摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-17页 |
第一章 绪论 | 第17-37页 |
·多氯联苯及其环境激素特征概述 | 第17-21页 |
·多氯联苯的化学结构和命名 | 第17-18页 |
·多氯联苯的生产和使用 | 第18页 |
·多氯联苯的理化性质及其环境行为 | 第18-20页 |
·多氯联苯的生物毒性和环境激素特征 | 第20-21页 |
·多氯联苯的环境标准 | 第21-22页 |
·多氯联苯的检测方法概述 | 第22-26页 |
·色谱仪器分析检测方法 | 第22-24页 |
·生物分析技术 | 第24-25页 |
·免疫学检测方法 | 第25-26页 |
·免疫 PCR 技术概述 | 第26-33页 |
·PCR 技术的原理、特点和在环境中的应用 | 第26-27页 |
·免疫 PCR (IPCR) 分析技术概述 | 第27-30页 |
·实时荧光定量免疫 PCR (rt-IPCR) 技术的特点与应用 | 第30-33页 |
·课题研究意义、思路以及实验方案 | 第33-37页 |
·本课题的研究意义 | 第33页 |
·课题的研究思路与实验方案 | 第33-35页 |
·本课题的创新之处 | 第35-37页 |
第二章 多氯联苯同系物的合成方法研究 | 第37-44页 |
·多氯联苯同系物的合成方法概况 | 第37页 |
·氯化铜还原法制备多氯联苯 | 第37-39页 |
·实验仪器与试剂 | 第37-38页 |
·合成路线与实验步骤 | 第38页 |
·结果与讨论 | 第38-39页 |
·改性 GOMBERG-BACHMANN 法制备多氯联苯 | 第39-43页 |
·合成路线与实验步骤 | 第39-40页 |
·结果与讨论 | 第40-42页 |
·结论 | 第42-43页 |
·本章小结 | 第43-44页 |
第三章 多氯联苯类环境激素半抗原与抗原的合成及表征 | 第44-64页 |
·半抗原与抗原的概念和合成原理 | 第44-47页 |
·半抗原与抗原的概念 | 第44-45页 |
·半抗原与抗原对抗体形成的作用 | 第45页 |
·半抗原与抗原的合成原理 | 第45-46页 |
·多氯联苯环境激素的抗原合成路线 | 第46-47页 |
·实验仪器与试剂 | 第47-48页 |
·实验仪器 | 第47页 |
·实验试剂 | 第47-48页 |
·3,4 -二氯联苯(PCB12)抗原的合成 | 第48-49页 |
·PCB12 半抗原的合成 | 第48-49页 |
·PCB12 全抗原的合成 | 第49页 |
·3, 4,4’-三氯联苯(PCB37)抗原的合成 | 第49-51页 |
·PCB37 半抗原合成路线 | 第49-50页 |
·PCB37 人工抗原的合成 | 第50-51页 |
·3,3’,4,4’-四氯联苯(PCB77)抗原的合成 | 第51-52页 |
·PCB77 半抗原的合成 | 第51-52页 |
·PCB77 抗原的合成 | 第52页 |
·半抗原与人工抗原的鉴定 | 第52-53页 |
·紫外光谱扫描鉴定 | 第52-53页 |
·考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 | 第53页 |
·结果与讨论 | 第53-61页 |
·PCB12 半抗原的鉴定 | 第53-55页 |
·PCB12 抗原的表征 | 第55页 |
·PCB37 半抗原的鉴定 | 第55-57页 |
·PCB37 抗原的鉴定 | 第57页 |
·PCB77 半抗原的鉴定 | 第57-59页 |
·PCB77 抗原的表征 | 第59-60页 |
·人工抗原浓度和结合比的测定 | 第60-61页 |
·合成实验条件优化的选择 | 第61-63页 |
·半抗原合成实验条件的选择和优化 | 第61-62页 |
·抗原的合成与纯化 | 第62-63页 |
·本章小结 | 第63-64页 |
第四章 三种多氯联苯类环境激素的抗体制备 | 第64-86页 |
·抗体与免疫检测 | 第64-65页 |
·抗体的特点与免疫检测原理 | 第64页 |
·抗体的产生机理与种类 | 第64-65页 |
·实验部分 | 第65-71页 |
·实验仪器 | 第65-66页 |
·实验动物与试剂 | 第66页 |
·特殊试剂配制 | 第66-67页 |
·免疫方案与过程 | 第67-69页 |
·血样的采集与效价测试 | 第69-71页 |
·试管凝集反应实验 | 第69-70页 |
·双向琼脂扩散法侧定抗血清的效价 | 第70-71页 |
·抗体的制备与纯化 | 第71-77页 |
·血清的采集 | 第71-72页 |
·抗体纯化原理与方法 | 第72-73页 |
·饱和硫酸铵盐析法纯化抗体 | 第73页 |
·除盐 | 第73-75页 |
·离子交换层析法精制 | 第75-77页 |
·纯化抗体的性质测定 | 第77页 |
·结果与讨论 | 第77-84页 |
·PCB12 抗体制备的结果与讨论 | 第77-81页 |
·PCB37 抗体的制备结果与讨论 | 第81-82页 |
·PCB77 的抗体制备的结果与讨论 | 第82-84页 |
·本章小结 | 第84-86页 |
第五章 间接竞争实时免疫 PCR 法测定多氯联苯类环境激素 | 第86-127页 |
·引言 | 第86页 |
·实验仪器与试剂 | 第86-88页 |
