英文缩写符号及其中英文对照 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-27页 |
·HSP 的研究进展 | 第13-23页 |
·HSP 的结构特点 | 第14-15页 |
·热激反应的时间 | 第15页 |
·HSP 的功能 | 第15-20页 |
·HSP 具有分子伴侣的作用 | 第15-17页 |
·HSP 与植物的耐热性 | 第17-18页 |
·HSP 与植物的抗冷性 | 第18-19页 |
·HSP 与植物的抗氧化能力 | 第19页 |
·HSP 在植物发育中的作用 | 第19-20页 |
·HSP 基因启动子结构特征 | 第20-21页 |
·HSP 基因的表达调控 | 第21-23页 |
·细胞质sHSP 与植物的耐冷性 | 第23-25页 |
·细胞质sHSP 的分子伴侣功能 | 第25页 |
·本研究目的、意义 | 第25-27页 |
2 材料与方法 | 第27-53页 |
·实验材料 | 第27-28页 |
·植物材料 | 第27页 |
·菌株与质粒 | 第27页 |
·酶及生化试剂 | 第27页 |
·PCR引物 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-53页 |
·RNA提取 | 第28-29页 |
·目的基因全长cDNA 的分离 | 第29-35页 |
·Northern 杂交分析 | 第35-39页 |
·总RNA 的提取 | 第35页 |
·甲醛变性胶电泳 | 第35-36页 |
·转膜 | 第36-37页 |
·预杂交 | 第37页 |
·探针的制备 | 第37-39页 |
·杂交 | 第39页 |
·洗膜 | 第39页 |
·放射自显影 | 第39页 |
·Western 杂交 | 第39-43页 |
·抗体的制备 | 第39-40页 |
·抗血清效价的测定(试管微量沉淀法) | 第40页 |
·Western 杂交 | 第40-43页 |
·细胞质CaHSP18 基因正义表达载体的构建 | 第43-45页 |
·编码区cDNA 添加酶切位点 | 第43页 |
·质粒DNA 的提取 | 第43页 |
·酶切反应 | 第43-44页 |
·去磷酸化 | 第44页 |
·回收 | 第44页 |
·连接 | 第44-45页 |
·转化 | 第45页 |
·重组子的筛选 | 第45页 |
·农杆菌介导转化番茄 | 第45-47页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第45页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第45-46页 |
·利用农杆菌介导转化番茄 | 第46-47页 |
·CTAB 法微量法提取基因组DNA | 第47-49页 |
·转基因植株的 PCR 筛选 | 第48-49页 |
·转基因番茄生理指标的测定 | 第49页 |
·光合放氧量的测定 | 第49页 |
·叶绿素荧光参数测定 | 第49页 |
·小分子量热激蛋白的原核表达 | 第49-53页 |
·原核表达载体的构建 | 第50页 |
·E.coli BL21原核表达的诱导 | 第50页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第50-52页 |
·大肠杆菌细胞活力实验 | 第52-53页 |
3 结果与分析 | 第53-65页 |
·CaHSP18同源性检索及分析 | 第53-55页 |
·CaHSP18基因在甜椒中的表达 | 第55-56页 |
·异源表达CaHSP18基因提高大肠杆菌在高温和低温下的生存能力 | 第56-59页 |
·CaHSP18基因正义片段的筛选 | 第59-65页 |
·CaHSP18基因表达载体的构建 | 第59-60页 |
·CaHSP18基因表达载体的酶切鉴定 | 第60-61页 |
·转基因番茄的PCR验证 | 第61页 |
·转基因番茄的Northern杂交检测 | 第61-62页 |
·转基因番茄的Western杂交检测 | 第62页 |
·过量表达CaHSP18提转基因提高番茄的耐冷性 | 第62-65页 |
4 讨论 | 第65-70页 |
·CaHSP18 基因序列特征 | 第65-66页 |
·CaHSP18的耐热性 | 第66-67页 |
·CaHSP18 与耐冷性 | 第67-68页 |
·热激蛋白与植物的光破坏防御机制 | 第68-70页 |
5 主要结论 | 第70-71页 |
6 参考文献 | 第71-90页 |
附录 | 第90-91页 |
致谢 | 第91页 |