目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-10页 |
Abstract | 第10-14页 |
英文所略表 | 第14-17页 |
前言 | 第17-19页 |
试验材料 | 第19-32页 |
1.细胞系及菌株 | 第19页 |
2.细胞培养材料 | 第19页 |
3.药品及主要生化试剂 | 第19-21页 |
4.抗体 | 第21页 |
5.试剂盒 | 第21页 |
6.质粒 | 第21-22页 |
7.动物 | 第22页 |
8.主要仪器 | 第22-23页 |
9.溶液的配制 | 第23-32页 |
实验方法 | 第32-46页 |
1.细胞复苏与培养 | 第32页 |
2.细胞冻存 | 第32页 |
3.生长抑制实验 | 第32-33页 |
4.CCK-8法检测芫花酯甲对细胞活力的影响 | 第33页 |
5.~3H-TdR掺入法检测芫花酯甲对细胞DNA合成的影响 | 第33-34页 |
6.碘化丙啶染色流式细胞术检测芫花酯甲对细胞周期分布的影响 | 第34页 |
7.流式细胞术测定芫花酯甲对细胞线粒体膜电势的影响 | 第34-35页 |
8.磷脂酰丝氨酸外翻分析检测芫花酯甲对A375细胞的凋亡诱导作用 | 第35页 |
9.Bradford法测定蛋白浓度 | 第35-36页 |
10.电泳及相关染色 | 第36页 |
11.Western Blot测定细胞内蛋白表达变化情况 | 第36-38页 |
12.芫花酯甲对细胞内钙离子浓度的影响 | 第38页 |
13.PKC的提取纯化以及活性测定 | 第38-41页 |
14.质粒的提取、纯化及转染 | 第41-43页 |
15.芫花酯甲对于PKCγ的直接激活作用 | 第43页 |
16.建立小鼠黑色素瘤模型测定芫花酯甲对肿瘤生长的抑制作用 | 第43-44页 |
17.芫花酯甲对黑色素瘤转移性的影响实验 | 第44-45页 |
18.数据的处理 | 第45-46页 |
实验结果 | 第46-76页 |
1.芫花酯甲抑制A375人黑色素瘤细胞增殖 | 第46-47页 |
2.芫花酯甲对A375细胞活力的影响 | 第47-48页 |
3.芫花酯甲对A375细胞DNA合成的影响 | 第48-49页 |
4.芫花酯甲对A375细胞周期分布的影响 | 第49-51页 |
5.Western blot检测芫花酯甲对A375细胞周期调控蛋白表达的影响 | 第51-53页 |
6.磷脂酰丝氨酸外翻分析检测细胞凋亡 | 第53-54页 |
7.芫花酯甲对A375细胞线粒体膜电势的影响 | 第54-57页 |
8.Western blot检测芫花酯甲对凋亡相关蛋白表达的影响 | 第57-63页 |
9.芫花酯甲急性给药对细胞内钙离子浓度的影响 | 第63-64页 |
10.芫花酯甲长期给药对细胞内钙离子浓度的影响 | 第64页 |
11.芫花酯甲急性给药对细胞内蛋白激酶C活性的影响 | 第64-65页 |
12.芫花酯甲对鼠脑PKC粗提物的活性影响 | 第65-68页 |
13.芫花酯甲对纯化后的鼠脑PKC活性之影响 | 第68-70页 |
14.芫花酯甲对γ-PKC的激活作用 | 第70-72页 |
15.芫花酯甲对体内黑色素瘤的生长抑制作用 | 第72-74页 |
16.芫花酯甲对黑色素瘤转移的影响 | 第74-76页 |
讨论 | 第76-87页 |
结论 | 第87-90页 |
参考文献 | 第90-100页 |
综述 | 第100-121页 |
蛋白激酶Cδ与细胞凋亡 | 第100-112页 |
参考文献 | 第112-121页 |
致谢 | 第121页 |