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人角膜缘干细胞保存和结膜杯状细胞诱导分化的初步研究

第一部分 结膜杯状细胞的诱导分化第1-16页
 中文摘要第8-11页
 英文摘要第11-15页
 主要符号表第15-16页
第二部分 角膜缘干细胞保存的初步研究第16-21页
 中文摘要第16-18页
 英文摘要第18-20页
 主要符号表第20-21页
第一部分 结膜杯状细胞的诱导分化第21-50页
 引言第21-23页
 材料和方法第23-37页
  一、实验材料第23-25页
   1. 器械第23页
   2. 主要实验仪器第23页
   3. 主要试剂第23-24页
   4. 主要溶液配制第24-25页
  二、实验方法第25-37页
   (一) 结膜上皮细胞的体外培养第25页
    1. 结膜上皮组织的预处理第25页
    2. 结膜上皮细胞的体外培养第25页
   (二) 体外培养的结膜杯状细胞性质的检测第25-27页
    1. 组织化学染色(AB/PAS 染色)第25-26页
    2. 细胞免疫化学法第26页
    3. 抗原性检测(细胞免疫荧光法)第26-27页
   (三) 正常角膜缘组织与结膜上皮组织在羊膜上培养的区别第27-29页
    1. 羊膜载体的制备第27页
    2. 角膜缘组织在羊膜上的培养第27-28页
    3. 结膜上皮组织在羊膜上的培养第28页
    4. 组织化学染色(PAS 染色)第28-29页
   (四) γ-分泌酶抑制剂诱导结膜杯状细胞分化及其相关检测第29-35页
    1. 结膜杯状细胞的诱导分化第29页
    2. 组织化学染色(AB/PAS 染色)第29页
    3. 实时荧光定量PCR(RT-Q-PCR)定量检测相关基因表达情况第29-32页
    4. Western-blot 定量检测关键蛋白的活化程度第32-35页
   (五) 羊膜为载体构建重组结膜上皮与正常结膜上皮的比较第35-37页
    1. 结膜上皮组织在羊膜上的培养第35页
    2. 正常人结膜组织PAS 染色第35-37页
 结果第37-39页
 讨论第39-41页
 结论第41-42页
 参考文献第42-45页
 附图第45-50页
第二部分 角膜缘干细胞保存的初步研究第50-63页
 引言第50-51页
 材料和方法第51-56页
  一、实验材料第51-52页
   1. 器械第51页
   2. 主要实验仪器第51页
   3. 主要试剂第51-52页
   4. 主要溶液配制第52页
  二、实验方法第52-56页
   1. 角膜环的预处理第52-53页
   2. 细胞总量检测第53页
   3. 细胞活性检测第53页
   4. 干细胞的克隆形成能力检测第53页
   5.人原代角膜上皮细胞中角膜缘干细胞标志P63的检测第53-54页
   6.抗原性检测第54页
   7.组织病理学检测第54-56页
 结果第56-57页
 讨论第57页
 结论第57-58页
 参考文献第58-59页
 附图第59-63页
综述第63-70页
 正文第63-67页
 参考文献第67-70页
攻读学位期间的研究成果第70-71页
致谢第71页

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