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VEM4基因调控拟南芥抗旱的功能研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 综述第8-14页
2 材料与方法第14-36页
   ·实验材料第14页
     ·植物材料第14页
     ·菌体和质粒载体第14页
   ·主要试剂第14-18页
     ·常用分子生物学试剂盒第14页
     ·常用酶类第14页
     ·常用生化试剂第14-15页
     ·常用溶液与试剂的配制第15-18页
   ·主要仪器与设备第18-19页
   ·实验方法第19-36页
     ·灭菌第19页
     ·拟南芥培养第19-20页
     ·根长(Root length)和鲜重(Fresh weight)的测量第20页
     ·拟南芥的遗传分析第20-21页
     ·CTAB 法提取拟南芥 DNA第21页
     ·热不对称交错 PCR(Tail-PCR)第21-23页
     ·琼脂糖凝胶电泳(Agarose gel electrophoresis)检测核酸第23-24页
     ·目的条带 DNA 的回收与纯化(Kit)第24页
     ·目的片段与 T 载体的 T4 连接反应(10ul 连接体系)第24-25页
     ·E.coli 感受态细胞的制备与转化第25-26页
     ·质粒 DNA 提取(Kit)第26页
     ·RT-PCR(Reverse Ttranscription PCR)第26-28页
     ·QPCR(Real-time Quantitative PCR Detecting System)第28-29页
     ·酶切目的片段和酶切载体的 T4 连接反应(20ul 连接体系)第29页
     ·农杆菌 GV3101 感受态细胞制备与转化第29-30页
     ·花序侵染法转化拟南芥第30页
     ·双突变体的构建第30-31页
     ·PCR 引物第31页
     ·叶绿素总含量的测定第31-32页
     ·干旱可溶性糖含量的测定第32-33页
     ·干旱脯氨酸含量的测定第33-35页
     ·灭菌方法第35-36页
3 结果与分析第36-56页
   ·拟南芥抗旱突变体 vem4-1 的分离和筛选第36页
   ·vem4-1 突变体的生长和发育特征第36-39页
     ·土培 vem4-1 突变体的表型第36-37页
     ·Vem4-1 突变体幼苗和莲座叶片等地上部分自然条件下的表型第37-38页
     ·Vem4-1 突变体在完全培养基中的的表型第38-39页
   ·Vem4-1 突变体对渗透胁迫的响应第39-40页
     ·甘露醇胁迫下发芽率和表型的测定第39-40页
   ·VEM4 基因的克隆及模式图的构建第40-45页
     ·VEM4 及其编码基因的获得第40-43页
     ·VEM4 基因敲除鉴定第43页
     ·VEM4 组织特异性表达第43-44页
     ·自然干燥对 VEM4 基因的诱导第44-45页
     ·对 ABA,NaCl,Man 的渗透表达第45页
   ·Vem4-1 突变体对干旱胁迫响应第45-56页
     ·干旱条件下 vem4-1 突变体的特征第45-46页
     ·Vem4-1 突变体抗旱性能的机理分析第46-53页
     ·Vem4-1 抗旱的分子机理第53-56页
4 讨论与展望第56-57页
   ·讨论与结论第56-57页
参考文献第57-62页
致谢第62-63页
作者简介第63页
硕士期间获得成果第63页

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