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支气管哮喘大鼠淋巴细胞的差异表达蛋白质组学研究

内容提要第1-14页
第一章 前言第14-18页
第二章 文献综述第18-49页
 第一节 蛋白质组学在支气管哮喘研究中的应用第18-25页
  1.用差异表达蛋白质组学方法研究哮喘气道炎症的机制第18-20页
  2.差异表达蛋白质组学方法在气道重构机制的的研究第20-21页
  3.阿斯匹林诱发哮喘机制的研究第21页
  4.有关IL-12调节蛋白的研究第21页
  5.地塞米松治疗哮喘前后蛋白质组学研究第21-22页
  6.蛋白质组学在哮喘其他方面研究中的应用第22-23页
  7.存在的问题和展望第23页
  参考文献第23-25页
 第二节 蛋白质组学及其相关技术研究进展第25-36页
  1.蛋白质组学的概念第26-27页
  2.蛋白质组实验技术第27-31页
   ·双向电泳技术第27-29页
   ·质谱鉴定技术第29-31页
  3.蛋白质组数据库第31-32页
  4.其它蛋白质组研究相关技术第32-33页
  参考文献第33-36页
 第三节 支气管哮喘发病机制的研究进展第36-49页
  1.参与哮喘气道炎症反应的细胞及其细胞因子作用第37-39页
   ·T细胞在介导哮喘气道炎症中的作用第37页
   ·参与哮喘气道炎症反应的其他细胞第37-39页
  2.参与气道重构的细胞和细胞外基质第39-45页
   ·平滑肌细胞在哮喘气道重构中的作用第39-40页
   ·细胞外基质在哮喘气道重构中的作用第40-42页
   ·细胞因子和炎症介质在气道重构中的的机制第42-45页
  参考文献第45-49页
第三章 哮喘大鼠淋巴细胞蛋白质表达变化的研究第49-98页
 第一节 大鼠哮喘动物模型的建立第49-67页
  1.材料和方法第49-53页
   ·模型特点和造模机理第49页
   ·材料第49-50页
   ·主要仪器第50-51页
   ·统计学方法第51页
   ·方法第51-53页
  2.结果第53-66页
   ·模型鉴定第53-63页
   ·治疗后结果第63-66页
  3.小结第66-67页
 第二节 哮喘大鼠淋巴细胞蛋白质的双向电泳及图谱分析第67-75页
  1.材料和仪器第67-69页
   ·试剂第67页
   ·仪器设备第67-68页
   ·试剂配制第68-69页
  2.实验方法第69-73页
   ·淋巴细胞分离第69-70页
   ·淋巴细胞蛋白质提取第70-71页
   ·双向电泳第71-72页
   ·染色第72-73页
  3.统计学方法第73页
  4.小结第73-75页
 第三节 哮喘大鼠淋巴细胞差异表达蛋白的质谱鉴定及功能分析第75-98页
  1.材料和方法第75-77页
   ·化学试剂与耗材第75页
   ·仪器设备第75-76页
   ·差异表达蛋白点MALDI-TOF质谱鉴定第76-77页
   ·生物信息学分析第77页
  2.结果第77-91页
   ·标本的纯度和2-DE图谱的匹配率第77-78页
   ·差异表达蛋白的质谱鉴定结果第78-89页
   ·蛋白质在等电点和分子量检测值与理论值的比较第89页
   ·差异点的数据库检索预测分析第89-91页
  3.讨论第91-98页
   ·信号通路相关蛋白在哮喘中的作用第91-94页
   ·结构性蛋白及其调控蛋白在气道重构中的作用第94-97页
   ·代谢相关蛋白在哮喘中的作用第97页
   ·其它类蛋白在哮喘中的作用第97-98页
第四章 差异表达蛋白质RNA水平的研究第98-124页
 第一节 哮喘差异表达蛋白质RNA的定量分析第98-107页
  1.实验材料第98-100页
   ·实验动物第98页
   ·主要试剂和仪器第98-99页
   ·引物设计及引物第99-100页
  2.实验方法第100-103页
   ·实验流程第100页
   ·哮喘大鼠模型的建立第100-101页
   ·总RNA提取第101-102页
   ·RNA浓度和纯度鉴定第102页
   ·cDNA的制备第102页
   ·目的序列的扩增反应第102页
   ·数据分析第102-103页
  3.实验结果第103-106页
   ·RNA浓度和纯度鉴定第103页
   ·定量的准确性第103页
   ·实验的重复性第103-104页
   ·目的序列的扩增结果第104-106页
  4.讨论第106-107页
  5.小结第107页
 第二节 对哮喘差异表达蛋白—膜联蛋白A3原位杂交的研究第107-124页
  1.实验材料第107-110页
   ·实验动物第107-108页
   ·主要试剂第108-110页
  2.实验方法第110-111页
   ·实验流程第110页
   ·哮喘大鼠模型的建立第110页
   ·标本固定第110-111页
   ·原位杂交的染色步骤第111页
   ·原位杂交对照第111页
  3.原位杂交结果第111-115页
  4.讨论第115-116页
  5.小结第116-118页
  参考文献第118-124页
结论第124-125页
攻博期间发表的学术论文及其他成果第125-127页
中文摘要第127-130页
ABSTRACT第130-133页
附录1.Table 5.A list of the identified proteins第133-134页
导师及作者简介第134-135页
致谢第135页

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