第一部分 结膜杯状细胞的诱导分化 | 第1-16页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11-15页 |
主要符号表 | 第15-16页 |
第二部分 角膜缘干细胞保存的初步研究 | 第16-21页 |
中文摘要 | 第16-18页 |
英文摘要 | 第18-20页 |
主要符号表 | 第20-21页 |
第一部分 结膜杯状细胞的诱导分化 | 第21-50页 |
引言 | 第21-23页 |
材料和方法 | 第23-37页 |
一、实验材料 | 第23-25页 |
1. 器械 | 第23页 |
2. 主要实验仪器 | 第23页 |
3. 主要试剂 | 第23-24页 |
4. 主要溶液配制 | 第24-25页 |
二、实验方法 | 第25-37页 |
(一) 结膜上皮细胞的体外培养 | 第25页 |
1. 结膜上皮组织的预处理 | 第25页 |
2. 结膜上皮细胞的体外培养 | 第25页 |
(二) 体外培养的结膜杯状细胞性质的检测 | 第25-27页 |
1. 组织化学染色(AB/PAS 染色) | 第25-26页 |
2. 细胞免疫化学法 | 第26页 |
3. 抗原性检测(细胞免疫荧光法) | 第26-27页 |
(三) 正常角膜缘组织与结膜上皮组织在羊膜上培养的区别 | 第27-29页 |
1. 羊膜载体的制备 | 第27页 |
2. 角膜缘组织在羊膜上的培养 | 第27-28页 |
3. 结膜上皮组织在羊膜上的培养 | 第28页 |
4. 组织化学染色(PAS 染色) | 第28-29页 |
(四) γ-分泌酶抑制剂诱导结膜杯状细胞分化及其相关检测 | 第29-35页 |
1. 结膜杯状细胞的诱导分化 | 第29页 |
2. 组织化学染色(AB/PAS 染色) | 第29页 |
3. 实时荧光定量PCR(RT-Q-PCR)定量检测相关基因表达情况 | 第29-32页 |
4. Western-blot 定量检测关键蛋白的活化程度 | 第32-35页 |
(五) 羊膜为载体构建重组结膜上皮与正常结膜上皮的比较 | 第35-37页 |
1. 结膜上皮组织在羊膜上的培养 | 第35页 |
2. 正常人结膜组织PAS 染色 | 第35-37页 |
结果 | 第37-39页 |
讨论 | 第39-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-45页 |
附图 | 第45-50页 |
第二部分 角膜缘干细胞保存的初步研究 | 第50-63页 |
引言 | 第50-51页 |
材料和方法 | 第51-56页 |
一、实验材料 | 第51-52页 |
1. 器械 | 第51页 |
2. 主要实验仪器 | 第51页 |
3. 主要试剂 | 第51-52页 |
4. 主要溶液配制 | 第52页 |
二、实验方法 | 第52-56页 |
1. 角膜环的预处理 | 第52-53页 |
2. 细胞总量检测 | 第53页 |
3. 细胞活性检测 | 第53页 |
4. 干细胞的克隆形成能力检测 | 第53页 |
5.人原代角膜上皮细胞中角膜缘干细胞标志P63的检测 | 第53-54页 |
6.抗原性检测 | 第54页 |
7.组织病理学检测 | 第54-56页 |
结果 | 第56-57页 |
讨论 | 第57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-59页 |
附图 | 第59-63页 |
综述 | 第63-70页 |
正文 | 第63-67页 |
参考文献 | 第67-70页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |