克氏螯虾酚氧化酶原全长cDNA的克隆与序列分析
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 主要缩写词 | 第7-10页 |
| 文献综述 | 第10-20页 |
| 1 引言 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-30页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·试验动物 | 第21页 |
| ·菌株与克隆载体 | 第21页 |
| ·主要试剂和酶 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-30页 |
| ·试剂配制 | 第22-23页 |
| ·克氏螯虾血细胞RNA的提取 | 第23页 |
| ·引物设计和合成 | 第23-24页 |
| ·反转录cDNA第一链 | 第24-25页 |
| ·proPO部分片段的扩增 | 第25页 |
| ·3'RACE | 第25页 |
| ·5'RACE | 第25-27页 |
| ·PCR产物的胶回收 | 第27页 |
| ·连接 | 第27页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·电转化 | 第28页 |
| ·质粒DNA的小量提取和鉴定 | 第28页 |
| ·酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·序列测定与分析 | 第29页 |
| ·密码子使用频率参数分析 | 第29页 |
| ·节肢动物proPO序列分析 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-44页 |
| ·proPO基因cDNA全长的克隆 | 第30-31页 |
| ·proPO基因部分片段的克隆 | 第30页 |
| ·3'端序列快速扩增(3'RACE) | 第30-31页 |
| ·5'端序列快速扩增(5'RACE) | 第31页 |
| ·序列拼接 | 第31页 |
| ·proPO基因cDNA序列分析 | 第31-39页 |
| ·克氏螯虾proPO基因结构分析 | 第31-37页 |
| ·克氏螯虾proPO基因的重复序列 | 第37页 |
| ·3'非编码区序列比对分析 | 第37-39页 |
| ·克氏螯虾proPO基因编码氨基酸序列分析 | 第39-42页 |
| ·克氏螯虾proPO基因编码氨基酸组成 | 第39-40页 |
| ·氨基酸同源性分析 | 第40-41页 |
| ·氨基酸分子进化树 | 第41-42页 |
| ·克氏螯虾proPO基因密码子非随机应用 | 第42-44页 |
| ·克氏螯虾proPO基因的密码子使用频率 | 第42页 |
| ·密码子使用频率的相关性分析 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-48页 |
| ·RACE方法的应用 | 第44页 |
| ·proPO基因的不同转录本的获得 | 第44页 |
| ·克氏螯虾proPO基因结构分析 | 第44-45页 |
| ·克氏螯虾proPO基因编码氨基酸序列分析 | 第45-46页 |
| ·克氏螯虾proPO基因的密码子使用分析 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 个人简介 | 第56页 |
