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低温解除百合鳞茎休眠过程中抑制性差减cDNA文库构建及EST分析

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
縮略语表第9-10页
1 前言第10-17页
   ·低温解除百合鳞茎休眠的研究进展第10-13页
     ·低温解除百合鳞茎休眠的形态标志第10-11页
     ·低温解除百合鳞茎休眠过程中的生理生化变化研究第11-13页
   ·植物休眠的分子生物学研究进展第13-14页
   ·抑制性差减杂交技术第14-17页
   ·本研究的目的与意义第17页
2 材料和方法第17-35页
   ·植物材料及处理方法第17页
   ·载体及菌种第17-18页
   ·主要试剂和药品第18页
   ·接头和引物序列第18-19页
   ·主要仪器设备第19页
   ·百合鳞茎总RNA的提取第19-20页
     ·外源RNase的去除第19页
     ·RNA的提取第19-20页
     ·总RNA中基因组DNA的酶解第20页
   ·抑制性差减杂交第20-30页
     ·第一链cDNA的合成第21页
     ·第二链cDNA的合成第21-23页
     ·Rsa I酶切第23页
     ·接头连接第23-24页
     ·接头连接效率检测第24-26页
     ·第一次杂交第26页
     ·第二次杂交第26-27页
     ·PCR扩增第27-29页
     ·差减效率的PCR分析第29-30页
   ·应用T/A克隆法构建差减cDNA文库第30-32页
     ·连接第30-31页
     ·连接产物的转化第31页
     ·差减文库的构建第31-32页
   ·斑点杂交筛选差减文库第32-34页
     ·插入片段的扩增及转膜第32页
     ·探针的标记第32-33页
     ·杂交与显色第33-34页
   ·测序与序列分析第34-35页
3 结果与分析第35-54页
   ·低温解除鳞茎休眠过程中顶芽的形态变化第35页
   ·百合鳞茎总RNA提取质量检测第35-36页
   ·链cDNA的合成第36-37页
   ·酶切效率第37页
   ·接头连接效率检测第37-38页
   ·PCR产物的分析第38-39页
   ·差减效率PCR分析第39页
   ·差减文库构建第39-40页
   ·斑点杂交筛选阳性克隆第40页
   ·测序结果及序列分析第40-50页
   ·功能分类第50-54页
     ·GO分类结果第50-52页
     ·COG分类结果第52-53页
     ·KEGG分析第53-54页
4 讨论第54-62页
   ·低温解除百合鳞茎休眠过程中相关基因的探讨第54-59页
     ·糖代谢相关的基因第54-55页
     ·能量代谢相关基因第55页
     ·信号传导相关基因第55-56页
     ·转录相关基因第56页
     ·Cold-regulated gibberellin-regulated protein第56-57页
     ·活性氧清除相关基因第57页
     ·渗透调节基因第57-58页
     ·LEA蛋白第58页
     ·F-BOX蛋白第58-59页
   ·反库中筛选到的差异表达基因的探讨第59-60页
   ·百合鳞茎总RNA的提取第60页
   ·取材第60-61页
   ·低温解除百合鳞茎休眠的标志第61-62页
参考文献第62-72页
附录第72-74页
致谢第74页

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