·实验仪器 | 第86-87页 |
·实验试剂 | 第87-88页 |
·实验方法 | 第88-99页 |
·间接竞争 rt-IPCR 法测定 PCBs 的原理 | 第88页 |
·生物素化 DNA 的合成与纯化 | 第88-93页 |
·生物素化 DNA 的鉴定和浓度的测定 | 第93-94页 |
·PCR 管的戊二醛预处理 | 第94-95页 |
·间接竞争 Rt-IPCR 测定 PCBs 方法的建立 | 第95-96页 |
·间接竞争 rt-IPCR 分析方法条件的优化 | 第96-99页 |
·间接竞争 rt-IPCR 分析方法特异性评价 | 第99页 |
·方法准确性—环境样品测定和加标回收实验 | 第99-102页 |
·样品采集 | 第99-100页 |
·样品处理与萃取 | 第100-101页 |
·加标回收实验 | 第101-102页 |
·结果与讨论 | 第102-108页 |
·聚丙烯 PCR 管的处理 | 第102页 |
·生物素化 DNA 的鉴定 | 第102-105页 |
·包被介质的优化 | 第105页 |
·包被时间的影响 | 第105-106页 |
·封闭液的选择和优化 | 第106页 |
·亲和素与生物素化 DNA 浓度的优化 | 第106-107页 |
·有机溶剂对免疫 PCR 检测结果的影响 | 第107-108页 |
·间接竞争 Rt-IPCR 法测定 PCBs 标准曲线的建立与环境样品测试 | 第108-124页 |
·PCB12 间接竞争 rt-IPCR 分析方法标准曲线的建立 | 第108-114页 |
·PCB37 的间接竞争 rt-IPCR 检测方法方法的建立 | 第114-120页 |
·PCB77 的间接竞争 rt-IPCR 检测方法方法的建立 | 第120-124页 |
·间接竞争 Rt-IPCR 法与 GC/MS 法测定多氯联苯的比较 | 第124-125页 |
·本章小结 | 第125-127页 |
第六章 直接竞争实时免疫 PCR 法测定多氯联苯类环境激素 | 第127-152页 |
·引言 | 第127页 |
·实验仪器与试剂 | 第127-128页 |
·实验仪器 | 第127页 |
·实验试剂 | 第127-128页 |
·实验方法 | 第128-133页 |
·生物素化抗体的制备 | 第128-130页 |
·直接竞争 rt-IPCR 测定 PCBs 的原理 | 第130-131页 |
·直接竞争 rt-IPCR 的一般步骤 | 第131-132页 |
·直接竞争 rt-IPCR 分析方法的条件优化 | 第132页 |
·直接竞争 rt-IPCR 分析方法标准曲线的建立 | 第132-133页 |
·直接竞争 rt-IPCR 分析方法特异性评价 | 第133页 |
·方法准确性—样品测定和加标回收实验 | 第133页 |
·结果与讨论 | 第133-135页 |
·包被介质的影响 | 第133页 |
·包被时间的影响 | 第133-134页 |
·封闭液的影响 | 第134页 |
·亲和素与生物素化 DNA 浓度的优化 | 第134-135页 |
·直接竞争 Rt-IPCR 分析方法测定 PCBS 的标准曲线及实际样品的测定 | 第135-150页 |
·直接竞争 RT-IPCR 法与 GC/MS 法测定多氯联苯的比较 | 第150-151页 |
·本章小结 | 第151-152页 |
第七章 固相抗体竞争实时免疫 PCR 法检测多氯联苯环境激素 | 第152-177页 |
·引言 | 第152页 |
·实验仪器与试剂 | 第152-153页 |
·实验仪器 | 第152-153页 |
·实验试剂 | 第153页 |
·固相抗体竞争 Rt-IPCR 法检测多氯联苯方法建立与优化 | 第153-156页 |
·三种 PCBs 生物素化半抗原的制备与鉴定 | 第153-154页 |
·固相抗体竞争 rt-IPCR 法检测 PCBs 方法的建立 | 第154-155页 |
·固相抗体竞争 rt-IPCR 法检测多氯联苯分析方法条件优化 | 第155页 |
·固相抗体竞争 rt-IPCR 分析方法特异性评价 | 第155页 |
·方法准确性—样品测定和加标回收实验 | 第155-156页 |
·结果与讨论 | 第156-175页 |
·三种多氯联苯生物素化半抗原的紫外吸收鉴定 | 第156-158页 |
·固相竞争 rt-IPCR 分析方法的优化 | 第158-160页 |
·固相抗体竞争 rt-IPCR 方案对 PCB12 的检测 | 第160-165页 |
·固相抗体竞争 rt-IPCR 法对 PCB37 的检测 | 第165-170页 |
·固相抗体竞争 rt-IPCR 法对 PCB77 的检测 | 第170-175页 |
·固相抗体竞争 Rt-IPCR 法与 GC/MS 法测定多氯联苯的比较 | 第175-176页 |
·本章小结 | 第176-177页 |
第八章 总结与展望 | 第177-183页 |
·总结 | 第177-181页 |
·本课题存在的问题与研究前景 | 第181-183页 |
参考文献 | 第183-201页 |
附录1. 部分多氯联苯 IUPAC 命名法 | 第201-202页 |
附录2. 实验中常用试剂和缓冲溶液配制 | 第202-203页 |
攻读博士学位期间申请专利以及已发表和待发表的文章 | 第203-204页 |
致谢 | 第204页 |