摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-22页 |
1 烟粉虱抗药性现状 | 第11-16页 |
·烟粉虱对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性 | 第11-12页 |
·烟粉虱对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性 | 第12-13页 |
·烟粉虱对新烟碱类杀虫剂的抗性 | 第13-15页 |
·烟粉虱对昆虫生长调节剂(IGRs)的抗性 | 第15-16页 |
2 抗性机理 | 第16-20页 |
·代谢抗性 | 第17-19页 |
·酯酶 | 第17-18页 |
·多功能氧化酶 | 第18页 |
·谷胱甘肽S-转移酶 | 第18-19页 |
·靶标抗性 | 第19-20页 |
·乙酰胆碱酯酶 | 第19-20页 |
·钠离子通道 | 第20页 |
3 本研究意义 | 第20-22页 |
第二章 华东地区Q型烟粉虱抗性监测 | 第22-30页 |
1 材料与方法 | 第22-24页 |
·供试烟粉虱种群 | 第22-23页 |
·供试药剂 | 第23页 |
·生物测定 | 第23-24页 |
2 结果与分析 | 第24-28页 |
·对敌敌畏抗性水平 | 第24页 |
·对丁硫克百威的抗性水平 | 第24-25页 |
·对氯氰菊酯的抗性水平 | 第25-26页 |
·对吡虫啉的抗性水平 | 第26页 |
·对烯啶虫胺的抗性水平 | 第26-27页 |
·对阿维菌素的抗性水平 | 第27-28页 |
3 讨论 | 第28-30页 |
第三章 乙酰胆碱酯酶ace1基因和钠离子通道基因片段克隆 | 第30-38页 |
1 材料与方法 | 第30-34页 |
·供试虫源 | 第30页 |
·主要试剂和仪器 | 第30-31页 |
·主要试剂 | 第30-31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
·试验方法 | 第31-34页 |
·单头烟粉虱基因组DNA提取 | 第31页 |
·乙酰胆碱酯酶ace1基因和钠离子通道基因引物设计 | 第31-32页 |
·PCR反应体系 | 第32页 |
·感受态细胞制备 | 第32-33页 |
·连接反应 | 第33页 |
·连接产物的转化 | 第33页 |
·α互补法进行重组质粒的筛选 | 第33-34页 |
·阳性克隆监测 | 第34页 |
·测序 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-36页 |
·乙酰胆碱酯酶ace1基因和钠离子通道基因片段扩增 | 第34-35页 |
·烟粉虱乙酰胆碱酯酶ace1基因片段克隆 | 第35-36页 |
·烟粉虱钠离子通道片段克隆 | 第36页 |
3 讨论 | 第36-38页 |
第四章 Q型烟粉虱抗性等位基因频率检测 | 第38-49页 |
1 材料与方法 | 第38-41页 |
·供试虫源 | 第38-39页 |
·抗性相关突变检测 | 第39-41页 |
·单头烟粉虱雌性成虫基因组DNA提取 | 第39页 |
·乙酰胆碱酯酶ace1基因F331W突变的PCR-RFLP检测 | 第39页 |
·乙酰胆碱酯酶ace1基因片段的PCR扩增 | 第39页 |
·酶切鉴定 | 第39页 |
·钠离子通道基因L925I突变的PCR-RFLP检测 | 第39-40页 |
·para-同源钠离子通道基因片段的PCR扩增 | 第39页 |
·酶切鉴定 | 第39-40页 |
·钠离子通道基因T929V突变的PASA检测 | 第40-41页 |
2 结果与分析 | 第41-46页 |
·与有机磷抗性相关的乙酰胆碱酯酶ace1基因F331W突变检测 | 第41-42页 |
·与拟除虫菊酯抗性相关的钠离子通道基因L9251突变检测 | 第42-44页 |
·与拟除虫菊酯抗性相关的钠离子通道基因T929V突变检测 | 第44-46页 |
3 讨论 | 第46-49页 |
第五章 CYP6M1内含子抗性相关多态性检测及其5’侧翼序列克隆 | 第49-60页 |
1 材料与方法 | 第49-54页 |
·供试虫源 | 第49-50页 |
·试验方法 | 第50-54页 |
·CYP6CM1内含子抗性相关多态性检测 | 第50-51页 |
·引物设计 | 第50页 |
·PCR扩增 | 第50页 |
·PCR产物克隆和测序 | 第50-51页 |
·序列分析 | 第51页 |
·CYP6CM1基因5’侧翼序列克隆 | 第51-54页 |
·多头烟粉虱基因组DNA提取 | 第51-52页 |
·基因组步移 | 第52-54页 |
·第一轮巢式PCR反应 | 第52-53页 |
·第二轮巢式PCR反应 | 第53-54页 |
·第三轮巢式PCR反应 | 第54页 |
·PCR产物克隆及测序 | 第54页 |
·序列分析 | 第54页 |
2 结果与分析 | 第54-58页 |
·CYP6CM1基因第一内含子单核苷酸多态性(SNPs)检测 | 第54-56页 |
·CYP6CM1基因5’侧翼序列分析 | 第56-58页 |
3 讨论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-70页 |
致谢 | 第70-71页 |