| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-15页 |
| ·不同 HPL 的底物和产物特异性 | 第9页 |
| ·HPL 的定位与调节 | 第9-10页 |
| ·HPL 的结构特征 | 第10-11页 |
| ·活性位点 | 第11页 |
| ·反应机理 | 第11-13页 |
| ·HPL 在植物害虫取食防御中的作用机理及其研究现状 | 第13-15页 |
| 2 引言 | 第15-17页 |
| ·研究意义与目的 | 第15页 |
| ·研究内容 | 第15-16页 |
| ·技术路线 | 第16-17页 |
| 3 材料与方法 | 第17-28页 |
| ·实验材料与处理 | 第17页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·实验处理 | 第17页 |
| ·仪器与试剂 | 第17-18页 |
| ·主要实验仪器 | 第17-18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·实验中常用试剂配方 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-28页 |
| ·总 RNA 的提取和检测 | 第18-20页 |
| ·CsHPL 基因的 cDNA 的 3’/5’-RACE 反应 | 第20-23页 |
| ·CsHPL 基因的生物信息学分析 | 第23页 |
| ·CsHPL 基因的原核表达 | 第23-25页 |
| ·表达的融合蛋白的生物学活性分析 | 第25页 |
| ·产物鉴定 | 第25-26页 |
| ·CsHPL 基因的 Southern blot 分析 | 第26-27页 |
| ·qRT-PCR 分析 | 第27-28页 |
| 4 结果分析 | 第28-41页 |
| ·茶树叶片中总 RNA 的提取与质量检测 | 第28页 |
| ·RNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第28页 |
| ·核酸定量仪检测总 RNA 纯度 | 第28页 |
| ·3’/5’-RACE结果 | 第28-30页 |
| ·3’/5’-RACE 扩增 | 第28-29页 |
| ·菌落 PCR | 第29-30页 |
| ·CsHPL 基因 cDNA 全长序列验证 | 第30-31页 |
| ·CsHP L 基因序列同源性与进化分析 | 第31-34页 |
| ·Southern blot 检测结果 | 第34页 |
| ·CsHPL 基因的原核表达重组质粒双酶切鉴定 | 第34-35页 |
| ·CsHPL 基因的原核表达 | 第35页 |
| ·CsHPL 基因的原核表达的优化 | 第35-36页 |
| ·活性分析 | 第36-38页 |
| ·产物鉴定 | 第38-39页 |
| ·qRT-PCR 检测结果 | 第39-41页 |
| ·定量 PCR 反应标准曲线的建立 | 第39-40页 |
| ·定量 PCR 反应鉴定 CsHPL 基因的诱导表达变化 | 第40-41页 |
| 5 讨论 | 第41-45页 |
| ·CsHPL 基因的 cDNA 全长克隆和序列分析 | 第41-42页 |
| ·CsHPL 原核表达与活性分析 | 第42页 |
| ·CsHPL 基因 Southern blot 和定量 PCR 分析 | 第42-45页 |
| 6 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录 A 中英文缩写与注释 | 第52-53页 |
| 附录 B CsHPL 测序结果 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 个人简介 | 第55页 |
| 成果清单 | 第55页 |
