| 中文摘要 | 第1-14页 |
| 英文摘要 | 第14-19页 |
| 第一部分 文献综述 | 第19-53页 |
| 一 盐胁迫和植物的耐盐性 | 第19-32页 |
| 1 植物的耐盐策略与研究概况 | 第19-29页 |
| ·植物离子稳态的重建 | 第20-28页 |
| ·植物对离子的吸收及调节 | 第20-25页 |
| ·Na~+ 跨膜内流 | 第20-21页 |
| ·Na~+ 被动扩散 | 第20页 |
| ·非选择性阳离子通道对Na~+ 的转运 | 第20页 |
| ·高亲和K~+ 转运蛋白对Na~+ 的转运 | 第20-21页 |
| ·K~+ 的吸收 | 第21-25页 |
| ·K~+吸收的两种机制 | 第21-22页 |
| ·K~+ 运输的途径 | 第22页 |
| ·K~+ 吸收的调节机制 | 第22-23页 |
| ·Cl~- 的吸收和区隔化 | 第23页 |
| ·Ca~(2+) 的均衡 | 第23-25页 |
| ·植物体内离子稳态的重建——离子区隔化和离子的外排 | 第25-28页 |
| ·Na~+ 的区隔化 | 第25-26页 |
| ·离子外排 | 第26-28页 |
| ·Na~+ 的外排 | 第26-27页 |
| ·SOS 信号通路与离子稳态的调节 | 第27-28页 |
| ·离子长距离运输 | 第28-29页 |
| ·渗透稳态的重建 | 第29页 |
| ·植物对水分的吸收和水分运输的调节 | 第29页 |
| 2 陆生植物对盐胁迫的适应 | 第29-32页 |
| ·泌盐 | 第29-30页 |
| ·稀盐 | 第30-31页 |
| ·拒盐 | 第31-32页 |
| 二 RNA 结合蛋白对植物后转录功能的调控 | 第32-53页 |
| 1 RBP 的结构特点 | 第32-38页 |
| 2 RBP 的功能及分类 | 第38-53页 |
| ·RBP 与mRNA 的可变剪接 | 第38-41页 |
| ·可变剪接与基因表达的调控 | 第38-40页 |
| ·可变剪接与蛋白质组多样性 | 第40页 |
| ·可变剪接的机制 | 第40-41页 |
| ·参与可变剪接的RNA 顺式作用元件 | 第41页 |
| ·参与可变剪接的反式作用因子-RNA 结合蛋白 | 第41页 |
| ·与可变剪接作用相关的RNA 结合蛋白 | 第41-46页 |
| ·SR 蛋白 | 第41-43页 |
| ·hnRNP 蛋白 | 第43-44页 |
| ·snRNP 类蛋白 | 第44页 |
| ·寡聚尿嘧啶特异性RNA 结合蛋白UBP1、RBP45、RBP47、UBA1 和 UBA2 | 第44-45页 |
| ·其它RBP 类剪接因子及剪接因子间的相互作用 | 第45-46页 |
| ·多聚嘧啶序列结合蛋白(PTB) | 第45页 |
| ·30K-RRM proteins | 第45页 |
| ·SR 蛋白和hnRNP A/B 蛋白在剪接位点选择中的拮抗作用 | 第45-46页 |
| ·Poly(A)结合蛋白(PABPs) | 第46-47页 |
| ·富含甘氨酸的RNA 结合蛋白（GR-RBP） | 第47页 |
| ·RNA 结合蛋白与mRNA 的运输 | 第47-48页 |
| ·RNA 结合蛋白与mRNA 的稳定性 | 第48-49页 |
| ·叶绿体RNA 结合蛋白 | 第49-52页 |
| ·叶绿体RNA 结合蛋白与mRNA 的稳定 | 第49-50页 |
| ·叶绿体RNA 结合蛋白与mRNA 的转录调控 | 第50-52页 |
| ·叶绿体中的cpRNP 类RNA 结合蛋白 | 第52页 |
| ·RNA 结合蛋白与ABA 信号转导 | 第52-53页 |
| 第二部分 实验论文 | 第53-120页 |
| 第一章 实验材料及实验方法 | 第54-77页 |
| 1. 实验材料 | 第54-59页 |
| ·植物材料 | 第54页 |
| ·菌种 | 第54页 |
| ·质粒载体 | 第54页 |
| ·酶及化学试剂 | 第54-55页 |
| ·培养基 | 第55页 |
| ·质粒提取液 | 第55页 |
| ·主要仪器设备 | 第55-56页 |
| ·引物序列 | 第56-59页 |
| ·Th-cpRBP29 相关引物及序列 | 第56-57页 |
| ·At-cpRBP 引物序列 | 第57页 |
