| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-26页 |
| 1. 植物雌性不育的研究进展 | 第11-14页 |
| ·关于植物雌性不育发生的机制 | 第11-12页 |
| ·关于植物雌性不育基因的研究 | 第12-13页 |
| ·相关植物雌性不育蛋白的研究 | 第13页 |
| ·水稻雌性不育基因的定位研究 | 第13-14页 |
| 2. 基因表达分析研究 | 第14-18页 |
| ·基因表达的概念 | 第14页 |
| ·基因表达的规律 | 第14-15页 |
| ·基因表达的方式 | 第15-16页 |
| ·分析基因表达的常用方法 | 第16-18页 |
| ·RT-PCR | 第16-17页 |
| ·Northern印迹 | 第17页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第17-18页 |
| ·核糖核酸酶保护试验 | 第18页 |
| 3. 蛋白质的亚细胞定位 | 第18-21页 |
| ·蛋白质的亚细胞定位方法 | 第19-21页 |
| ·GFP融合基因定位法 | 第19-20页 |
| ·免疫组织化学定位法 | 第20页 |
| ·生物信息学预测定位 | 第20-21页 |
| 4. 植物基因表达调控的研究 | 第21-25页 |
| ·植物基因表达调控的基本概念 | 第21页 |
| ·植物基因表达调控的时空过程 | 第21-22页 |
| ·植物基因表达调控的生物学意义及对其研究的意义 | 第22页 |
| ·植物基因表达受到各种因素的调节 | 第22-23页 |
| ·植物的发育、生殖及开花相关基因的表达调控研究 | 第23-25页 |
| 5. 本论文研究背景目的及意义 | 第25-26页 |
| 第二部分 实验材料和方法 | 第26-35页 |
| 1. 材料 | 第26-28页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·菌株和载体 | 第26页 |
| ·化学试剂和分子试剂 | 第26页 |
| ·仪器设备 | 第26-27页 |
| ·常用激素与抗生素 | 第27页 |
| ·细菌培养基 | 第27页 |
| ·转化水稻培养基 | 第27页 |
| ·重要溶液 | 第27-28页 |
| 2. 试验方法 | 第28-35页 |
| ·相关载体构建 | 第28页 |
| ·瞬时表达载体的构建 | 第28页 |
| ·稳定表达载体的构建 | 第28页 |
| ·成熟胚愈伤组织的诱导 | 第28页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第28-29页 |
| ·农杆菌的转化 | 第29页 |
| ·转化子的鉴定和保存 | 第29页 |
| ·农杆菌介导发转化水稻 | 第29-30页 |
| ·农杆菌的活化与扩大培养 | 第29页 |
| ·农杆菌侵染愈伤 | 第29-30页 |
| ·愈伤组织脱菌与抗性愈伤的筛选 | 第30页 |
| ·抗性愈伤组织的分化与生根 | 第30页 |
| ·转基因植株的检测 | 第30页 |
| ·水稻材料RNA的提取 | 第30-31页 |
| ·cDNA第一链的合成及检测 | 第31页 |
| ·水稻雌性不育基因PTBl的表达分析 | 第31-32页 |
| ·PTB1基因在水稻的不同部位组织表达分析 | 第31-32页 |
| ·PTB1基因在野生型与互补材料表达分析 | 第32页 |
| ·PTB1基因在过表达转基因植株中的表达分析 | 第32页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第32-33页 |
| ·种子的无菌发芽 | 第32页 |
| ·拟南芥的种植 | 第32页 |
| ·农杆菌的培养 | 第32-33页 |
| ·拟南芥的转化与筛选 | 第33页 |
| ·转化拟南芥的YFP荧光观察 | 第33页 |
| ·基因枪法转化洋葱 | 第33-35页 |
| ·样品的制备 | 第33页 |
| ·基因枪轰击 | 第33-34页 |
| ·YFP观察 | 第34-35页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第35-50页 |
| 1. PTB1基因功能分析 | 第35-40页 |
| ·互补转基因阳性水稻结实率性状分析 | 第35-37页 |
| ·过表达转基因水稻分析 | 第37-39页 |
| ·RNA的提取及CDNA第一链的合成 | 第39页 |
| ·PTB1基因在野生型、突变体以及互补转基因材料中的转录水平 | 第39-40页 |
| 2. PTB1基因的组织表达模式分析 | 第40-42页 |
| ·水稻不同组织中PTB1基因的相对表达量 | 第40-42页 |
| 3. PTB基因的蛋白质定位 | 第42-46页 |
| ·PTB基因蛋白质定位表达载体的构建 | 第42-43页 |
| ·PTB1蛋白细胞定位瞬时表达载体构建 | 第42页 |
| ·PTB1蛋白细胞定位稳定表达载体构建 | 第42-43页 |
| ·PTB1基因在洋葱中的亚细胞定位 | 第43-44页 |
| ·PTB1基因在拟南芥中的亚细胞定位 | 第44-45页 |
| ·用于组织表达和亚细胞定位的水稻稳定转化植株的获得 | 第45-46页 |
| 4. PTB1相关基因分析 | 第46-50页 |
| ·相关基因的获得 | 第46-48页 |
| ·雌性不育相关基因的RT-PCR表达分析 | 第48-50页 |
| 第四部分 讨论与结论 | 第50-55页 |
| ·PTB1基因的功能 | 第50页 |
| ·PTB1基因表达模式 | 第50-51页 |
| ·实时荧光定量在基因表达分析中的应用 | 第51-52页 |
| ·与PTB1相关的基因 | 第52-53页 |
| ·后续实验展望 | 第53-55页 |
| ·PTB1蛋白在水稻内的亚细胞定位 | 第53页 |
| ·PTB1基因的表达模式—GUS分析 | 第53-54页 |
| ·PTB1基因的原核表达及生化功能分析 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录 | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65页 |