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杨树抗真菌病转基因的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-12页
1 绪论第12-39页
   ·木霉菌的生防应用及前景第12-17页
     ·木霉第12-15页
     ·几丁质酶基因克隆及防治真菌病害研究第15-16页
     ·木霉菌的生防应用及前景第16-17页
   ·杨树转基因的研究进展第17-22页
     ·抗病害转基因研究第18页
     ·抗虫害转基因研究第18-19页
     ·抗除草剂的研究第19-20页
     ·降木质素的研究第20-21页
     ·抗逆境的研究第21-22页
     ·转基因林木的应用前景第22页
   ·几丁质酶基因的研究及其应用第22-28页
     ·几丁质酶的结构第22-23页
     ·几丁质酶的分类第23-24页
     ·几丁质酶的生物学特性第24-26页
     ·几丁质酶基因在基因工程中的研究进展第26-27页
     ·几丁质酶基因和β-1,3葡聚糖酶基因协同作用第27-28页
   ·转基因植株检测第28-37页
   ·课题研究的目的及意义第37-39页
2 材料与方法第39-57页
   ·实验材料第39-41页
     ·植物材料第39页
     ·菌种第39页
     ·质粒第39页
     ·主要试剂第39-40页
     ·主要仪器设备第40-41页
   ·方法第41-57页
     ·木霉总DNA及质粒DNA的提取第41-42页
     ·木霉几丁质酶基因的克隆及分析第42-44页
     ·大肠杆菌的转化第44-46页
     ·转基因抑菌剂及筛选抗生素的选择与确定第46-47页
     ·小黑杨的遗传转化第47-48页
     ·杨树基因组DNA的提取第48-49页
     ·杨树总RNA的提取第49-50页
     ·转基因植株的检测第50-55页
     ·几丁质酶活力测定第55-57页
3 结果与分析第57-84页
   ·木霉几丁质酶基因克隆结果与分析第57-70页
     ·木霉总DNA提取第57页
     ·PCR产物的获得和克隆第57-58页
     ·基因序列与同源性分析第58-70页
   ·转基因材料几丁质酶基因的鉴定及转化第70-71页
   ·转基因抑菌剂头孢及筛选抗生素浓度的选择与确定第71-74页
     ·抑菌剂头孢唑林钠浓度的选择第71-73页
     ·筛选用卡那霉素(KM)的浓度第73-74页
   ·农杆菌介导的抗病基因转化第74-78页
     ·受体材料对转化的影响第74-75页
     ·预培养时间对叶片分化和转化的影响第75-76页
     ·菌液浓度对叶片分化和转化的影响第76页
     ·共培养对叶片分化和转化的影响第76-77页
     ·不同筛选方法对叶片分化和转化的影响第77-78页
     ·侵染时间对叶片分化和转化的影响第78页
   ·转基因植株的分子检测第78-81页
     ·再生植株的PCR检测第78-79页
     ·探针标记效率的检测第79-80页
     ·阳性植株的PCR-Southern杂交检测第80页
     ·RT-PCR扩增第80-81页
   ·转基因植株几丁质酶活力的测定与分析第81-82页
   ·本章小节第82-84页
     ·木霉几丁质酶基因克隆小结第82页
     ·小黑杨转几丁质酶基因小结第82-84页
结论第84-86页
参考文献第86-97页
附录I第97-98页
附录II第98-99页
攻读学位期间发表的学术论文第99-100页
致谢第100-101页

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