中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
1 前言 | 第11-29页 |
·蕨类概述 | 第11-17页 |
·蕨类植物的分类地位与分布 | 第11页 |
·蕨类的分子生物学研究进展 | 第11-12页 |
·蕨类的应用 | 第12-14页 |
·水蕨 | 第14-17页 |
·SOD 概述 | 第17-24页 |
·SOD 的种类与分布 | 第17-18页 |
·SOD 的功能 | 第18-20页 |
·SOD 的应用 | 第20-21页 |
·含铁型超氧化物岐化酶(Fe-SOD) | 第21-24页 |
·植物中SOD 基因工程进展 | 第24-26页 |
·本论文的研究目的和意义 | 第26-29页 |
2. 材料和方法 | 第29-47页 |
·材料 | 第29-32页 |
·本实验采用的蕨类 | 第29页 |
·本实验采用的质粒 | 第29页 |
·本实验采用的菌株 | 第29页 |
·本实验构建的质粒 | 第29-30页 |
·本实验所用试剂及酶 | 第30-31页 |
·本实验所用仪器设备 | 第31-32页 |
·方法 | 第32-47页 |
·水蕨配子体的培养 | 第32页 |
·水蕨总RNA 的提取 | 第32-33页 |
·保守片段cDNA 序列的获得 | 第33-35页 |
·RACE 获得全长cDNA 序列 | 第35-43页 |
·目的基因在大肠杆菌中的表达 | 第43-44页 |
·蛋白定量(Bradford,1976) | 第44页 |
·SDS-PAGE 检测 | 第44-45页 |
·包涵体蛋白的可溶性处理及抗原制备 | 第45-46页 |
·胁迫处理 | 第46页 |
·Western Blotting 检测 | 第46-47页 |
3. 结果与分析 | 第47-61页 |
·水蕨的培养 | 第47页 |
·水蕨总RNA 的提取 | 第47-48页 |
·Fe-SOD 核心片段的获得 | 第48-49页 |
·PCR 扩增Fe-SOD 核心片段 | 第48页 |
·PMD19-T-SOD 载体的构建及同源性分析 | 第48-49页 |
·RACE 获得全长cDNA 序列 | 第49-53页 |
·PCR 扩增Fe-SOD 5’端 | 第50-51页 |
·PMD19-T-FeSOD5’载体的构建及同源性分析 | 第51-52页 |
·PCR 扩增Fe-SOD 3’端 | 第52页 |
·PMD19-T-FeSOD3’载体的构建及同源性分析 | 第52-53页 |
·Fe-SOD 全长cDNA 序列的获得 | 第53页 |
·pET32a-FeSOD 载体的构建 | 第53-54页 |
·生物信息学分析 | 第54-56页 |
·同源性分析 | 第54-56页 |
·pET32a-FeSOD 基因在大肠杆菌中的表达 | 第56页 |
·pET32a-FeSOD 重组蛋白的纯化 | 第56-57页 |
·重组蛋白Pet32a-FeSOD 的验证 | 第57-58页 |
·低温胁迫环境下水蕨中Fe-SOD 的表达 | 第58-59页 |
·不同光强胁迫环境下水蕨中Fe-SOD 的表达 | 第59-61页 |
4. 讨论 | 第61-69页 |
·Fe-SOD 的分布与进化 | 第61-64页 |
·强光胁迫对蕨类植物的影响 | 第64-66页 |
·低温胁迫对蕨类植物的影响 | 第66-69页 |
5. 总结和展望 | 第69-73页 |
参考文献 | 第73-83页 |
致谢 | 第83-85页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第85页 |