| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 绪论（AM2 和BM2 的研究背景与进展） | 第9-21页 |
| ·流感病毒概述 | 第9-10页 |
| ·流感病毒的药物靶标 | 第10-11页 |
| ·AM2 和BM2 基因编码特点 | 第11页 |
| ·M2 离子通道的结构特点 | 第11-13页 |
| ·M2 离子通道的H+选择性及离子通道活化机理 | 第13-14页 |
| ·M2 的功能 | 第14-16页 |
| ·M2 的抑制剂 | 第16-21页 |
| ·金刚烷胺阻断AM2 离子通道的作用机理 | 第17-19页 |
| ·M2 离子通道阻断剂研究现状及瓶颈 | 第19-21页 |
| 第二章 M2 离子通道中金刚烷胺的作用位点研究 | 第21-50页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·小鼠和病毒株 | 第21页 |
| ·质粒、细胞及细胞培养 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21-22页 |
| ·仪器 | 第22页 |
| ·数据分析 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-37页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第22-25页 |
| ·抗原的制备 | 第22-23页 |
| ·免疫小鼠及检测 | 第23-25页 |
| ·重组质粒的构建 | 第25-33页 |
| ·pcDNA4/TO 载体 | 第25页 |
| ·AM2 和BM2 的嵌合形式 | 第25-27页 |
| ·嵌合体基因的构建 | 第27-32页 |
| ·嵌合体基因的扩增 | 第27-31页 |
| ·PCR 产物和载体的酶切 | 第31-32页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第32页 |
| ·重组质粒的转化与鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的转化 | 第32页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第32-33页 |
| ·稳定细胞株的建立 | 第33-36页 |
| ·重组质粒的转染 | 第33-34页 |
| ·Western Blotting 检测目的蛋白的表达 | 第34页 |
| ·免疫荧光检测嵌合体在细胞中的定位 | 第34-35页 |
| ·BCECF 荧光实验检测稳定细胞株的离子通道活性 | 第35-36页 |
| ·嵌合体中金刚烷胺的作用位点检测 | 第36-37页 |
| ·BCECF 检测金刚烷胺的作用 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-46页 |
| ·Western blotting 检测多克隆抗体特异性 | 第37-38页 |
| ·嵌合体基因扩增结果 | 第38页 |
| ·稳定细胞株的建立 | 第38-42页 |
| ·Western blotting 检测目的蛋白的表达 | 第38-39页 |
| ·嵌合体在细胞中的定位 | 第39-42页 |
| ·嵌合体的离子通道活性 | 第42页 |
| ·嵌合体中金刚烷胺的作用位点检测 | 第42-46页 |
| ·BCECF 检测金刚烷胺对嵌合体的作用 | 第42-43页 |
| ·电生理测定金刚烷胺对嵌合体的作用 | 第43-46页 |
| ·讨论 | 第46-50页 |
| 第三章 BM2 阻断剂的筛选 | 第50-58页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·细胞及细胞培养 | 第50页 |
| ·质粒 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50页 |
| ·仪器 | 第50-51页 |
| ·数据分析 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-54页 |
| ·结果 | 第54-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| 缩写表 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第70页 |