| ·At-cp RBP-Promoter 克隆引物 | 第57页 |
| ·At-cp RBP 全长序列克隆引物 | 第57页 |
| ·At-cpRBP29 基因沉默片段克隆引物 | 第57页 |
| ·Bar Gene and Gus primer | 第57页 |
| ·编码PSII 亚单位相关基因的 QRT-PCR 引物 | 第57-58页 |
| ·补血草NKCC 克隆兼并引物 | 第58页 |
| ·补血草NKCC 沉默片段克隆引物 | 第58-59页 |
| 2 实验方法 | 第59-76页 |
| ·植物总RNA 的提取 | 第59-61页 |
| ·Trizol 试剂提取植物总RNA | 第59页 |
| ·异硫氰酸胍法提取总RNA | 第59-60页 |
| ·改良CTAB 法提取补血草总RNA | 第60-61页 |
| ·植物基因组DNA 提取 | 第61-62页 |
| ·植物基因组DNA 大量提取法 | 第61页 |
| ·微量法(SDS 法)提取植物基因组 DNA | 第61-62页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第62页 |
| ·质粒的提取 | 第62-63页 |
| ·基因的克隆与载体的构建 | 第63-67页 |
| ·盐芥叶绿体RNA 结合蛋白Th-cpRBP29 的克隆 | 第63-66页 |
| ·快速扩增Th-cpRBP29 cDNA 末端（5' RACE） | 第63-65页 |
| ·编码盐芥叶绿体RNA 结合蛋白基因Th-cpRBP29 全长序列的克隆 | 第65-66页 |
| ·拟南芥RNA 结合蛋白基因At-cpRBP29 启动子及全长序列的克隆 | 第66页 |
| ·拟南芥RNA 结合蛋白基因At-cpRBP29 Promoter 的克隆 | 第66页 |
| ·拟南芥At-cpRBP29 全长cDNA 序列的克隆 | 第66页 |
| ·拟南芥At-cpRBP29 RNAi 序列片段的扩增 | 第66页 |
| ·补血草NKCC 的克隆 | 第66-67页 |
| ·PCR 扩增/酶切产物的回收与pMD18-T 载体的连接 | 第67页 |
| ·植物过量表达载体的构建 | 第67-70页 |
| ·植物过量表达载体pCAMBIA3301::Th-cpRBP 的构建 | 第67页 |
| ·质粒pRT101-Th-RBP 的构建 | 第67页 |
| ·植物过量表达载体pCAMBIA3301::Th-RBP 的构建 | 第67页 |
| ·盐芥Th-cpRBP RNAi 载体pGSA1252::Th-cpRBP 的构建 | 第67-68页 |
| ·构建RNAi 载体的序列 | 第67-68页 |
| ·盐芥Th-cpRBP RNAi 片段的克隆 | 第68页 |
| ·Th-cpRBP29 RNAi 载体pGSA1252::Th-cpRBP29 的构建 | 第68页 |
| ·盐芥GFP::Th-cpRBP29 植物表达载体的构建 | 第68页 |
| ·PPK100-GFP::Th-cpRBP29 融合蛋白表达载的构建 | 第68页 |
| ·pCAMBIA3301:: Th-cpRBP29-GFP 植物表达载体的构建 | 第68页 |
| ·拟南芥Promoter::Gus 载体的构建 | 第68-69页 |
| ·植物过量表达载体pGSA1252::At-cpRBP 及RNAi 载体的构建 | 第69页 |
| ·At-cpRBP29 的克隆 | 第69页 |
| ·植物过量表达载体pGSA1252::At-cpRBP 的构建 | 第69页 |
| ·At-cpRBP RNAi 载体的构建 | 第69页 |
| ·构建At-cpRBP RNAi 载体的核苷酸序列 | 第69页 |
| ·中华补血草NKCC RNAi 载体pGSA1252:: Ls-NKCC 的构建 | 第69-70页 |
| ·构建 RNAi 载体的序列 | 第69页 |
| ·补血草 NKCC RNAi 载体的构建 | 第69-70页 |
| ·植物表达载体的农杆菌转化 | 第70页 |
| ·农杆菌质粒的提取与鉴定 | 第70页 |
| ·菌种的保存 | 第70页 |
| ·转基因植株的 PCR 检测 | 第70页 |
| ·转基因植株的Southern 杂交分析 | 第70-71页 |
