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mP24假定蛋白的CK2磷酸化活性测定

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第1章 绪论第8-16页
   ·蛋白激酶CK2 概述第8-11页
     ·蛋白激酶CK2 的结构第8-10页
     ·蛋白激酶CK2 的作用底物第10-11页
   ·蛋白激酶CK2 功能介绍第11-14页
     ·蛋白激酶CK2 与肿瘤发生第11-12页
     ·蛋白激酶CK2 与细胞凋亡第12-14页
   ·本课题前期工作第14-15页
   ·本课题研究目的与意义第15-16页
第2章 实验材料和方法第16-33页
   ·实验材料第16-23页
     ·菌株及细胞系第16页
     ·实验载体质粒第16-18页
     ·引物第18页
     ·实验试剂第18-22页
     ·主要仪器第22-23页
     ·软件及生物信息学数据库第23页
   ·实验方法第23-33页
     ·重组子的构建第23-28页
     ·蛋白表达第28-31页
     ·mP24 假定蛋白CK2 磷酸化活性分析第31-33页
第3章 新基因mp24 及其假定蛋白的生物信息学分析第33-38页
   ·新基因mp24 的生物信息学分析结果第33-35页
     ·基因序列分析第33页
     ·mP24 假定蛋白的基本理化特性分析第33-35页
     ·蛋白质结构域分析第35页
   ·人源性hp23 及鼠源性的mp24 基因相似性分析第35-37页
   ·本章小结第37-38页
第4章 mP24 假定蛋白的细胞定位分析第38-44页
   ·mp24 基因ORF区的扩增和确认第38-40页
   ·真核表达载体构建与验证第40-41页
   ·mp24 基因真核表达载体瞬时转染NIH3T3 细胞第41页
   ·mP24 假定蛋白的细胞定位第41-42页
   ·mP24 假定蛋白细胞定位与功能相关性分析第42页
   ·本章小结第42-44页
第5章 mP24 磷酸化活性的分析第44-53页
   ·细胞裂解液和免疫沉淀产物的获得第44页
   ·mP24 的CK2 激酶活性的检测第44-45页
   ·mP24 作为CK2 激酶底物被磷酸化的检测第45-46页
   ·突变体mp24-M2 磷酸化活性的分析第46-47页
     ·突变体mp24-M2 的获得第46页
     ·mP24 突变体磷酸化活性的测定第46-47页
   ·各样品CK2 激酶活性比较第47页
   ·各样品CK2 激酶底物活性比较第47页
   ·本章小结第47-53页
结论第53-54页
参考文献第54-57页
附录Ⅰ p24 基因鼠源SNP位点第57-58页
附录Ⅱ pDNA3.1/mp24 重组体测序结果第58-60页
附录Ⅲ pGEM-T/mp24-M2 重组体测序结果第60-63页
致谢第63页

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