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脐带间质干细胞的功能及转基因抗肿瘤的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
第一章 绪论第14-24页
   ·间质干细胞的来源及其生物学特性第14-18页
     ·间质干细胞第14页
     ·MSC的来源第14-15页
     ·MSC的形态学特征第15页
     ·MSC的生物学特性分析第15-18页
       ·MSC的数量第15-16页
       ·MSC的增殖能力第16页
       ·MSC的细胞表面标志第16-17页
       ·MSC的多向分化潜能第17-18页
   ·MSC的基因治疗第18-24页
     ·基因治疗的原则第19页
     ·目的基因第19页
     ·基因载体第19-20页
     ·基因治疗的靶细胞第20页
     ·MSC的基因治疗第20-21页
     ·MSC的基因治疗的展望第21-24页
       ·MSC的基因治疗的安全性问题第21页
       ·靶细胞生物学特性第21页
       ·治疗基因的问题第21页
       ·基因表达的可调控性第21-22页
       ·外源基因长期稳定表达的问题第22-24页
第二章 本论文研究的目的、方法、实验方案的设计、意义第24-30页
   ·研究目的第24页
   ·研究方法及技术第24-25页
   ·实验方案的设计第25-28页
   ·本研究的意义第28-30页
第三章 脐带间质干细胞的分离纯化及生物学特性研究第30-44页
   ·材料和仪器第30-31页
     ·材料第30-31页
     ·主要仪器第31页
   ·方法第31-33页
     ·人脐带MSC的分离扩增第31-32页
     ·形态学分析第32页
     ·MSC表面标志的检测第32页
     ·MSC生长曲线的测定第32页
     ·MSC周期检测及染色体核型分析第32-33页
     ·MSC诱导分化成骨细胞与脂肪细胞的细胞化学染色第33页
     ·总RNA提取和逆转录第33页
   ·结果第33-40页
     ·人脐带MSC的分离培养和表面标志第33-36页
     ·MSC的生长特性第36页
     ·MSC细胞周期与染色体核型检测第36-38页
     ·MSC向成骨及脂肪细胞的分化第38-40页
     ·MSC特异性基因的表达第40页
   ·讨论第40-44页
第四章 融合基因TNF α-Tumstatin的慢病毒载体构建及基于脐带间质干细胞的基因治疗第44-54页
   ·材料和仪器第44-45页
     ·材料第44-45页
     ·主要仪器第45页
   ·方法第45-48页
     ·细胞培养第45页
     ·融合基因TNF α-Tumstatin的设计及慢病毒载体的构建第45-46页
     ·融合基因的慢病毒包装第46页
     ·慢病毒转化293T和脐带间质干细胞第46页
     ·PCR第46-47页
     ·ELISA检测融合蛋白第47页
     ·~3H-TdR检测293T细胞包装后上清对肿瘤细胞U937的杀伤作用第47-48页
   ·结果第48-51页
     ·融合基因TNF α-Tumstatin的慢病毒载体构建第48-49页
     ·慢病毒的包装第49页
     ·转化的细胞基因组中融合基因的检测第49-50页
     ·ELISA检测融合蛋白第50-51页
     ·293T细胞包装后病毒上清对肿瘤细胞U937的杀伤作用第51页
   ·讨论第51-54页
第五章 结论第54-56页
参考文献第56-64页
致谢第64-66页
攻读硕士学位期间发表的文章及获奖第66-67页

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