| ·Southern 杂交用 DNA 尼龙膜的制备 | 第70-71页 |
| ·cDNA 探针的制备 | 第71页 |
| ·Southern 杂交过程 | 第71页 |
| ·转基因植株的Northern 杂交分析 | 第71-72页 |
| ·RNA 电泳 | 第71-72页 |
| ·RNA 杂交膜的制备 | 第72页 |
| ·Northern 杂交探针的制备 | 第72页 |
| ·杂交过程 | 第72页 |
| ·转化子的遗传分析 | 第72页 |
| ·转基因拟南芥的处理 | 第72-76页 |
| ·对照与转基因拟南芥植株MDA 含量的测定 | 第72页 |
| ·对照与转基因拟南芥植株光合水平的测定 | 第72-73页 |
| ·对照与转基因植株叶绿素含量的测定 | 第73页 |
| ·实时定量PCR 操作及分析 | 第73页 |
| ·蛋白双向电泳 | 第73-76页 |
| ·植物总蛋白的三氯乙酸(TCA)丙酮制干粉提取法 | 第73-74页 |
| ·蛋白质浓度的定量 | 第74页 |
| ·样品水化等电聚焦 | 第74-75页 |
| ·IPG 胶条的平衡 | 第75页 |
| ·第二向垂直SDS-PAGE 电泳 | 第75-76页 |
| ·染色及图像采集 | 第76页 |
| 3 补血草再生及遗传转化系统的建立 | 第76-77页 |
| ·补血草再生体系的建立及优化 | 第76页 |
| ·补血草叶圆盘法遗传转化系统的建立 | 第76-77页 |
| ·活化菌种 | 第76-77页 |
| ·补血草叶片的预培养 | 第77页 |
| ·补血草叶片的转化 | 第77页 |
| ·共培养 | 第77页 |
| ·筛选培养 | 第77页 |
| ·生根培养 | 第77页 |
| ·移苗种植 | 第77页 |
| ·转化植株的分子检测 | 第77页 |
| ·原位杂交 | 第77页 |
| 第二章 结果与分析 | 第77-120页 |
| 1 盐芥Th-cpRBP29 的表达分析 | 第77-79页 |
| ·不同时间低温（4℃）处理对盐芥Th-cpRBP29 表达的影响 | 第77-78页 |
| ·不同时间高温（40℃）处理对盐芥Th-cpRBP29 表达的影响 | 第78页 |
| ·200mM NaCl 处理对对盐芥Th-cpRBP29 表达的影响 | 第78-79页 |
| 2. 盐芥及拟南芥cpRBP29 的克隆、遗传转化和转基因植株的分子检测及遗传分析 | 第79-93页 |
| ·盐芥Th-cpRBP29 全长序列的克隆 | 第79-89页 |
| ·盐芥EST 库已有序列的分析 | 第79-80页 |
| ·盐芥cpRBP29 基因5' RACE 结果 | 第80-81页 |
| ·盐芥cpRBP29 全长序列的扩增 | 第81-82页 |
| ·全长序列及编码的氨基酸列序 | 第82-84页 |
| ·Blast 比对结果 | 第84-85页 |
| ·盐芥Th-cpRBP29 基因与其它植物的Th-cpRBP29 基因的亲缘关系 | 第85-86页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第86-89页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA 3301-Th-cpRBP29 载体的构建 | 第86-87页 |
| ·质粒pRT101-Th-cpRBP29 的构建 | 第86页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA 3301::Th-cpRBP29 的构建 | 第86-87页 |
| ·Th-RBP29 RNAi 基因沉默载体的构建 | 第87-88页 |
| ·Th-RBP 基因沉默载体上下游序列的克隆 | 第87页 |
| ·Th-RBP 基因沉默载体的构建 | 第87-88页 |
| ·Th-RBP29::GFP 载体的构建 | 第88-89页 |
| ·植物表达载体的农杆菌转化和检测 | 第89页 |
| ·转基因拟南芥/盐芥的分子检测 | 第89-92页 |
| ·转基因拟南芥外源基因的检测 | 第89页 |
| ·转基因植株外源Th-cpRBP29 基因表达的Southern 检测 | 第89-90页 |
