| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-24页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·L-色氨酸的理化性质 | 第10页 |
| ·L-色氨酸的应用 | 第10-11页 |
| ·L-色氨酸在食品中的应用 | 第10-11页 |
| ·L-色氨酸在医学中的应用 | 第11页 |
| ·L-色氨酸在饲料中的应用 | 第11页 |
| ·L-色氨酸的生产方法 | 第11-13页 |
| ·蛋白质水解及化学合成法 | 第11-12页 |
| ·微生物法 | 第12-13页 |
| ·L-色氨酸的生产现状 | 第13页 |
| ·L-色氨酸的生物合成途径及代谢调控机制 | 第13-17页 |
| ·L-色氨酸生产常用的菌株 | 第13-14页 |
| ·L-色氨酸的生物合成途径及调控机制 | 第14-17页 |
| ·L-色氨酸的育种思路及育种实例 | 第17-19页 |
| ·诱变育种 | 第17-18页 |
| ·基因工程育种 | 第18-19页 |
| ·L-色氨酸的检测方法 | 第19页 |
| ·实时荧光定量PCR检测基因的表达量 | 第19-22页 |
| ·实时荧光定量PCR的原理 | 第20页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的类型及特点 | 第20-21页 |
| ·实时荧光PCR的定量方法 | 第21-22页 |
| ·实时荧光定量PCR的应用 | 第22页 |
| ·论文的立题背景及主要研究内容 | 第22-24页 |
| 第二章 csm基因的敲除对色氨酸合成的影响 | 第24-48页 |
| ·引言 | 第24-25页 |
| ·实验材料与仪器 | 第25-27页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·主要仪器与设备 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-38页 |
| ·细菌的培养 | 第27页 |
| ·出发菌株SPT9生长曲线的制作及发酵 | 第27页 |
| ·发酵液中色氨酸产量的检测 | 第27-28页 |
| ·谷氨酸棒杆菌基因组的提取 | 第28页 |
| ·谷氨酸棒杆菌敲除载体的构建 | 第28-34页 |
| ·谷氨酸棒杆菌感受态细胞制备、转化及重组子筛选鉴定 | 第34-35页 |
| ·谷氨酸棒杆菌重组子初步发酵产色氨酸 | 第35页 |
| ·实时荧光定量PCR检测csm基因的表达量 | 第35-38页 |
| ·实验结果与分析 | 第38-46页 |
| ·谷氨酸棒杆菌SPT9的生长曲线 | 第38-39页 |
| ·谷氨酸棒杆菌SPT9的色氨酸产量 | 第39-40页 |
| ·谷氨酸棒杆菌SPT9基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
| ·pK18mobsacB-Δcsm 敲除载体及重组菌株的构建 | 第41-43页 |
| ·重组菌的色氨酸产量 | 第43-45页 |
| ·实时荧光定量PCR法对敲除基因csm的检测 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46-48页 |
| 第三章 谷氨酸棒杆菌trpBA基因的过量表达 | 第48-68页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·实验材料与仪器 | 第48-49页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-59页 |
| ·相关引物的设计 | 第49-50页 |
| ·谷氨酸棒杆菌表达载体pEC-XK99E启动子的替换 | 第50-52页 |
| ·trpBA基因的表达载体的构建 | 第52-54页 |
| ·重组质粒转化谷氨酸棒杆菌SPT9csm | 第54-55页 |
| ·谷氨酸棒杆菌重组子初步发酵产色氨酸能力比较 | 第55-56页 |
| ·荧光定量PCR检测trpBA基因的表达量 | 第56页 |
| ·trpEGD-TP-aroⅡ的共表达 | 第56-59页 |
| ·实验结果与分析 | 第59-67页 |
| ·谷氨酸棒杆菌表达载体pEC-XK99E启动子的替换 | 第59-60页 |
| ·trpBA基因的表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·谷酸棒杆菌trpBA基因过量表达菌株的构建 | 第61页 |
| ·重组菌的色氨酸产量 | 第61-63页 |
| ·实时荧光定量PCR法对过量表达基因trpBA的检测 | 第63-65页 |
| ·trpEGD-TP-aroⅡ的共表达 | 第65-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 第四章 结论与展望 | 第68-70页 |
| ·结论 | 第68页 |
| ·展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 附件 | 第77页 |
