| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-16页 |
| 前言 | 第16-19页 |
| 第一篇 文献综述 | 第19-67页 |
| 第一章 生长抑素在动物生产中的作用及其免疫调控 | 第19-35页 |
| 1 生长抑素 | 第20-23页 |
| ·生长抑素的生物学特性及其生理作用 | 第20-22页 |
| ·生长抑素的分子结构 | 第20页 |
| ·生长抑素的分布及其生理作用 | 第20-22页 |
| ·生长抑素受体 | 第22页 |
| ·生长抑素体内作用机制 | 第22-23页 |
| 2 生长激素分泌的神经内分泌调节 | 第23-24页 |
| 3 激素免疫调控研究的概述 | 第24-35页 |
| ·生长激素轴的免疫调控 | 第24-25页 |
| ·GRF的免疫调控 | 第25页 |
| ·类胰岛素生长因子作用的调节 | 第25-26页 |
| ·动物生长抑素的调控研究 | 第26-35页 |
| ·生长抑素主动免疫 | 第26-29页 |
| ·生长抑素合成肽疫苗促生长的研究 | 第26-27页 |
| ·生长抑素基因工程苗促生长的研究 | 第27-28页 |
| ·SS痘苗病毒活载体苗的研究 | 第28-29页 |
| ·生长抑素被动免疫 | 第29-35页 |
| 第二章.生长抑素基因免疫技术和分子佐剂研究进展 | 第35-67页 |
| 1 生长抑素基因疫苗的构建 | 第36-39页 |
| ·生长抑素抗原基因的优化和免疫增强基因的选择 | 第36-37页 |
| ·真核表达载体的选择 | 第37-38页 |
| ·生长抑素基因疫苗的表达鉴定 | 第38页 |
| ·生长抑素基因疫苗pES／2SS的构建 | 第38-39页 |
| 2.分子佐剂研究进展 | 第39-45页 |
| ·CpG免疫刺激寡核苷酸序列 | 第39-41页 |
| ·细胞因子 | 第41-43页 |
| ·编码共刺激信号分子的重组质粒 | 第43页 |
| ·阳离子脂质体 | 第43-44页 |
| ·其它佐剂 | 第44-45页 |
| 3 提高生长抑素基因免疫效果的主要途径 | 第45-52页 |
| ·细胞因子或化学因子的协同 | 第45页 |
| ·免疫佐剂 | 第45-47页 |
| ·DNA疫苗接种方法的选择 | 第47-48页 |
| ·改变DNA疫苗的细胞定位 | 第48-49页 |
| ·异源初始-加强免疫 | 第49-50页 |
| ·母源抗体 | 第50页 |
| ·多表位基因疫苗 | 第50-52页 |
| 4 生长抑素基因免疫对动物生长的作用及其机制 | 第52-55页 |
| ·生长抑素基因免疫的作用机制 | 第52-54页 |
| ·生长抑素基因免疫 | 第54-55页 |
| 5 基因免疫可能存在的问题 | 第55-57页 |
| ·DNA疫苗安全性问题 | 第55-56页 |
| ·关于免疫效果相差较大的问题 | 第56页 |
| ·关于启动子的选择问题 | 第56-57页 |
| ·关于蛋白质、内毒素的污染问题 | 第57页 |
| 6 生长抑素基因疫苗免疫的可行性和应用前景 | 第57-58页 |
| ·生长抑素基因疫苗免疫的可行性 | 第57页 |
| ·生长抑素基因疫苗在生产使用上的优势 | 第57-58页 |
| ·基因免疫的优越性 | 第57页 |
| ·湖羊生产面临的问题 | 第57-58页 |
| 7 参考文献 | 第58-67页 |
| 第二篇 实验研究 | 第67-134页 |
| 第三章 生长抑素DNA疫苗质粒和基因佐剂质粒的构建及鉴定 | 第67-84页 |
| 1 材料与方法 | 第68-73页 |
| ·材料 | 第68页 |
| ·质粒、细菌和细胞 | 第68页 |
| ·仪器设备 | 第68页 |
| ·主要试剂与工具酶 | 第68页 |
| ·方法 | 第68-73页 |
| ·质粒小量培养与抽提纯化 | 第68页 |
| ·质粒浓缩 | 第68页 |
| ·胶回收DNA | 第68页 |
| ·融合基因表达产物的结构与理化特性预测 | 第68-69页 |
| ·融合基因表达质粒的构建 | 第69-72页 |
| ·融合基因表达质粒的酶切和测序鉴定 | 第72页 |
| ·融合表达质粒PES／2SS-GMCSF在COS细胞中的表达 | 第72-73页 |
| 2 结果 | 第73-80页 |
| ·生长抑素融合基因S／2SS和S／2SS-GMCSF表达产物的结构与理化特性 | 第73-76页 |
| ·融合表达质粒pES／2SS、pEGS／2SS的鉴定 | 第76-77页 |
| ·构建pES／2SS-GMCSF过程中的酶切、测序鉴定 | 第77-78页 |
| ·构建pE-GMCSF过程中的酶切、测序鉴定 | 第78页 |
| ·构建pE-CpG过程中的酶切、测序鉴定 | 第78页 |
| ·DNA体外转染COS7细胞 | 第78-80页 |
| 3 讨论 | 第80-82页 |
| ·生长抑素融合蛋白的抗原性 | 第80页 |
| ·CpG免疫刺激序列对DNA疫苗的免疫增强作用 | 第80-81页 |
