| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-23页 |
| 1 油菜和菌核病 | 第9页 |
| 2 植物抗病防御机理 | 第9-13页 |
| 2．1 植物和病原菌 | 第9-10页 |
| 2．2 植物防御反应的信号传导途径 | 第10-13页 |
| 3 植物抗病基因的结构特点及抗病相关基因克隆方法 | 第13-23页 |
| 3．1 植物抗病基因的结构特点 | 第13-16页 |
| 3．2 植物抗病相关基因克隆方法 | 第16-23页 |
| 第二部分 实验部分 | 第23-48页 |
| 1 前言 | 第23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-30页 |
| 2．1 供试材料 | 第23-24页 |
| 2．2 试验方法 | 第24-30页 |
| 2．2．1 总RNA抽提及纯化 | 第24页 |
| 2．2．2 双链cDNA的合成 | 第24页 |
| 2．2．3 cDNA—AFLP分析 | 第24-27页 |
| 2．2．4 克隆转化和转化子检测与保存 | 第27-28页 |
| 2．2．5 Northern杂交 | 第28页 |
| 2．2．6 融合蛋白质诱导表达及SDS—PAGE检测 | 第28页 |
| 2．2．7 克隆片段序列测定 | 第28-29页 |
| 2．2．8 同源片段克隆及序列分析 | 第29-30页 |
| 3 实验结果与分析 | 第30-43页 |
| 3．1 总RNA提取检测及双链cDNA的合成 | 第30页 |
| 3．2 预扩增 | 第30-31页 |
| 3．3 小面积变性PAGE完成cDNA—AFLP分析 | 第31-32页 |
| 3．4 差异片断的回收、克隆及测序 | 第32-33页 |
| 3．4．1 回收程序对假阳性的初步鉴定 | 第32页 |
| 3．4．2 回收片断的克隆 | 第32-33页 |
| 3．4．3 测序与序列分析 | 第33页 |
| 3．5 cDNA—AFLP差异片段40—2序列分析 | 第33-37页 |
| 3．5．1 差异片段40—2的延伸 | 第34页 |
| 3．5．2 半定量PCR(相对定量PCR) | 第34-36页 |
| 3．5．3 Northern杂交 | 第36-37页 |
| 3．6 cDNA—AFLP差异片段18—2序列分析 | 第37-43页 |
| 3．6．1 差异片段18—2延伸 | 第37-39页 |
| 3．6．2 酶切位点分析 | 第39-40页 |
| 3．6．3 Northern杂交 | 第40-41页 |
| 3．6．4 融合蛋白的表达 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-48页 |
| 4．1 近等基因系在抗病研究中的作用 | 第43页 |
| 4．2 菌核病菌诱导的差异片断在抗病反应中的作用探讨 | 第43-45页 |
| 4．3 对半定量PCR技术的一点认识 | 第45-46页 |
| 4．4 小面积PAGE完成cDNA—AFLP分析 | 第46-48页 |
| 第三部分 附录 | 第48-52页 |
| 1 RNA的提取 | 第48页 |
| 2 凝胶回收步骤 | 第48-49页 |
| 4 DNA片段克隆程序 | 第49-50页 |
| 5 含克隆片段质粒的抽提的程序如下 | 第50-51页 |
| 6 随机引物制备放射性标记的 DNA探针 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
