| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第8-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-21页 |
| ·血吸虫概述 | 第12页 |
| ·胶原蛋白研究进展 | 第12-17页 |
| ·胶原蛋白基因概述 | 第12-14页 |
| ·胶原蛋白概述 | 第14-16页 |
| ·Ⅴ型胶原蛋白概述 | 第16-17页 |
| ·研究技术 | 第17-21页 |
| ·免疫共沉淀技术 | 第17-18页 |
| ·RNAi 技术 | 第18-19页 |
| ·电子显微镜技术 | 第19-21页 |
| 第二章 日本血吸虫抱雌沟蛋白与Ⅴ型胶原蛋白相互作用检测 | 第21-30页 |
| ·引言 | 第21页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·细胞及质粒 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-25页 |
| ·酵母双杂交验证 SjGCP 与 SjColⅤ的相互作用 | 第21-22页 |
| ·Co-IP 检测 SjGCP 与 SjColⅤ的相互作用 | 第22-25页 |
| ·实验结果 | 第25-29页 |
| ·10 种日本血吸虫蛋白与 SjGCP 相互作用验证 | 第25-26页 |
| ·pCMV-Myc-SjColⅤ质粒的构建 | 第26-27页 |
| ·SjColⅤ与 SjGCP 在 HEK 293 T 细胞的表达检测 | 第27-28页 |
| ·SjColⅤ与 SjGCP 的相互检测 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 日本血吸虫Ⅴ型胶原蛋白原核表达研究 | 第30-42页 |
| ·引言 | 第30页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·主要试剂及限制性内切酶 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-35页 |
| ·23d 天血吸虫 cDNA 文库构建 | 第31-32页 |
| ·pET28-SjColⅤ重组质粒的构建 | 第32-33页 |
| ·SjColⅤ的原核表达 | 第33-34页 |
| ·SjColⅤ的 ESI 质谱分析 | 第34页 |
| ·rSjColⅤ的纯化 | 第34页 |
| ·SDS-PAGE 及 Western Blot 分析 | 第34-35页 |
| ·实验结果 | 第35-40页 |
| ·目的基因克隆及表达载体的构建 | 第35页 |
| ·rSjColⅤ诱导表达及表达形式分析 | 第35-36页 |
| ·rSjColⅤESI 质谱分析 | 第36-37页 |
| ·rSjColⅤ原核表达分析 | 第37-38页 |
| ·rSjColⅤ纯化及稳定性分析 | 第38-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 SjColⅤ和 SjGCP 沉默对日本血吸虫的生物学影响 | 第42-56页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·实验动物 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-46页 |
| ·SjcolV 在血吸虫不同发育阶段的转录情况检测 | 第42-43页 |
| ·siRNAs 的体外筛选 | 第43-44页 |
| ·S1 siRNA 小鼠体内 RNAi | 第44-45页 |
| ·SjGCP 和 SjColⅤ小鼠体内 RNAi | 第45-46页 |
| ·实验结果 | 第46-54页 |
| ·SjColⅤ在日本血吸虫不同生长发育阶段的转录水平检测 | 第46页 |
| ·siRNAs 的体外筛选 | 第46-48页 |
| ·S1 siRNA 体内 RNAi 效果检测 | 第48-49页 |
| ·S1 siRNA 干扰后对血吸虫的生物学影响 | 第49页 |
| ·SjColⅤ沉默对日本血吸虫形态学的影响 | 第49-51页 |
| ·SjGCP 和 SjColⅤ沉默对日本血吸虫结构的影响 | 第51-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
