第一章 引言 | 第1-29页 |
1 草坪草研究进展 | 第9-18页 |
·草坪草育种及国内外研究概况 | 第9-10页 |
·草坪草植株再生体系 | 第10-15页 |
·愈伤组织培养 | 第12-13页 |
·悬浮细胞培养 | 第13页 |
·原生质体培养 | 第13-15页 |
·草坪草植株转化体系 | 第15-18页 |
·硅碳纤维介导的直接基因转化 | 第16页 |
·电击融合法和 PEG 介导的 DNA 直接转移导入原生质体 | 第16-17页 |
·基因枪法介导的直接基因转化 | 第17页 |
·农杆菌介导的转化法 | 第17-18页 |
2. 选择标记基因与启动子 | 第18-19页 |
3. 抗渗透胁迫 | 第19-27页 |
·Na~+/H~+反向运转蛋白(Na~+/H~+ ANTIPORTOR PROTEIN) | 第20-23页 |
·质膜Na~+/H~+反向运转蛋白 | 第20-21页 |
·液泡膜Na~+/H~+反向运转蛋白 | 第21-23页 |
·CBF/DREB 转录因子及其在提高植物耐逆性中的作用 | 第23-27页 |
·转录因子的组成和表达 | 第23-24页 |
·CBF/DREB 转录因子在提高植物耐逆中的作用 | 第24-27页 |
4 存在问题与展望 | 第27页 |
5 研究的目的和意义 | 第27-29页 |
第二章 高羊茅组培再生系统的研究与建立 | 第29-34页 |
1 材料和方法 | 第29-30页 |
·材料 | 第29页 |
·方法 | 第29-30页 |
·种子的消毒 | 第29页 |
·下胚轴的获得 | 第29页 |
·愈伤组织的诱导 | 第29页 |
·高羊茅的再生 | 第29-30页 |
·炼苗和移栽 | 第30页 |
·数据处理 | 第30页 |
2 结果与分析 | 第30-32页 |
·种子表面消毒方法的选择 | 第30页 |
·下胚轴的两个品种的不同切法对愈伤组织诱导率的影响 | 第30-31页 |
·不同的2,4-D 浓度对愈伤组织诱导的影响 | 第31-32页 |
3 讨论与结论 | 第32-34页 |
第三章 基因枪轰击法获得转ATNHX1和CBF基因高羊茅植株 | 第34-54页 |
第一节 高羊茅ATNHX1和CBF 4基因的遗传转化 | 第34-46页 |
1 材料 | 第34-35页 |
·受体材料 | 第34页 |
·质粒和菌株 | 第34页 |
·试剂和仪器 | 第34-35页 |
·试剂 | 第34-35页 |
·仪器设备 | 第35页 |
2 方法 | 第35-43页 |
·高羊茅基因转化 | 第35-38页 |
·受体的准备 | 第35页 |
·质粒的提取和纯化 | 第35-37页 |
·基因枪法转化 | 第37-38页 |
·转化体筛选和植株再生 | 第38-39页 |
·再生植株的检测 | 第39-43页 |
·PCR 检测 | 第39-40页 |
·WESTERN-BLOTTING 杂交检测 | 第40-42页 |
·植株草丁膦抗性分析 | 第42-43页 |
3 结果与分析 | 第43-46页 |
·基因枪转化后的抗性筛选及抗性愈伤组织分化苗 | 第43-44页 |
·转基因植株的 PCR 检测 | 第44-45页 |
·WESTERN-BLOTTING 杂交检测 | 第45页 |
·转基因植株草丁膦抗性 | 第45-46页 |
第二节 CBF3 基因表达载体的构建及对高羊茅的遗传转化 | 第46-52页 |
1 材料 | 第46页 |
·受体材料(同前) | 第46页 |
·质粒和菌株 | 第46页 |
·试剂和仪器(同前) | 第46页 |
2 方法 | 第46-49页 |
·质粒表达载体的构建 | 第46-49页 |
·碱裂解法小量提取质粒 | 第46页 |
·酶切 | 第46-47页 |
·回收 | 第47页 |
·连接 | 第47-48页 |
·转化 | 第48-49页 |
·质粒载体的鉴定 | 第49页 |
·高羊茅基因转化方法(同前) | 第49页 |
3. 结果与分析 | 第49-52页 |
·载体的酶切鉴定和 PCR 鉴定 | 第49-50页 |
·PCR 检测 | 第50-51页 |
·WESTERN-BLOTTING 杂交检测 | 第51-52页 |
第三节 讨论与结论 | 第52-54页 |
1 讨论 | 第52-53页 |
2 结论 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-68页 |
作者简介 | 第68页 |