摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
第一章 前言 | 第9-33页 |
·植物病原菌研究概述 | 第9-14页 |
·土壤杆菌属 | 第10-11页 |
·欧文氏菌属 | 第11页 |
·假单胞菌属 | 第11-12页 |
·罗尔斯通氏菌 | 第12页 |
·黄单胞菌属 | 第12-13页 |
·木质部小菌属 | 第13页 |
·泛生菌属 | 第13-14页 |
·棒状杆菌属 | 第14页 |
·植物病原细菌的致病因子和致病基因 | 第14-19页 |
·植物病原细菌的致病因子及编码致病因子的基因 | 第14-19页 |
·胞外多糖 | 第15页 |
·脂多糖 | 第15页 |
·胞外酶 | 第15-16页 |
·植物毒素 | 第16-17页 |
·三型分泌的效应物 | 第17-19页 |
·hrp基因研究进展 | 第19-23页 |
·hrp基因概述 | 第19-23页 |
·hrp致病岛—效应物蛋白运输的遗传学基础 | 第20-22页 |
·hrp基因的表达 | 第22-23页 |
·效应物的相关概念 | 第23-24页 |
·依赖Hrp TTSS系统得效应物的研究进展 | 第24-27页 |
·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种分子遗传学研究概况 | 第27-32页 |
·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种特征及其分类现状 | 第27-28页 |
·黄单胞菌的致病机制及其引起的主要病害 | 第28-29页 |
·野油菜黄单胞菌的研究现状 | 第29-30页 |
·Xcc 800 hrp基因簇及效应物 | 第30-32页 |
·本研究工作的目的、内容及意义 | 第32-33页 |
·目的与内容 | 第32页 |
·意义 | 第32-33页 |
第二章 材料与方法 | 第33-43页 |
·生物信息学部分 | 第33-34页 |
·材料 | 第33页 |
·预测方法 | 第33-34页 |
·分子生物学实验部分 | 第34-43页 |
·材料 | 第34-36页 |
·菌株和质粒 | 第34页 |
·抗生素和其它药剂 | 第34-35页 |
·培养基 | 第35页 |
·溶液与缓冲液 | 第35-36页 |
·试材 | 第36页 |
·方法 | 第36-37页 |
·菌株培养条件及保存 | 第36-37页 |
·三亲本接合 | 第37页 |
·PCR反应 | 第37-38页 |
·引物设计 | 第37页 |
·模板制备 | 第37-38页 |
·反应体系 | 第38页 |
·反应条件: | 第38页 |
·PCR扩增产物检测 | 第38页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第38-39页 |
·总DNA的提取 | 第39页 |
·DNA的纯化和DNA的沉淀 | 第39-40页 |
·限制性内切酶酶切 | 第40页 |
·DNA片段的回收 | 第40页 |
·试剂盒回收 | 第40页 |
·DNA连接 | 第40页 |
·感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
·电脉冲感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
·转化 | 第41页 |
·电脉冲转化 | 第41页 |
·质粒的提取 | 第41-42页 |
·快速碱裂解法少量提取质粒DNA | 第41-42页 |
·过敏性反应 | 第42-43页 |
第三章 结果与分析 | 第43-52页 |
·对Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000已知效应物的分析 | 第43-44页 |
·对Xanthomonas已知效应物的分析 | 第44-45页 |
·对Xanthomonas campestris pv.campestris 8004效应物的分析 | 第45-46页 |
·候选基因的确定 | 第45页 |
·Pro,Ser,Leu含量的确定 | 第45页 |
·Loosely hrp_Ⅱ box的搜索 | 第45页 |
·SignalP3.0 TMHMM2.0的预测结果 | 第45页 |
·43个候选效应物基因的注释信息 | 第45-46页 |
·对预测的候选基因的实验验证 | 第46-52页 |
·TypeⅢ型效应物验证的技术路线 | 第46页 |
·效应物候选基因重组质粒的构建 | 第46-49页 |
·三亲接合子的植株致病性试验 | 第49-50页 |
·XC2995突变体的验证及致病性检测 | 第50-52页 |
第四章 讨论 | 第52-55页 |
·效应物基因的特征 | 第52页 |
·关于Xcc 8004效应物的预测 | 第52-53页 |
·效应物的生物学验证 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-67页 |
附录 | 第67-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
攻读学位期间论文发表情况 | 第79页 |