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H7亚型禽流感病毒HA、HA1基因重组杆状病毒表达及其抗原性检测

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 引言第11-23页
   ·H7亚型禽流感的流行病学进展第11-13页
     ·易感动物第11-12页
     ·H7亚型禽流感的流行情况第12页
     ·H7亚型禽流感病毒直接感染人第12-13页
   ·禽流感病毒的生物学第13-16页
     ·禽流感的病原学第13页
     ·禽流感病毒基因结构及其功能第13-14页
     ·禽流感病毒的致病力第14-15页
     ·禽流感病毒的流行病学第15-16页
   ·禽流感病毒与人类禽流感第16-18页
     ·禽流感病毒跨种属感染流行概况第16-17页
     ·禽流感病毒与人流感的关系第17-18页
   ·血凝素(HEMAGGLUTININ,HA)与禽流感病毒致病性的关系第18-21页
     ·HA基因和立体三维结构第18-19页
     ·HA与病毒感染的相关性第19-20页
     ·HA氨基酸残基与病毒毒力的相关性第20-21页
   ·本试验研究的目的和意义第21-23页
2 材料与方法第23-32页
   ·试验材料第23-25页
     ·质粒、菌种与细胞第23页
     ·引物第23页
     ·工具酶第23页
     ·分子生物学试剂第23页
     ·生化试剂第23-24页
     ·抗体、血清和主要耗材第24页
     ·参考毒株第24页
     ·主要仪器第24-25页
   ·试验方法第25-32页
     ·HA、HA1基因的克隆及鉴定第25-27页
     ·HA、HA1重组杆状病毒表达载体的构建第27-31页
     ·H1-H15亚型AIV HA1、HA2氨基酸序列比较第31-32页
3 结果第32-42页
   ·H7-HA基因的重组杆状病毒表达的结果第32-35页
     ·H7-HA基因克隆载体的构建第32页
     ·H7-HA基因表达载体的构建第32-33页
     ·昆虫细胞的转染及重组病毒的蚀斑鉴定第33页
     ·重组病毒筛选的PCR鉴定第33-34页
     ·重组病毒HA表达产物的SDS-PAGE检测第34页
     ·重组病毒HA表达产物的生物学活性鉴定第34-35页
   ·H7-HA1基因的重组杆状病毒表达的结果第35-38页
     ·H7-HA1基因克隆载体的构建第35-36页
     ·H7-HA1基因表达载体的构建第36页
     ·重组病毒筛选的PCR鉴定第36-37页
     ·重组病毒HA1表达产物的SDS-PAGE检测第37页
     ·重组病毒HA1表达产物的生物学活性鉴定第37-38页
   ·HA-HA1的结果第38-40页
     ·重组病毒HA-HA1的SDS-PAGE结果第38-39页
     ·重组病毒HA-HA1的WESTERNBLOTTING分析第39页
     ·重组病毒HA-HA1的DOT-ELISA分析第39-40页
   ·H1-H15亚型AIV HA1、HA2氨基酸序列比较第40-42页
4 讨论第42-48页
   ·表达H7亚型HA基因的依据第42页
   ·表达H7亚型HA1基因的依据第42-43页
   ·关于HA、HA1蛋白糖基化的分析第43-44页
   ·关于去除编码血凝素信号肽的核苷酸部分第44页
   ·重组杆状病毒表达HA、HA1蛋白的要点第44-45页
   ·昆虫杆状病毒表达系统中重组蛋白质的降解第45-46页
   ·重组杆状病毒表达HA、HA1蛋白的应用前景第46-48页
5 结论第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-57页
攻读硕士期间发表的学术论文第57页

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