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芫花酯甲抗黑色素瘤的作用及其机理的初步研究

目录第1-6页
摘要第6-10页
Abstract第10-14页
英文所略表第14-17页
前言第17-19页
试验材料第19-32页
 1.细胞系及菌株第19页
 2.细胞培养材料第19页
 3.药品及主要生化试剂第19-21页
 4.抗体第21页
 5.试剂盒第21页
 6.质粒第21-22页
 7.动物第22页
 8.主要仪器第22-23页
 9.溶液的配制第23-32页
实验方法第32-46页
 1.细胞复苏与培养第32页
 2.细胞冻存第32页
 3.生长抑制实验第32-33页
 4.CCK-8法检测芫花酯甲对细胞活力的影响第33页
 5.~3H-TdR掺入法检测芫花酯甲对细胞DNA合成的影响第33-34页
 6.碘化丙啶染色流式细胞术检测芫花酯甲对细胞周期分布的影响第34页
 7.流式细胞术测定芫花酯甲对细胞线粒体膜电势的影响第34-35页
 8.磷脂酰丝氨酸外翻分析检测芫花酯甲对A375细胞的凋亡诱导作用第35页
 9.Bradford法测定蛋白浓度第35-36页
 10.电泳及相关染色第36页
 11.Western Blot测定细胞内蛋白表达变化情况第36-38页
 12.芫花酯甲对细胞内钙离子浓度的影响第38页
 13.PKC的提取纯化以及活性测定第38-41页
 14.质粒的提取、纯化及转染第41-43页
 15.芫花酯甲对于PKCγ的直接激活作用第43页
 16.建立小鼠黑色素瘤模型测定芫花酯甲对肿瘤生长的抑制作用第43-44页
 17.芫花酯甲对黑色素瘤转移性的影响实验第44-45页
 18.数据的处理第45-46页
实验结果第46-76页
 1.芫花酯甲抑制A375人黑色素瘤细胞增殖第46-47页
 2.芫花酯甲对A375细胞活力的影响第47-48页
 3.芫花酯甲对A375细胞DNA合成的影响第48-49页
 4.芫花酯甲对A375细胞周期分布的影响第49-51页
 5.Western blot检测芫花酯甲对A375细胞周期调控蛋白表达的影响第51-53页
 6.磷脂酰丝氨酸外翻分析检测细胞凋亡第53-54页
 7.芫花酯甲对A375细胞线粒体膜电势的影响第54-57页
 8.Western blot检测芫花酯甲对凋亡相关蛋白表达的影响第57-63页
 9.芫花酯甲急性给药对细胞内钙离子浓度的影响第63-64页
 10.芫花酯甲长期给药对细胞内钙离子浓度的影响第64页
 11.芫花酯甲急性给药对细胞内蛋白激酶C活性的影响第64-65页
 12.芫花酯甲对鼠脑PKC粗提物的活性影响第65-68页
 13.芫花酯甲对纯化后的鼠脑PKC活性之影响第68-70页
 14.芫花酯甲对γ-PKC的激活作用第70-72页
 15.芫花酯甲对体内黑色素瘤的生长抑制作用第72-74页
 16.芫花酯甲对黑色素瘤转移的影响第74-76页
讨论第76-87页
结论第87-90页
参考文献第90-100页
综述第100-121页
 蛋白激酶Cδ与细胞凋亡第100-112页
 参考文献第112-121页
致谢第121页

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