| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-21页 |
| ·蛋白酶抑制剂的类型 | 第10-12页 |
| ·蛋白酶抑制剂的结构与理化性质 | 第12页 |
| ·蛋白酶抑制剂的作用机理 | 第12-13页 |
| ·蛋白酶抑制剂的生物功能 | 第13-14页 |
| ·蛋白酶抑制剂的应用现状 | 第14-16页 |
| ·蛋白酶抑制剂的分子生物学研究进展 | 第16-17页 |
| ·蛋白酶抑制剂的研究现状、存在问题及研究热点 | 第17-18页 |
| ·本研究的内容和意义 | 第18-19页 |
| ·本研究的技术路线 | 第19-21页 |
| 第二章 材料和方法 | 第21-33页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·菌株和克隆载体 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要溶液和培养基 | 第21-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-33页 |
| ·荞麦蛋白酶抑制剂3′端cDNA序列的分离 | 第22-26页 |
| ·PCR产物的回收 | 第26页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第26-28页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第28-30页 |
| ·重组质粒的核苷酸序列测定 | 第30页 |
| ·生物信息学分析 | 第30页 |
| ·BPI-2基因原核表达载体pET-BPI-2的构建 | 第30-33页 |
| 第三章 结果与分析 | 第33-51页 |
| ·总RNA的提取 | 第33页 |
| ·BPI-2基因3′端序列的克隆 | 第33-34页 |
| ·RT-PCR结果 | 第33-34页 |
| ·重组克隆载体pMD18-T-BPI-2的鉴定 | 第34页 |
| ·重组克隆载体pMD-18T-BPI-2的序列测定 | 第34-35页 |
| ·BPI-2基因的生物信息学分析 | 第35-47页 |
| ·BPI-2基因的注册及序列分析 | 第35-39页 |
| ·测序结果的同源性检索分析 | 第39-42页 |
| ·BPI-2蛋白质基本性质分析 | 第42-44页 |
| ·BPI-2蛋白质分子二级结构预测 | 第44-46页 |
| ·BPI-2蛋白质分子保守序列分析 | 第46页 |
| ·荞麦蛋白酶抑制剂cDNA推导氨基酸序列的系统进化分析 | 第46-47页 |
| ·pET-BPI-2原核表达载体的构建 | 第47-51页 |
| ·BPI-2结构基因的扩增 | 第48-49页 |
| ·重组质粒pET-BPI-2的构建 | 第49-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-53页 |
| ·总RNA提取 | 第51页 |
| ·BPI-2基因序列分析及其编码蛋白的结构预测 | 第51页 |
| ·表达载体构建及后续研究 | 第51-53页 |
| 第五章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附录 | 第58-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
