摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
1.综述 | 第9-22页 |
·菌核病研究进展 | 第9-16页 |
·菌核病的侵染和致病机理 | 第9-11页 |
·植物对菌核病的抗性机理及抗性利用 | 第11-16页 |
·拟南芥的研究进展 | 第16-22页 |
·模式植物拟南芥 | 第16-17页 |
·拟南芥的分子生物学研究策略 | 第17-19页 |
·突变技术与拟南芥基因功能的研究 | 第19-22页 |
·本研究的目的和意义 | 第22页 |
2.材料与方法 | 第22-33页 |
·实验材料 | 第22-23页 |
·拟南芥品种及病原菌菌种 | 第22页 |
·培养基 | 第22-23页 |
·克隆载体和转化菌株 | 第23页 |
·生化试剂 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-33页 |
·拟南芥的种植 | 第23页 |
·突变体的筛选方法 | 第23-24页 |
·草酸喷雾接种法 | 第23页 |
·草酸平板筛选法 | 第23-24页 |
·核盘菌喷雾接种法 | 第24页 |
·核盘菌离体叶片接种法 | 第24页 |
·菌核病抗性增强突变体的筛选 | 第24-30页 |
·拟南芥基因组DNA提取 | 第24-25页 |
·增强子元件的检测 | 第25页 |
·TAIL-PCR方法获得T-DNA插入侧翼序列 | 第25-30页 |
·候选基因的初步定位 | 第30页 |
·菌核病抗性增强突变体CIPK23的分析 | 第30-33页 |
·CIPK23的基因结构与表达特征分析 | 第30页 |
·突变体插入位点验证 | 第30-31页 |
·CIPK23突变体感盐特性分析 | 第31页 |
·RT-PCR验证突变体T-DNA插入上下游基因表达情况 | 第31-32页 |
·CIPK23缺失突变体和T-DNA插入突变体抗菌核病验证 | 第32-33页 |
3.结果与分析 | 第33-47页 |
·突变体筛选方法的确定 | 第33-37页 |
·草酸喷雾法 | 第33页 |
·草酸平板筛选法 | 第33-36页 |
·不同浓度的草酸对拟南芥种子萌发率的影响 | 第33-34页 |
·不同浓度的草酸对拟南芥根和胚轴的影响 | 第34-35页 |
·不同浓度的草酸对幼苗存活的影响 | 第35-36页 |
·耐草酸突变体对菌核病抗(耐)性 | 第36页 |
·核盘菌喷雾接种对拟南芥的影响 | 第36-37页 |
·离体叶片接种法 | 第37页 |
·菌核病抗性增强突变体的筛选 | 第37-40页 |
·突变体Bar基因和Enhancer的PCR检测 | 第37-38页 |
·T-DNA插入侧翼序列获得 | 第38-40页 |
·菌核病抗性增强突变体的分析 | 第40-47页 |
·CIPK23基因的结构与表达特征 | 第40-42页 |
·T-DNA插入位点的验证 | 第42-43页 |
·CIPK23突变体的感盐特性分析 | 第43-45页 |
·RT-PCR验证基因的表达情况 | 第45页 |
·CIPK23突变体的抗菌核病验证 | 第45-46页 |
·SALK T-DNA插入突变体的抗菌核病验证 | 第46-47页 |
4.结论与讨论 | 第47-50页 |
·突变体的筛选方法 | 第47页 |
·抗性增强突变体的筛选 | 第47-49页 |
·CIPK23突变体的分析 | 第49-50页 |
小结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
附录一 | 第56-59页 |
附录二 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |