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拟南芥菌核病抗性增强突变体的筛选及CIPK23基因的功能分析

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
1.综述第9-22页
   ·菌核病研究进展第9-16页
     ·菌核病的侵染和致病机理第9-11页
     ·植物对菌核病的抗性机理及抗性利用第11-16页
   ·拟南芥的研究进展第16-22页
     ·模式植物拟南芥第16-17页
     ·拟南芥的分子生物学研究策略第17-19页
     ·突变技术与拟南芥基因功能的研究第19-22页
   ·本研究的目的和意义第22页
2.材料与方法第22-33页
   ·实验材料第22-23页
     ·拟南芥品种及病原菌菌种第22页
     ·培养基第22-23页
     ·克隆载体和转化菌株第23页
     ·生化试剂第23页
   ·实验方法第23-33页
     ·拟南芥的种植第23页
     ·突变体的筛选方法第23-24页
       ·草酸喷雾接种法第23页
       ·草酸平板筛选法第23-24页
       ·核盘菌喷雾接种法第24页
       ·核盘菌离体叶片接种法第24页
     ·菌核病抗性增强突变体的筛选第24-30页
       ·拟南芥基因组DNA提取第24-25页
       ·增强子元件的检测第25页
       ·TAIL-PCR方法获得T-DNA插入侧翼序列第25-30页
       ·候选基因的初步定位第30页
     ·菌核病抗性增强突变体CIPK23的分析第30-33页
       ·CIPK23的基因结构与表达特征分析第30页
       ·突变体插入位点验证第30-31页
       ·CIPK23突变体感盐特性分析第31页
       ·RT-PCR验证突变体T-DNA插入上下游基因表达情况第31-32页
       ·CIPK23缺失突变体和T-DNA插入突变体抗菌核病验证第32-33页
3.结果与分析第33-47页
   ·突变体筛选方法的确定第33-37页
     ·草酸喷雾法第33页
     ·草酸平板筛选法第33-36页
       ·不同浓度的草酸对拟南芥种子萌发率的影响第33-34页
       ·不同浓度的草酸对拟南芥根和胚轴的影响第34-35页
       ·不同浓度的草酸对幼苗存活的影响第35-36页
       ·耐草酸突变体对菌核病抗(耐)性第36页
     ·核盘菌喷雾接种对拟南芥的影响第36-37页
     ·离体叶片接种法第37页
   ·菌核病抗性增强突变体的筛选第37-40页
     ·突变体Bar基因和Enhancer的PCR检测第37-38页
     ·T-DNA插入侧翼序列获得第38-40页
   ·菌核病抗性增强突变体的分析第40-47页
     ·CIPK23基因的结构与表达特征第40-42页
     ·T-DNA插入位点的验证第42-43页
     ·CIPK23突变体的感盐特性分析第43-45页
     ·RT-PCR验证基因的表达情况第45页
     ·CIPK23突变体的抗菌核病验证第45-46页
     ·SALK T-DNA插入突变体的抗菌核病验证第46-47页
4.结论与讨论第47-50页
   ·突变体的筛选方法第47页
   ·抗性增强突变体的筛选第47-49页
   ·CIPK23突变体的分析第49-50页
小结第50-51页
参考文献第51-56页
附录一第56-59页
附录二第59-60页
致谢第60页

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