| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第8-20页 |
| ·抗病基因 | 第8-13页 |
| ·抗病基因分类与结构域 | 第8-9页 |
| ·抗病机制 | 第9-10页 |
| ·抗病基因介导的信号传导 | 第10-11页 |
| ·多个NBS-LRR类基因介导抗性 | 第11-12页 |
| ·抗病基因的进化 | 第12-13页 |
| ·RNA干涉(RNAi)和病毒介导的基因沉默(VIGS) | 第13-17页 |
| ·RNAi和VIGS的分子作用作用机理 | 第13-14页 |
| ·VIGS病毒载体的开发 | 第14-15页 |
| ·VIGS应用过程中影响因素 | 第15-16页 |
| ·RNAi和VIGS技术在植物抗病研究中的应用 | 第16-17页 |
| ·NRG1在N介导的信号传导中的作用 | 第17-19页 |
| ·烟草花叶病毒(TMV)与抗性基因N的互作 | 第17-18页 |
| ·N基因诱导的信号传导 | 第18页 |
| ·NRG1与N共同介导TMV抗性 | 第18-19页 |
| ·研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 2. 实验材料和方法 | 第20-29页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·质粒、农杆菌材料 | 第20页 |
| ·扩增和调取NRG1同源体 | 第20-22页 |
| ·序列分析 | 第22页 |
| ·VIGS方法沉默NRG1基因和信号传导基因 | 第22-27页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| ·TRV2重组载体的构建 | 第23-25页 |
| ·在抗TMV烟草中沉默PDS | 第25-26页 |
| ·烟草中沉默NRG1基因和信号传导基因 | 第26页 |
| ·沉默相应基因的转录水平检测 | 第26-27页 |
| ·农杆菌介导的pHellsgate 8-NRG1转化烟草 | 第27-29页 |
| ·pHellsgate 8-NRG1载体构建 | 第27-28页 |
| ·烟草无菌苗 | 第28页 |
| ·烟草转化和阳性苗检测 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-38页 |
| ·NRG1同源体序列分析 | 第29-31页 |
| ·茄科中扩增NRG1同源体 | 第29-30页 |
| ·NRG1进化分析 | 第30-31页 |
| ·NRG1在抗TMV烟草中的作用 | 第31-36页 |
| ·抗TMV烟草白化效果 | 第31-32页 |
| ·沉默NRG1基因 | 第32-34页 |
| ·沉默信号传导基因 | 第34-36页 |
| ·转NRG1基因烟草的鉴定 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| ·NRG1进化上保守 | 第38页 |
| ·VIGS是烟草研究抗病信号途径的有效方法 | 第38-39页 |
| ·NRG1参与烟草中其他TMV抗性基因介导的抗病反应 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-47页 |
| 附录 | 第47-52页 |
| 1. 引物序列 | 第47-48页 |
| 2. CTAB小样法提取植物基因组DNA | 第48-49页 |
| 3. 热击法转大肠杆菌感受态 | 第49页 |
| 4. 电转化农杆菌 | 第49-50页 |
| 5. Trizol法提取植物RNA | 第50页 |
| 6. SDS裂解法提取质粒 | 第50-51页 |
| 7. 试剂配方 | 第51页 |
| 8. 烟草转化所用培养基配方 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
