| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 前言 | 第15-19页 |
| 第一章 刚地弓形虫BAG1基因的克隆、表达及具有特异免疫反应性的重组BAG1抗原的初步应用 | 第19-55页 |
| 1 材料 | 第19-23页 |
| 2 方法 | 第23-36页 |
| 3 结果 | 第36-51页 |
| ·细胞培养与弓形虫缓殖子的获取 | 第36页 |
| ·弓形虫BAG1基因cDNA序列的克隆与鉴定 | 第36-41页 |
| ·弓形虫BAG1基因的RT-PCR扩增 | 第36-37页 |
| ·重组质粒pMD18-T-BAG1的构建与鉴定 | 第37-38页 |
| ·测序结果及序列比对 | 第38-41页 |
| ·pET32a(+)-BAG1重组质粒的构建及鉴定 | 第41页 |
| ·酶切鉴定重组质粒pET32a(+)-BAG1 | 第41页 |
| ·测序结果 | 第41页 |
| ·pET32a(+)-BAG1/BL21诱导表达结果 | 第41-42页 |
| ·表达条件的优化结果 | 第42-45页 |
| ·优化条件增加融合蛋白表达量 | 第42-44页 |
| ·优化条件促进融合蛋白的可溶性表达 | 第44-45页 |
| ·重组蛋白纯化结果 | 第45页 |
| ·rBAG1蛋白的免疫反应性分析 | 第45-47页 |
| ·rBAG1抗原在弓形虫感染的免疫学检测中的初步应用 | 第47-48页 |
| ·最佳包被浓度 | 第47页 |
| ·ELISA检测350份人血清结果 | 第47-48页 |
| ·抗重组BAG1单克隆抗体的制备与鉴定结果 | 第48-51页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第48页 |
| ·单克隆抗体的SDS-PAGE分析 | 第48页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第48-50页 |
| ·单克隆抗体的效价 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| 5 小结 | 第54-55页 |
| 第二章 刚地弓形虫SAG4基因的克隆、表达与及对重组抗原的免疫反应性分析 | 第55-68页 |
| 1 材料 | 第55-57页 |
| 2 方法 | 第57-62页 |
| 3 结果 | 第62-66页 |
| ·弓形虫SAG4基因的PCR扩增结果 | 第62页 |
| ·重组质粒pGEX4T-1-SAG4的构建与鉴定 | 第62-63页 |
| ·测序结果及序列比对 | 第63-64页 |
| ·pGEX4T-1-SAG4/BL21诱导表达结果 | 第64-65页 |
| ·表达条件的优化 | 第65页 |
| ·重组SAG4抗原的免疫反应性分析 | 第65-66页 |
| 4 讨论 | 第66-67页 |
| 5 小结 | 第67-68页 |
| 附篇 一种广州管圆线虫新基因——胶原蛋白全长cDNA序列的克隆、鉴定及生物信息学分析 | 第68-79页 |
| 1 前言 | 第68-69页 |
| 2 材料 | 第69-70页 |
| 3 方法 | 第70-73页 |
| 4 结果 | 第73-77页 |
| ·EST Blast结果 | 第73页 |
| ·PCR结果 | 第73页 |
| ·广州管圆线虫胶原蛋白全长cDNA序列及氨基酸序列 | 第73-75页 |
| ·广州管圆线虫与秀丽隐杆线虫胶原蛋白在蛋白水平的同源性比较 | 第75页 |
| ·目标蛋白用Motif Scan和SMART等程序进行结构功能位点搜索 | 第75-77页 |
| ·新基因在GenBank注册 | 第77页 |
| ·pMD18-T-AcCOL和pET32a(+)-AcCOL的构建与鉴定 | 第77页 |
| 5 讨论 | 第77-78页 |
| 6 小结 | 第78-79页 |
| 总结 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-86页 |
| 附录(缩略语词汇表) | 第86-87页 |
| 硕士期间论文发表情况 | 第87-88页 |
| 综述 | 第88-100页 |
| 统计学审稿证明 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-103页 |
