| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 缩略语表 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-39页 |
| 1 犬瘟热的危害 | 第17页 |
| 2 犬瘟热病病原学 | 第17-25页 |
| ·犬瘟热病毒的形态和理化特性 | 第18页 |
| ·犬瘟热病毒基因组 | 第18-19页 |
| ·犬瘟热病毒结构蛋白及基因 | 第19-25页 |
| 3 犬瘟热病流行病学 | 第25-30页 |
| ·犬瘟热病流行趋势和特点 | 第25页 |
| ·犬瘟热病易感动物、传染源及传播途径 | 第25-26页 |
| ·犬瘟热病毒基因型分析 | 第26-27页 |
| ·犬瘟热病流行原因 | 第27-30页 |
| 4 犬瘟热的临床症状 | 第30-32页 |
| 5 犬瘟热病毒的致病机理 | 第32-33页 |
| ·脱髓鞘机理的研究 | 第32页 |
| ·硬足症发生机理的研究 | 第32-33页 |
| 6 犬瘟热病诊断技术 | 第33-36页 |
| ·包涵体检查 | 第33页 |
| ·病毒分离鉴定 | 第33-34页 |
| ·电镜诊断技术 | 第34页 |
| ·CDV特异性抗原和抗体的检测 | 第34页 |
| ·分子生物学诊断 | 第34-35页 |
| ·鉴别诊断 | 第35-36页 |
| 7 犬瘟热病的综合防制 | 第36-39页 |
| 第二章 水貂源犬瘟热病毒的分离与鉴定 | 第39-52页 |
| 1 引言 | 第39-40页 |
| 2 材料与方法 | 第40-44页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-44页 |
| ·病毒的分离培养 | 第41-42页 |
| ·分离病毒的鉴定 | 第42-44页 |
| 3 结果 | 第44-49页 |
| ·病毒的分离培养结果 | 第44-46页 |
| ·分离病毒的鉴定结果 | 第46-49页 |
| ·病毒的TCID_(50)测定结果 | 第46页 |
| ·病毒的理化特性测定结果 | 第46页 |
| ·包涵体检查结果 | 第46页 |
| ·病毒中和试验结果 | 第46-47页 |
| ·间接免疫荧光试验结果 | 第47-48页 |
| ·RT-PCR扩增鉴定结果 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| ·关于病毒的分离 | 第49-50页 |
| ·分离病毒细胞的选择 | 第49页 |
| ·细胞培养维持液中血清的处理 | 第49-50页 |
| ·病料的细胞接种方法和接种时间 | 第50页 |
| ·关于分离病毒的鉴定 | 第50-51页 |
| ·常规病毒学鉴定 | 第50页 |
| ·分离病毒的RT-PCR鉴定 | 第50-51页 |
| 5 小结 | 第51-52页 |
| 第三章 水貂犬瘟热病毒F基因和H基因的克隆及序列分析 | 第52-82页 |
| 1 引言 | 第52页 |
| 2 材料与方法 | 第52-59页 |
| ·材料 | 第52-54页 |
| ·方法 | 第54-59页 |
| ·犬瘟热病毒的培养 | 第55页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第55页 |
| ·引物的设计与合成 | 第55页 |
| ·目的基因的RT-PCR扩增 | 第55-56页 |
| ·目的基因的纯化 | 第56页 |
| ·目的基因与T载体的连接 | 第56-57页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备(CaCl_2法) | 第57页 |
| ·连接产物的转化 | 第57页 |
| ·质粒的小量提取 | 第57-58页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第58-59页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第59页 |
| 3 结果 | 第59-77页 |
| ·目的基因的RT-PCR扩增产物 | 第59-60页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第60-62页 |
| ·目的基因的序列测定与分析 | 第62-77页 |
| 4 讨论 | 第77-80页 |
| ·目的基因的选择 | 第78页 |
| ·关于犬瘟热病毒的F基因 | 第78-79页 |
| ·关于犬瘟热病毒的H基因 | 第79-80页 |
| 5 小结 | 第80-82页 |
| 第四章 水貂犬瘟热病毒F基因真核表达载体的构建及表达 | 第82-99页 |
| 1 引言 | 第82页 |
| 2 材料与方法 | 第82-90页 |
| ·材料 | 第82-84页 |
| ·方法 | 第84-90页 |
| ·白细胞介素-8(IL-8)信号肽基因的扩增及克隆 | 第84-86页 |
| ·信号肽真核重组质粒的构建 | 第86页 |
| ·真核重组表达质粒pCDNA3.1-F和PcDNA3.1-SF的构建 | 第86-88页 |
| ·质粒的定量与纯度鉴定 | 第88-89页 |
| ·重组质粒转染BHK-21细胞 | 第89页 |
| ·目的基因在BHK-21细胞中的表达鉴定 | 第89-90页 |
| 3 结果 | 第90-97页 |
| ·信号肽基因的扩增、克隆及鉴定结果 | 第90-91页 |
| ·信号肽真核重组质粒的鉴定 | 第91-92页 |
| ·真核重组表达质粒的鉴定 | 第92-94页 |
| ·重组质粒的含量和纯度 | 第94页 |
| ·目的基因在BHK-21细胞中的表达鉴定 | 第94-97页 |
| 4 讨论 | 第97-98页 |
| ·真核表达载体的选择 | 第97页 |
| ·转染方法的选择 | 第97-98页 |
| ·目的蛋白的表达检测 | 第98页 |
| 5 小结 | 第98-99页 |
| 第五章 水貂犬瘟热病毒分离株F基因对实验动物的免疫研究 | 第99-111页 |
| 1 引言 | 第99页 |
| 2 材料与方法 | 第99-104页 |
| ·材料 | 第99-101页 |
| ·方法 | 第101-104页 |
| ·重组质粒的大量制备与纯化 | 第101页 |
| ·重组表达质粒的定量与纯度鉴定 | 第101页 |
| ·实验动物免疫 | 第101-102页 |
| ·免疫兔血清中特异性抗体的检测 | 第102-103页 |
| ·淋巴细胞转化试验 | 第103-104页 |
| 3 结果 | 第104-106页 |
| ·重组表达质粒的纯度 | 第104页 |
| ·免疫兔抗CDV EILSA抗体检测结果 | 第104-106页 |
| ·淋巴细胞转化试验结果 | 第106页 |
| 4 讨论 | 第106-109页 |
| ·关于核酸疫苗的应用 | 第106-107页 |
| ·影响核酸疫苗免疫效果的因素 | 第107页 |
| ·免疫兔的免疫应答反应 | 第107-109页 |
| 5 小结 | 第109-111页 |
| 结论 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 作者简介 | 第129页 |