| ·转基因植株外源Th-cpRBP29 基因表达的Northern 检测 | 第90页 |
| ·转基因盐芥的分子检测 | 第90-92页 |
| ·拟南芥At-cpRBP29 序列、Promoter 的克隆及载体构建 | 第92-93页 |
| ·拟南芥cpRBP29 的克隆及过量表达载体的构建 | 第92页 |
| ·拟南芥cpRBP29 基因RNAi 沉默载体的构建 | 第92-93页 |
| 3 转基因拟南芥的分析 | 第93-105页 |
| ·过量表达Th-cpRBP29 对拟南芥生长的影响 | 第93-94页 |
| ·过量表达Th-cpRBP29 对萌发期转基因拟南芥耐盐性的影响 | 第94页 |
| ·过量表达Th-cpRBP29 对转基因拟南芥抗氧化胁迫的影响 | 第94-95页 |
| ·过量表达Th-cpRBP29 对转基因拟南芥渗透胁迫的影响 | 第95页 |
| ·拟南芥At-cpRBP29 基因沉默对转基因拟南芥的功能影响 | 第95页 |
| ·At-cpRBP29 基因沉默对转基因拟南芥生长的影响 | 第95页 |
| ·At-cpRBP29 基因沉默对萌发期转基因拟南芥植株耐盐性的影响 | 第95页 |
| ·At-cpRBP29 基因沉默对转萌发期基因拟南芥植株抗氧化胁迫的影响 | 第95页 |
| ·不同植物激素处理对cpRBP29 转基因拟南芥种子萌发的影响 | 第95-97页 |
| ·ABA 处理对cpRBP29 转基因拟南芥种子萌发的影响 | 第96页 |
| ·细胞分裂素及生长素处理对cpRBP29 转基因拟南芥种子萌发的影响 | 第96-97页 |
| ·At-cpRBP29 组织特异性表达分析 | 第97-98页 |
| ·Th-cpRBP29 表达产物在细胞中的定位 | 第98-99页 |
| ·转基因和野生型拟南芥中PSII 相关基因的实时定量PCR (QRT-PCR )分析 | 第99-100页 |
| ·野生型及异源过量表达Th-cpRBP29 对转基因拟南芥蛋白表达的影响 | 第100-101页 |
| ·盐胁迫对cpRBP29 过量表达及沉默转基因植株MDA 的影响 | 第101-102页 |
| ·低温对cpRBP29 过量表达及沉默转基因植株叶绿素及胡萝卜素含量的影响 | 第102页 |
| ·盐处理对cpRBP29 过量表达及基因沉默转基因拟南芥叶绿素的含量的影响 | 第102-103页 |
| ·盐处理对cpRBP29 过量表达及基因沉默转基因拟南芥PSⅡ光合效率的影响 | 第103-105页 |
| ·不同盐浓度处理对cpRBP29 过量表达及基因沉默转基因拟南芥F0 光合效率的影响 | 第103-104页 |
| ·不同盐浓度处理对cpRBP29 过量表达及基因沉默转基因拟南芥FV 的影响 | 第104页 |
| ·不同盐浓度处理对cpRBP29 过量表达及基因沉默转基因拟南芥FV/FM 的影响 | 第104-105页 |
| 4 讨论 | 第105-109页 |
| 5 中华补血草NKCC 的克隆、沉默载体的构建及转化 | 第109-120页 |
| ·中华补血草NKCC 的克隆 | 第109-112页 |
| ·中华补血草NKCC 克隆用兼并引物组合 | 第109-112页 |
| ·中华补血草NKCC 基因沉默载体的构建 | 第112页 |
| ·中华补血草NKCC 组织特异性表达的检测—原位杂交 | 第112-113页 |
| ·中华补血草再生及遗传转化体系的建立及优化 | 第113-120页 |
| ·中华补血草再生体系的建立及优化 | 第113-116页 |
| ·中华补血草再生培养基激素配比的优化 | 第114-115页 |
| ·不定芽增殖 | 第115页 |
| ·植物生长素对诱导不定芽生根的影响 | 第115-116页 |
| ·试管苗移栽及管理 | 第116页 |
| ·中华补血草遗传转化体系的建立 | 第116-118页 |
| ·讨论 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-131页 |
| 英文缩写符号及中英对照表 | 第131-133页 |
| 攻读博士学位期间发表和整理的论文 | 第133-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 附录 | 第135页 |