| ·GM-CSF免疫佐剂克服DNA疫苗免疫原性差的作用 | 第81页 |
| ·生长抑素基因疫苗和基因佐剂质粒的构建及表达 | 第81-82页 |
| 4 参考文献 | 第82-84页 |
| 第四章 CpGDNA增强生长抑素DNA疫苗pES／2SS免疫小鼠特异性免疫应答的检测 | 第84-98页 |
| 1 材料与方法 | 第84-88页 |
| ·主要试剂 | 第84-85页 |
| ·仪器 | 第85页 |
| ·质粒及佐剂的制备 | 第85页 |
| ·实验方案 | 第85-86页 |
| ·免疫应答检测 | 第86-88页 |
| ·数据分析 | 第88页 |
| 2 结果与分析 | 第88-93页 |
| ·生长抑素DNA疫苗和基因佐剂提取结果 | 第88-89页 |
| ·免疫诱导的淋巴细胞增殖反应 | 第89页 |
| ·生长抑素质粒(pES／2SS)免疫小鼠对抗体产生的影响 | 第89-92页 |
| ·抗体分型检测 | 第92页 |
| ·脾脏TH1／TH2细胞因子的表达 | 第92-93页 |
| 3 讨论 | 第93-95页 |
| ·生长抑素表达质粒的免疫原性及其免疫作用机制 | 第93-94页 |
| ·CpG序列增强DNA疫苗的免疫效果 | 第94页 |
| ·CpGDNA诱导产生TH_1型免疫佐剂效应 | 第94-95页 |
| ·加强免疫对免疫效果的影响 | 第95页 |
| ·进一步提高生长抑素基因免疫反应性的途径 | 第95页 |
| 4 参考文献 | 第95-98页 |
| 第五章 CpGDNA对生长抑素基因疫苗pES／2SS免疫小鼠生长及GH和IGF-Ⅰ的影响 | 第98-109页 |
| 1 材料与方法 | 第98-99页 |
| ·材料 | 第98页 |
| ·DNA疫苗及CpGDNA制备 | 第98-99页 |
| ·动物免疫接种 | 第99页 |
| ·血样采集及称重 | 第99页 |
| ·激素测定 | 第99页 |
| ·数据分析 | 第99页 |
| 2 结果与分析 | 第99-104页 |
| ·各组小鼠在处理后不同时期的增重 | 第99-101页 |
| ·生长抑素质粒pES／2SS免疫对GH的影响 | 第101-102页 |
| ·生长抑素基因免疫对IGF-1的影响 | 第102-104页 |
| ·生长与抗生长抑素抗体、GH、IGF水平相关分析 | 第104页 |
| 3 讨论 | 第104-106页 |
| ·生长抑素基因免疫对小鼠生长的影响 | 第104-106页 |
| ·生长抑素基因免疫对GH和IGF-1的影响 | 第106页 |
| 4 参考文献 | 第106-109页 |
| 第六章 分子佐剂对生长抑素基因免疫湖羊羔羊的促生长作用及机制研究 | 第109-125页 |
| 1 材料与方法 | 第110-113页 |
| ·材料 | 第110页 |
| ·仪器 | 第110页 |
| ·质粒的大量培养与抽提纯化 | 第110-111页 |
| ·细菌DNA的提取 | 第111页 |
| ·质粒的浓缩与稀释 | 第111-112页 |
| ·实验动物与免疫、采血、称重 | 第112页 |
| ·生长抑素抗体的检测 | 第112-113页 |
| ·激素检测 | 第113页 |
| ·数据分析 | 第113页 |
| 2 结果与分析 | 第113-120页 |
| ·生长抑素DNA疫苗和基因佐剂的制备 | 第113-114页 |
| ·生长抑素质粒免疫湖羊对抗体产生的影响 | 第114-116页 |
| ·各组羔羊增重 | 第116-117页 |
| ·血中GH水平 | 第117-118页 |
| ·生长与抗生长抑素抗体、GH、IGF水平相关分析 | 第118-120页 |
| 3.讨论 | 第120-122页 |
| ·各种佐剂对生长抑素基因免疫湖羊免疫应答的影响 | 第120页 |
| ·各种佐剂对生长抑素基因免疫湖羊生长的影响 | 第120页 |
| ·各种佐剂对生长抑素基因免疫湖羊外周血中GH和IGF-Ⅰ的影响 | 第120-121页 |
| ·免疫程序的制定 | 第121-122页 |
| 4 参考文献 | 第122-125页 |
| 第七章 生长抑素DNA疫苗免疫湖羊羔羊的安全性检测 | 第125-134页 |
| 1 材料与方法 | 第125-128页 |
| ·材料 | 第125-126页 |
| ·方法 | 第126-128页 |
| 2.结果 | 第128-130页 |
| ·DNA抽提、纯化、鉴定结果 | 第128页 |
| ·pES／2SS和pES／2SS-GMCSF质粒(阳性对照)的PCR扩增结果 | 第128-129页 |
| ·试验样品染色体基因组的PCR扩增结果 | 第129-130页 |
| 3.讨论 | 第130-132页 |
| 4 参考文献 | 第132-134页 |
| 全文讨论 | 第134-138页 |
| 全文结论 | 第138-139页 |
| 创新 | 第139-140页 |
| 附录 | 第140-143页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第143-144页 |
| 致谢 | 第144页 |
