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猪圆环病毒2型陕西株的分离鉴定及其ORF2基因的序列分析

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 猪圆环病毒研究进展第11-31页
   ·病原学第11-18页
     ·猪圆环病毒的发现和命名第11-12页
     ·猪圆环病毒的病毒学分类地位第12-13页
     ·PCV 形态学特性与理化特性第13页
     ·PCV 的细胞培养特性第13-14页
     ·PCV2 的分子生物学特征第14-18页
   ·流行病学第18-20页
     ·猪圆环病毒的全球流行和分布状况第18-19页
     ·PCV 感染的传染源第19页
     ·PCV 感染传播途径第19-20页
     ·PCV 感染的易感动物第20页
   ·PCV2 感染的症状与病理变化第20-25页
     ·症状第20-21页
     ·病理变化第21-25页
   ·猪圆环病毒感染的诊断第25-28页
     ·病毒分离第25-26页
     ·间接免疫荧光试验第26页
     ·聚合酶链反应第26-27页
     ·酶联免疫吸附试验第27页
     ·原位核酸杂交试验第27-28页
   ·猪圆环病毒感染的防制第28-29页
     ·疫苗研究第28-29页
     ·目前的防治措施第29页
   ·本研究的目的意义第29-31页
第二章 猪圆环病毒2 型陕西株的分离与鉴定第31-39页
   ·实验材料第31-32页
     ·主要试验仪器第31-32页
     ·主要试剂和耗材第32页
     ·病料第32页
     ·病毒分离用细胞第32页
   ·试验方法第32-35页
     ·细胞培养用液的配制第32-33页
     ·PCR 检测试剂的配制第33页
     ·病料的采集和处理第33页
     ·病料PCR 检测第33-34页
     ·细胞培养第34页
     ·病毒分离第34页
     ·PCR 检测第34-35页
     ·间接免疫荧光检测第35页
   ·结果第35-37页
     ·样品的采集第35-36页
     ·PCR 检测第36页
     ·病毒分离第36页
     ·PCR 检测第36-37页
     ·间接免疫荧光检测第37页
   ·讨论第37-39页
第三章 PCV2 陕西分离株ORF2 基因的变异分析第39-53页
   ·实验材料第39-40页
     ·毒株第39页
     ·菌种、载体第39页
     ·主要试剂及培养基的配制第39-40页
     ·主要仪器第40页
   ·实验方法第40-45页
     ·引物设计第40-41页
     ·病毒DNA 的提取第41页
     ·PCR 扩增反应第41页
     ·PCR 产物的鉴定第41页
     ·PCR 产物的纯化回收第41页
     ·回收产物与pMD 18-T Vector 连接第41-42页
     ·感受态细胞的制备(CaC12 法)第42页
     ·连接产物的转化第42页
     ·重组质粒的提取第42-44页
     ·重组质粒的PCR 鉴定第44页
     ·重组质粒的酶切鉴定第44页
     ·重组质粒的序列测定第44-45页
     ·分离毒株ORF2 的变异分析第45页
     ·分离毒株Rep 蛋白的特性分析第45页
   ·结果第45-51页
     ·目的基因的扩增第45页
     ·重组质粒的PCR 鉴定结果第45页
     ·重组质粒的酶切鉴定结果第45-46页
     ·分离毒株ORF2 基因的核苷酸序列测定结果第46页
     ·PCV2 不同毒株ORF2 基因的核苷酸序列同源性分析第46页
     ·PCV2 不同毒株ORF2 基因推导的氨基酸序列同源性分析第46-47页
     ·氨基酸序列比对第47-49页
     ·PCV2 ORF2 基因进化分析第49页
     ·PCV2 Rep 蛋白的特性分析(抗原性、亲水性、表面抗原位点预测)第49-51页
   ·讨论第51-53页
结论第53-54页
参考文献第54-63页
附录:重组质粒PMD-T-ORF2 测序报告第63-68页
致谢第68-69页
作者简介第69页

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