| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩写词表 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-17页 |
| 1．1 基因工程的方法培育雄性不育系 | 第9-11页 |
| 1．1．1 利用花器官特异启动子及细胞毒素基因 | 第9-10页 |
| 1．1．2 利用外源物质代谢的毒害作用 | 第10-11页 |
| 1．1．3 利用反义 RNA途径 | 第11页 |
| 1．2 用基因工程的方法获得恢复系 | 第11-12页 |
| 1．2．1 利用雄性不育基因的抑制基因 | 第11-12页 |
| 1．2．2 利用雄性不育基因的反义基因 | 第12页 |
| 1．3 激素类生长物质的作用及其相关基因的研究现状 | 第12-15页 |
| 1．3．1 生长素基因工程 | 第13-14页 |
| 1．3．2 细胞分裂素基因工程 | 第14页 |
| 1．3．3 Rol基因导入导致雄性不育的基因工程 | 第14-15页 |
| 1．4 利用转mono基因获得的雄性不育来构建“二系法”的主要原理 | 第15-17页 |
| 2 研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 3 材料与方法 | 第18-26页 |
| 3．1 试验材料 | 第18-20页 |
| 3．1．1 棉花材料 | 第18页 |
| 3．1．2 根癌农杆菌和转化载体 | 第18-19页 |
| 3．1．3 部分试剂来源 | 第19页 |
| 3．1．4 培养基 | 第19-20页 |
| 3．1．5 获得的 T0代转化植株编号 | 第20页 |
| 3．2 试验方法 | 第20-25页 |
| 3．2．1 根癌农杆菌介导的棉花遗传转化 | 第20-22页 |
| 3．2．2 转化植株的 PCR检测 | 第22-23页 |
| 3．2．3 转化植株的 Southern杂交检测 | 第23-25页 |
| 3．2．4 转化植株的 GUS检测 | 第25页 |
| 3．2．5 转化植株的花粉育性观察与检测 | 第25页 |
| 3．2．6 转基因植株生育特性的调查 | 第25页 |
| 3．3 数据分析 | 第25-26页 |
| 4 结果与分析 | 第26-44页 |
| 4．1 根癌农杆菌介导的棉花遗传转化 | 第26-29页 |
| 4．1．1 Km浓度对外植体分化的影响 | 第26-27页 |
| 4．1．2 抑菌剂的选择与使用 | 第27-28页 |
| 4．1．3 激素处理对茎尖诱导不定芽的影响 | 第28页 |
| 4．1．4 菌株不同状态对转化的影晌 | 第28页 |
| 4．1．5 再生苗的扩繁 | 第28页 |
| 4．1．6 影响再生苗嫁接成活率的因素 | 第28-29页 |
| 4．2 转化植株的 PCR检测 | 第29-32页 |
| 4．2．1 转基因植株 T0代 PCR检测 | 第29-30页 |
| 4．2．2 转基因植株 T1代 PCR检测 | 第30-32页 |
| 4．3 T0代转基因植株的 Southern检测 | 第32-35页 |
| 4．3．1 植物总 DNA的 KpnI 46hr酶切 | 第32-33页 |
| 4．3．2 Southern杂交结果 | 第33-35页 |
| 4．4 转化植株的 GUS检测 | 第35页 |
| 4．5 转基因植株的育性观察 | 第35-38页 |
| 4．5．1 T0代花粉育性的染色与观察 | 第36-38页 |
| 4．5．2 T1代转基因植株育性观察 | 第38页 |
| 4．6 T0代生育特性观察 | 第38-43页 |
| 4．6．1 T0代发育特性的调查 | 第41-42页 |
| 4．6．2 T0代经济性状的调查 | 第42-43页 |
| 4．7 T1代生育特性观察 | 第43-44页 |
| 5 讨论 | 第44-52页 |
| 5．1 棉花遗传转化方法 | 第44-46页 |
| 5．1．1 外植体的选择 | 第44-45页 |
| 5．1．2 激素对棉花茎尖分化的影响 | 第45页 |
| 5．1．3 抗生素对抗性苗筛选的影响 | 第45-46页 |
| 5．1．4 转基因再生苗的嫁接与扩繁 | 第46页 |
| 5．2 GUS报告基因的表达 | 第46-47页 |
| 5．3 转基因植株的分子生物学检测 | 第47-48页 |
| 5．3．1 转基因植株的 PCR检测 | 第47-48页 |
| 5．3．2 转基因植株的 Southern杂交 | 第48页 |
| 5．4 Mono基因对转基因棉花生育特性的影响 | 第48-49页 |
| 5．5 不同转化结构对转基因植株花粉育性的影响 | 第49-50页 |
| 5．5．1 转基因植物的育性表现 | 第49-50页 |
| 5．5．2 转基因植株不育的温度敏感性 | 第50页 |
| 5．6 还需要进一步的工作 | 第50-51页 |
| 5．7 Mono基因的应用潜力和该课题的研究展望 | 第51-52页 |
| 附录 | 第52-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
