摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第1章 绪论 | 第8-16页 |
·蛋白激酶CK2 概述 | 第8-11页 |
·蛋白激酶CK2 的结构 | 第8-10页 |
·蛋白激酶CK2 的作用底物 | 第10-11页 |
·蛋白激酶CK2 功能介绍 | 第11-14页 |
·蛋白激酶CK2 与肿瘤发生 | 第11-12页 |
·蛋白激酶CK2 与细胞凋亡 | 第12-14页 |
·本课题前期工作 | 第14-15页 |
·本课题研究目的与意义 | 第15-16页 |
第2章 实验材料和方法 | 第16-33页 |
·实验材料 | 第16-23页 |
·菌株及细胞系 | 第16页 |
·实验载体质粒 | 第16-18页 |
·引物 | 第18页 |
·实验试剂 | 第18-22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·软件及生物信息学数据库 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-33页 |
·重组子的构建 | 第23-28页 |
·蛋白表达 | 第28-31页 |
·mP24 假定蛋白CK2 磷酸化活性分析 | 第31-33页 |
第3章 新基因mp24 及其假定蛋白的生物信息学分析 | 第33-38页 |
·新基因mp24 的生物信息学分析结果 | 第33-35页 |
·基因序列分析 | 第33页 |
·mP24 假定蛋白的基本理化特性分析 | 第33-35页 |
·蛋白质结构域分析 | 第35页 |
·人源性hp23 及鼠源性的mp24 基因相似性分析 | 第35-37页 |
·本章小结 | 第37-38页 |
第4章 mP24 假定蛋白的细胞定位分析 | 第38-44页 |
·mp24 基因ORF区的扩增和确认 | 第38-40页 |
·真核表达载体构建与验证 | 第40-41页 |
·mp24 基因真核表达载体瞬时转染NIH3T3 细胞 | 第41页 |
·mP24 假定蛋白的细胞定位 | 第41-42页 |
·mP24 假定蛋白细胞定位与功能相关性分析 | 第42页 |
·本章小结 | 第42-44页 |
第5章 mP24 磷酸化活性的分析 | 第44-53页 |
·细胞裂解液和免疫沉淀产物的获得 | 第44页 |
·mP24 的CK2 激酶活性的检测 | 第44-45页 |
·mP24 作为CK2 激酶底物被磷酸化的检测 | 第45-46页 |
·突变体mp24-M2 磷酸化活性的分析 | 第46-47页 |
·突变体mp24-M2 的获得 | 第46页 |
·mP24 突变体磷酸化活性的测定 | 第46-47页 |
·各样品CK2 激酶活性比较 | 第47页 |
·各样品CK2 激酶底物活性比较 | 第47页 |
·本章小结 | 第47-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-57页 |
附录Ⅰ p24 基因鼠源SNP位点 | 第57-58页 |
附录Ⅱ pDNA3.1/mp24 重组体测序结果 | 第58-60页 |
附录Ⅲ pGEM-T/mp24-M2 重组体测序结果 | 第60-63页 |
致谢 | 第63页 |