摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-14页 |
第一章 绪论 | 第14-24页 |
·间质干细胞的来源及其生物学特性 | 第14-18页 |
·间质干细胞 | 第14页 |
·MSC的来源 | 第14-15页 |
·MSC的形态学特征 | 第15页 |
·MSC的生物学特性分析 | 第15-18页 |
·MSC的数量 | 第15-16页 |
·MSC的增殖能力 | 第16页 |
·MSC的细胞表面标志 | 第16-17页 |
·MSC的多向分化潜能 | 第17-18页 |
·MSC的基因治疗 | 第18-24页 |
·基因治疗的原则 | 第19页 |
·目的基因 | 第19页 |
·基因载体 | 第19-20页 |
·基因治疗的靶细胞 | 第20页 |
·MSC的基因治疗 | 第20-21页 |
·MSC的基因治疗的展望 | 第21-24页 |
·MSC的基因治疗的安全性问题 | 第21页 |
·靶细胞生物学特性 | 第21页 |
·治疗基因的问题 | 第21页 |
·基因表达的可调控性 | 第21-22页 |
·外源基因长期稳定表达的问题 | 第22-24页 |
第二章 本论文研究的目的、方法、实验方案的设计、意义 | 第24-30页 |
·研究目的 | 第24页 |
·研究方法及技术 | 第24-25页 |
·实验方案的设计 | 第25-28页 |
·本研究的意义 | 第28-30页 |
第三章 脐带间质干细胞的分离纯化及生物学特性研究 | 第30-44页 |
·材料和仪器 | 第30-31页 |
·材料 | 第30-31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
·方法 | 第31-33页 |
·人脐带MSC的分离扩增 | 第31-32页 |
·形态学分析 | 第32页 |
·MSC表面标志的检测 | 第32页 |
·MSC生长曲线的测定 | 第32页 |
·MSC周期检测及染色体核型分析 | 第32-33页 |
·MSC诱导分化成骨细胞与脂肪细胞的细胞化学染色 | 第33页 |
·总RNA提取和逆转录 | 第33页 |
·结果 | 第33-40页 |
·人脐带MSC的分离培养和表面标志 | 第33-36页 |
·MSC的生长特性 | 第36页 |
·MSC细胞周期与染色体核型检测 | 第36-38页 |
·MSC向成骨及脂肪细胞的分化 | 第38-40页 |
·MSC特异性基因的表达 | 第40页 |
·讨论 | 第40-44页 |
第四章 融合基因TNF α-Tumstatin的慢病毒载体构建及基于脐带间质干细胞的基因治疗 | 第44-54页 |
·材料和仪器 | 第44-45页 |
·材料 | 第44-45页 |
·主要仪器 | 第45页 |
·方法 | 第45-48页 |
·细胞培养 | 第45页 |
·融合基因TNF α-Tumstatin的设计及慢病毒载体的构建 | 第45-46页 |
·融合基因的慢病毒包装 | 第46页 |
·慢病毒转化293T和脐带间质干细胞 | 第46页 |
·PCR | 第46-47页 |
·ELISA检测融合蛋白 | 第47页 |
·~3H-TdR检测293T细胞包装后上清对肿瘤细胞U937的杀伤作用 | 第47-48页 |
·结果 | 第48-51页 |
·融合基因TNF α-Tumstatin的慢病毒载体构建 | 第48-49页 |
·慢病毒的包装 | 第49页 |
·转化的细胞基因组中融合基因的检测 | 第49-50页 |
·ELISA检测融合蛋白 | 第50-51页 |
·293T细胞包装后病毒上清对肿瘤细胞U937的杀伤作用 | 第51页 |
·讨论 | 第51-54页 |
第五章 结论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
致谢 | 第64-66页 |
攻读硕士学位期间发表的文章及获奖 | 第66-67页 |