| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-31页 |
| 1 研究目的和意义 | 第18页 |
| 2 国内外研究进展 | 第18-29页 |
| ·牛奶免疫活性蛋白功能及提高技术研究进展 | 第18-22页 |
| ·免疫乳生产最新研究进展 | 第22-24页 |
| ·奶牛乳腺Ig合成与分泌机理 | 第24-27页 |
| ·免疫球蛋白转运受体研究进展 | 第27-29页 |
| 3 研究内容和技术路线 | 第29-31页 |
| ·研究内容 | 第29-30页 |
| ·技术路线 | 第30-31页 |
| 第二章 中国荷斯坦奶牛泌乳期乳中免疫活性蛋白含量影响因素 | 第31-48页 |
| 1 研究内容与技术路线 | 第31-32页 |
| ·研究内容 | 第31页 |
| ·技术路线 | 第31-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-35页 |
| ·试验奶牛的选择及样品的采集 | 第32页 |
| ·乳成分及体细胞数的测定 | 第32页 |
| ·夹心ELISA测定Ig和Lf的含量 | 第32-33页 |
| ·IgG/Lf高合成能力奶牛筛选软件开发及奶牛筛选试验 | 第33-35页 |
| ·统计分析 | 第35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-44页 |
| ·单因素方差分析：乳中IgG含量的影响因素 | 第35-38页 |
| ·多元相关分析及通径分析：影响乳中IgG含量的直接因素和间接因素 | 第38-39页 |
| ·典型相关分析 | 第39-43页 |
| ·IgG/Lf高合成能力奶牛筛选试验效果 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| ·影响乳中IgG浓度的因素 | 第44-45页 |
| ·影响乳中Lf浓度的因素 | 第45页 |
| ·乳中Ig和Lf浓度与DHI数据之间的典型相关分析及其应用 | 第45-46页 |
| ·本研究所涉及的因素未能足够刻画乳中Ig的变异信息 | 第46-47页 |
| 5 本章结论 | 第47-48页 |
| 第三章 中国荷斯坦奶牛FcRn受体α链FCGRT基因和β链82M基因SNP多态性与乳中IgG含量及转运的相关性研究 | 第48-60页 |
| 1 研究内容与技术路线 | 第49页 |
| ·研究内容 | 第49页 |
| ·技术路线 | 第49页 |
| 2 材料与方法 | 第49-51页 |
| ·试验奶牛的选择及样品的采集 | 第49页 |
| ·夹心ELISA测定血液及乳中IgG含量 | 第49页 |
| ·样品DNA的提取 | 第49-50页 |
| ·PCR扩增、产物测序及SNP位点的确定 | 第50页 |
| ·FCGRT基因利用SNP Stream进行基因分型 | 第50-51页 |
| ·82M基因利用直接测序法进行基因分型 | 第51页 |
| ·统计分析 | 第51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-58页 |
| ·DNA提取效果及PCR扩增结果 | 第51-52页 |
| ·PCR产物测序分析发现SNP位点 | 第52-53页 |
| ·FCGRT基因多态性分析及其与乳中IgG含量及转运的相关 | 第53-56页 |
| ·B2M基因多态性分析及其与乳中IgG含量及转运的相关 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-59页 |
| 5 本章结论 | 第59-60页 |
| 第四章 免疫刺激复合物（ISCOM）疫苗制作及对小鼠免疫功能的影响 | 第60-68页 |
| 1 研究内容与技术路线 | 第60-61页 |
| ·研究内容 | 第60页 |
| ·技术路线 | 第60-61页 |
| 2 材料与方法 | 第61-62页 |
| ·抗原模型 | 第61页 |
| ·ISCOM疫苗制作 | 第61-62页 |
| ·ISCOM疫苗免疫效果 | 第62页 |
| ·数据统计 | 第62页 |
| 3 结果与分析 | 第62-65页 |
| ·ISCOM疫苗电镜观察结果 | 第62-63页 |
| ·ISCOM疫苗体内毒性试验及安全剂量 | 第63-64页 |
| ·ISCOM疫苗对小鼠血清特异性抗体效价的影响 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| ·ISCOM微粒的制备 | 第65页 |
| ·Quil A是ISCOM疫苗安全性的限制因素 | 第65-66页 |
| ·ISCOM对小鼠体液免疫的影响 | 第66-67页 |
| 5 本章结论 | 第67-68页 |
