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华东地区Q型烟粉虱抗性监测及抗性基因频率检测

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
第一章 文献综述第10-22页
 1 烟粉虱抗药性现状第11-16页
   ·烟粉虱对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性第11-12页
   ·烟粉虱对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性第12-13页
   ·烟粉虱对新烟碱类杀虫剂的抗性第13-15页
   ·烟粉虱对昆虫生长调节剂(IGRs)的抗性第15-16页
 2 抗性机理第16-20页
   ·代谢抗性第17-19页
     ·酯酶第17-18页
     ·多功能氧化酶第18页
     ·谷胱甘肽S-转移酶第18-19页
   ·靶标抗性第19-20页
     ·乙酰胆碱酯酶第19-20页
     ·钠离子通道第20页
 3 本研究意义第20-22页
第二章 华东地区Q型烟粉虱抗性监测第22-30页
 1 材料与方法第22-24页
   ·供试烟粉虱种群第22-23页
   ·供试药剂第23页
   ·生物测定第23-24页
 2 结果与分析第24-28页
   ·对敌敌畏抗性水平第24页
   ·对丁硫克百威的抗性水平第24-25页
   ·对氯氰菊酯的抗性水平第25-26页
   ·对吡虫啉的抗性水平第26页
   ·对烯啶虫胺的抗性水平第26-27页
   ·对阿维菌素的抗性水平第27-28页
 3 讨论第28-30页
第三章 乙酰胆碱酯酶ace1基因和钠离子通道基因片段克隆第30-38页
 1 材料与方法第30-34页
   ·供试虫源第30页
   ·主要试剂和仪器第30-31页
     ·主要试剂第30-31页
     ·主要仪器第31页
   ·试验方法第31-34页
     ·单头烟粉虱基因组DNA提取第31页
     ·乙酰胆碱酯酶ace1基因和钠离子通道基因引物设计第31-32页
     ·PCR反应体系第32页
     ·感受态细胞制备第32-33页
     ·连接反应第33页
     ·连接产物的转化第33页
     ·α互补法进行重组质粒的筛选第33-34页
     ·阳性克隆监测第34页
     ·测序第34页
 2 结果与分析第34-36页
   ·乙酰胆碱酯酶ace1基因和钠离子通道基因片段扩增第34-35页
   ·烟粉虱乙酰胆碱酯酶ace1基因片段克隆第35-36页
   ·烟粉虱钠离子通道片段克隆第36页
 3 讨论第36-38页
第四章 Q型烟粉虱抗性等位基因频率检测第38-49页
 1 材料与方法第38-41页
   ·供试虫源第38-39页
   ·抗性相关突变检测第39-41页
     ·单头烟粉虱雌性成虫基因组DNA提取第39页
     ·乙酰胆碱酯酶ace1基因F331W突变的PCR-RFLP检测第39页
       ·乙酰胆碱酯酶ace1基因片段的PCR扩增第39页
       ·酶切鉴定第39页
     ·钠离子通道基因L925I突变的PCR-RFLP检测第39-40页
       ·para-同源钠离子通道基因片段的PCR扩增第39页
       ·酶切鉴定第39-40页
     ·钠离子通道基因T929V突变的PASA检测第40-41页
 2 结果与分析第41-46页
   ·与有机磷抗性相关的乙酰胆碱酯酶ace1基因F331W突变检测第41-42页
   ·与拟除虫菊酯抗性相关的钠离子通道基因L9251突变检测第42-44页
   ·与拟除虫菊酯抗性相关的钠离子通道基因T929V突变检测第44-46页
 3 讨论第46-49页
第五章 CYP6M1内含子抗性相关多态性检测及其5’侧翼序列克隆第49-60页
 1 材料与方法第49-54页
   ·供试虫源第49-50页
   ·试验方法第50-54页
     ·CYP6CM1内含子抗性相关多态性检测第50-51页
       ·引物设计第50页
       ·PCR扩增第50页
       ·PCR产物克隆和测序第50-51页
       ·序列分析第51页
     ·CYP6CM1基因5’侧翼序列克隆第51-54页
       ·多头烟粉虱基因组DNA提取第51-52页
       ·基因组步移第52-54页
         ·第一轮巢式PCR反应第52-53页
         ·第二轮巢式PCR反应第53-54页
         ·第三轮巢式PCR反应第54页
       ·PCR产物克隆及测序第54页
       ·序列分析第54页
 2 结果与分析第54-58页
   ·CYP6CM1基因第一内含子单核苷酸多态性(SNPs)检测第54-56页
   ·CYP6CM1基因5’侧翼序列分析第56-58页
 3 讨论第58-60页
参考文献第60-70页
致谢第70-71页

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