(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯用途第9-10页
   ·(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的不同合成方法第10-13页
     ·化学方法第10-11页
     ·生物方法第11-12页
     ·解决辅酶再生问题的方法第12-13页
   ·本论文的研究意义和主要研究内容第13-15页
     ·本课题的课题来源及研究意义第13-14页
     ·本论文的主要研究内容第14-15页
第二章 材料与方法第15-23页
   ·实验材料第15-17页
     ·菌株与载体第15页
     ·主要培养基第15页
     ·主要试剂第15-16页
     ·实验仪器第16-17页
     ·实验中所用引物第17页
   ·方法第17-23页
     ·分析方法第17-18页
     ·基因挖掘方法第18-20页
     ·羰基还原酶的纯化以及酶学性质的研究第20-21页
     ·羰基还原酶与葡萄糖脱氢酶的共表达研究第21-22页
     ·不对称还原反应及产物提取第22-23页
第三章 结果与讨论第23-50页
   ·葡萄糖脱氢酶的克隆表达第23-25页
   ·羰基还原酶的基因挖掘及克隆表达第25-28页
   ·IolS的分离纯化以及酶学性质的研究第28-35页
     ·IolS的分离纯化第28-29页
     ·IolS的酶学性质第29-35页
   ·羰基还原酶与葡萄糖脱氢酶共表达的研究第35-42页
     ·pET-G-SD-I串联质粒的构建第35-37页
     ·pET-G-T7-I串联质粒的构建第37-38页
     ·一菌双质粒的共表达方法第38-39页
     ·融合蛋白的构建第39-42页
   ·重组大肠杆菌BL21(DE3)/ pET-G-T7-I催化合成(R)-HPBE的研究第42-46页
     ·水/有机溶剂两相体系中(R)-HPBE的合成第42-43页
     ·葡萄糖浓度对(R)-HPBE的合成的影响第43-44页
     ·NADP~+浓度对(R)-HPBE的合成的影响第44-45页
     ·底物流加以及pH调控后(R)-HPBE的合成的影响第45页
     ·产物(R)-HPBE的提取以及核磁鉴定第45-46页
   ·重组大肠杆菌BL21(DE3)/ pET-G-T7-I的发酵培养第46-50页
     ·发酵培养基的选择第46-47页
     ·种子液培养时间的确定第47-48页
     ·大肠杆菌BL21(DE3)/ pET-G-T7-I于3L发酵罐中的发酵培养第48-49页
     ·大肠杆菌BL21(DE3)/ pET-G-T7-I催化不对称还原OPBE合成(R)-HPBE的1-L放大反应第49-50页
主要结论与展望第50-52页
 主要结论第50页
 展望第50-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-58页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第58页

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