中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
研究背景 | 第13-19页 |
参考文献 | 第16-19页 |
第一部分 生长因子在肌腱损伤愈合早期中的表达变化 | 第19-39页 |
1 材料与方法 | 第19-25页 |
·实验动物 | 第19-20页 |
·肌腱手术 | 第20-21页 |
·肌腱标本获取 | 第21页 |
·实时PCR 方法检测生长因子mRNA 表达变化 | 第21-24页 |
·IGF-1、TGF-β和bFGF 的免疫组化染色 | 第24-25页 |
·肌腱的HE 染色 | 第25页 |
·生长因子表达水平的统计学分析 | 第25页 |
2 结果 | 第25-33页 |
·内参GAPDH 普通PCR 结果(示意) | 第25-26页 |
·实时PCR 扩增曲线、熔解曲线和PCR 产物电泳图随机选取示意 | 第26页 |
·在同一时间点各生长因子的mRNA 水平在肌腱愈合早期的表达 | 第26-28页 |
·生长因子在肌腱愈合早期的不同时间点表达 | 第28-30页 |
·生长因子免疫组化染色 | 第30-32页 |
·肌腱在损伤后不同时间点的炎症反应 | 第32-33页 |
3 讨论 | 第33-35页 |
参考文献 | 第35-39页 |
第二部分 注射不同载体转基因至损伤肌腱的效率、分布和组织反应 | 第39-49页 |
1 材料与方法 | 第39-41页 |
·转基因载体及相关试剂 | 第39页 |
·实验动物及分组 | 第39-40页 |
·肌腱标本的获取 | 第40页 |
·转基因效率的荧光显微镜观察 | 第40-41页 |
·转基因载体引起肌腱组织反应观察 | 第41页 |
·肌腱组织反应细胞密度的统计学分析 | 第41页 |
2 结果 | 第41-45页 |
·四种基因治疗方法在损伤肌腱中的转基因效率 | 第41-43页 |
·四种基因治疗方法在损伤肌腱中引起的组织反应 | 第43-45页 |
·肌腱组织反应细胞密度分析 | 第45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-49页 |
第三部分 不同载体在肌腱中转基因效率及 AAV2 介导 bFGF 基因在愈合肌腱中表达的研究 | 第49-57页 |
1 材料与方法 | 第49-52页 |
·载体及相关试剂 | 第49页 |
·实验动物 | 第49-50页 |
·动物手术及分组 | 第50页 |
·肌腱标本的获取 | 第50-51页 |
·GFP 荧光显微镜观察 | 第51页 |
·bFGF 免疫组化染色 | 第51-52页 |
2 结果 | 第52-54页 |
·荧光显微镜观测肌腱细胞表达EGFP | 第52-53页 |
·鸡趾深屈肌腱免疫组织化学染色 | 第53-54页 |
3 讨论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-57页 |
第四部分 基因治疗导入微小RNA沉默肌腱细胞转化生长因子基因的体外研究和体内应用 | 第57-77页 |
1 材料与方法 | 第57-68页 |
·miRNA TGF β1 干扰表达载体的设计及干扰质粒的制备 | 第57-64页 |
·肌腱细胞原代培养 | 第64-65页 |
·基因转染 | 第65页 |
·实时PCR 检测肌腱细胞TGF β1,I 、Ш型胶原和CTGF 基因表达 | 第65-67页 |
·导入miRNAs 至体内损伤肌腱及对损伤肌腱基因表达作用的体内实验 | 第67页 |
·TGF β1、I 型胶原、Ш型胶原和CTGF 基因表达的统计学分析 | 第67-68页 |
2 结果 | 第68-72页 |
·导入miRNA 沉默肌腱细胞TGF β1 基因效果及对I 、Ш型胶原和CTGF 基因表达影响 | 第68-71页 |
·导入miRNA 沉默损伤肌腱TGF β1 基因效果及对I 、Ш型胶原和CTGF 基因表达影响 | 第71-72页 |
3 讨论 | 第72-75页 |
参考文献 | 第75-77页 |
结语 | 第77-78页 |
综述:肌腱损伤与修复 | 第78-90页 |
本课题的基金资助 | 第90-91页 |
博士研究生期间发表和待发表的论文及学术交流 | 第91-93页 |
附录 | 第93-100页 |
致谢 | 第100页 |