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利用基因枪轰击法将NHX1、CBF耐逆相关基因导入高羊茅(Festuca arundinacea Schreb.)

第一章 引言第1-29页
 1 草坪草研究进展第9-18页
   ·草坪草育种及国内外研究概况第9-10页
   ·草坪草植株再生体系第10-15页
     ·愈伤组织培养第12-13页
     ·悬浮细胞培养第13页
     ·原生质体培养第13-15页
   ·草坪草植株转化体系第15-18页
     ·硅碳纤维介导的直接基因转化第16页
     ·电击融合法和 PEG 介导的 DNA 直接转移导入原生质体第16-17页
     ·基因枪法介导的直接基因转化第17页
     ·农杆菌介导的转化法第17-18页
 2. 选择标记基因与启动子第18-19页
 3. 抗渗透胁迫第19-27页
   ·Na~+/H~+反向运转蛋白(Na~+/H~+ ANTIPORTOR PROTEIN)第20-23页
     ·质膜Na~+/H~+反向运转蛋白第20-21页
     ·液泡膜Na~+/H~+反向运转蛋白第21-23页
   ·CBF/DREB 转录因子及其在提高植物耐逆性中的作用第23-27页
     ·转录因子的组成和表达第23-24页
     ·CBF/DREB 转录因子在提高植物耐逆中的作用第24-27页
 4 存在问题与展望第27页
 5 研究的目的和意义第27-29页
第二章 高羊茅组培再生系统的研究与建立第29-34页
 1 材料和方法第29-30页
   ·材料第29页
   ·方法第29-30页
     ·种子的消毒第29页
     ·下胚轴的获得第29页
     ·愈伤组织的诱导第29页
     ·高羊茅的再生第29-30页
     ·炼苗和移栽第30页
     ·数据处理第30页
 2 结果与分析第30-32页
   ·种子表面消毒方法的选择第30页
   ·下胚轴的两个品种的不同切法对愈伤组织诱导率的影响第30-31页
   ·不同的2,4-D 浓度对愈伤组织诱导的影响第31-32页
 3 讨论与结论第32-34页
第三章 基因枪轰击法获得转ATNHX1和CBF基因高羊茅植株第34-54页
 第一节 高羊茅ATNHX1和CBF 4基因的遗传转化第34-46页
  1 材料第34-35页
   ·受体材料第34页
   ·质粒和菌株第34页
   ·试剂和仪器第34-35页
     ·试剂第34-35页
     ·仪器设备第35页
  2 方法第35-43页
   ·高羊茅基因转化第35-38页
     ·受体的准备第35页
     ·质粒的提取和纯化第35-37页
     ·基因枪法转化第37-38页
   ·转化体筛选和植株再生第38-39页
   ·再生植株的检测第39-43页
     ·PCR 检测第39-40页
     ·WESTERN-BLOTTING 杂交检测第40-42页
     ·植株草丁膦抗性分析第42-43页
  3 结果与分析第43-46页
   ·基因枪转化后的抗性筛选及抗性愈伤组织分化苗第43-44页
   ·转基因植株的 PCR 检测第44-45页
   ·WESTERN-BLOTTING 杂交检测第45页
   ·转基因植株草丁膦抗性第45-46页
 第二节 CBF3 基因表达载体的构建及对高羊茅的遗传转化第46-52页
  1 材料第46页
   ·受体材料(同前)第46页
   ·质粒和菌株第46页
   ·试剂和仪器(同前)第46页
  2 方法第46-49页
   ·质粒表达载体的构建第46-49页
     ·碱裂解法小量提取质粒第46页
     ·酶切第46-47页
     ·回收第47页
     ·连接第47-48页
     ·转化第48-49页
   ·质粒载体的鉴定第49页
   ·高羊茅基因转化方法(同前)第49页
  3. 结果与分析第49-52页
   ·载体的酶切鉴定和 PCR 鉴定第49-50页
   ·PCR 检测第50-51页
   ·WESTERN-BLOTTING 杂交检测第51-52页
 第三节 讨论与结论第52-54页
  1 讨论第52-53页
  2 结论第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-68页
作者简介第68页

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