| 第五章 奶牛埋植抗原缓释剂（ARD）后乳中IgG含量及转运变化 | 第68-95页 |
| 1 研究内容与技术路线 | 第68-69页 |
| ·研究内容 | 第68-69页 |
| ·技术路线 | 第69页 |
| 2 材料与方法 | 第69-74页 |
| ·第一期试验 | 第69-72页 |
| ·第二期试验 | 第72-73页 |
| ·数据统计 | 第73-74页 |
| 3 结果与分析 | 第74-90页 |
| ·第一期试验 | 第74-79页 |
| ·第二期试验 | 第79-90页 |
| 4 讨论 | 第90-93页 |
| ·ARD埋植是一种新型的免疫乳生产方法 | 第90-92页 |
| ·ARD生产免疫乳与其他方法的比较 | 第92页 |
| ·抗体的乳腺转运在奶牛个体间存在较大差异 | 第92-93页 |
| ·ARD埋植免疫后抗体转运出现短暂性上调 | 第93页 |
| 5 本章结论 | 第93-95页 |
| 第六章 初乳、常乳和免疫乳中的IgG含量的变化规律及比较 | 第95-102页 |
| 1 研究内容与技术路线 | 第95-96页 |
| ·研究内容 | 第95页 |
| ·技术路线 | 第95-96页 |
| 2 材料与方法 | 第96页 |
| ·免疫后乳样品的采集 | 第96页 |
| ·初乳和常乳样品采集 | 第96页 |
| ·乳清和血清特异性抗体滴度的测定 | 第96页 |
| ·乳清和血清中总IgG含量的测定 | 第96页 |
| ·SDS-PAGE电泳及相对定量分析 | 第96页 |
| ·统计分析 | 第96页 |
| 3 结果与分析 | 第96-100页 |
| ·初乳中特异性IgG的变化规律及与免疫乳的比较 | 第96-97页 |
| ·初乳、常乳中总Ig含量的变化规律及与免疫乳的比较 | 第97-98页 |
| ·SDS-PAGE电泳及其相对定量分析 | 第98-100页 |
| 4 讨论 | 第100-101页 |
| ·初乳中免疫球蛋白含量的变化规律及其与免疫乳的比较 | 第100页 |
| ·SDS-PAGE电泳及乳清中主要蛋白的相对定量分析 | 第100-101页 |
| 5 本章结论 | 第101-102页 |
| 第七章 小鼠ISCOM免疫刺激对乳腺IgG转运及FcRn受体表达的影响 | 第102-122页 |
| 1 研究内容与技术路线 | 第102-103页 |
| ·研究内容 | 第102页 |
| ·技术路线 | 第102-103页 |
| 2 材料与方法 | 第103-107页 |
| ·ISCOM疫苗制作 | 第103页 |
| ·泌乳小鼠的准备、免疫及样品采集 | 第103页 |
| ·小鼠免疫细胞、细胞因子及IgG的测定 | 第103-104页 |
| ·Real Time-PCR测定小鼠乳腺FcRn基因mRNA表达 | 第104-106页 |
| ·免疫荧光测定乳腺FcRn在细胞膜的表达 | 第106页 |
| ·数据统计分析 | 第106-107页 |
| 3 结果与分析 | 第107-118页 |
| ·ISCOM免疫对小鼠细胞免疫功能的影响 | 第107-111页 |
| ·ISCOM免疫对小鼠体液免疫功能的影响 | 第111-113页 |
| ·ISCOM免疫对小鼠乳腺FCGRT和82M基因mRNA表达量的影响 | 第113-116页 |
| ·ISCOM免疫对小鼠乳腺FcRn受体在细胞膜上表达的影响 | 第116-118页 |
| 4 讨论 | 第118-120页 |
| ·ISCOM疫苗对小鼠体液及细胞免疫的影响 | 第118-119页 |
| ·ISCOM疫苗对小鼠IgG转运的影响 | 第119页 |
| ·ISCOM疫苗对受体表达的影响 | 第119-120页 |
| 5 本章结论 | 第120-122页 |
| 第八章 总体结论 | 第122-125页 |
| 1 论文总体结论 | 第122-123页 |
| 2 本研究创新点 | 第123-124页 |
| 3 有待进一步研究的问题 | 第124-125页 |
| 参考文献 | 第125-136页 |
| 附录 | 第136-155页 |
| 附录一 ELISA测定乳中总Ig含量和特异性抗体效价 | 第136-139页 |
| 附录二 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所《IgG/Lf高合成能力奶牛筛选系统V1.0》程序设计和解决方案 | 第139-141页 |
| 附录三 12 重SNPstream基因分型系统操作方法 | 第141-145页 |
| 附录四 本研究登录Genebank的SNP序列 | 第145-153页 |
| 附录五 SDS-PAGE电泳及Quantity One定量分析 | 第153-155页 |
| 致谢 | 第155-157页 |
| 个人简历 | 第157-158页 |
