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中国明对虾和文蛤EST分析及细胞黏附蛋白基因的克隆和表达谱

第一章:引言第1-48页
 第一节:生物信息学在海洋生物学研究中的前景与展望第10-25页
  一、生物信息学的产生背景第10-14页
  二、生物信息学的定义和主要研究内容第14-17页
   1、生物信息的收集、存储、管理与提供第15页
   2、基因组序列信息的提取和分析第15-16页
   3、功能基因组相关信息分析第16页
   4、生物大分子结构模拟和药物设计第16页
   5、生物信息分析的技术与方法研究第16页
   6、应用与发展研究第16-17页
  三、国外生物信息学发展趋势与国内发展现状第17-20页
  四、我国开展海洋生物信息学研究的必要性和迫切性第20-22页
  五、构建我国海洋生物信息学分析平台的建议和展望第22-25页
   1、建立我国重要海水养殖生物的核酸和蛋白质数据库第22-23页
   2、开展EST 数据分析和应用研究第23页
   3、借助生物信息学深入进行海洋生物功能基因组学研究第23-24页
   4、开展海洋生物基因组的比较与分子进化和系统发育研究第24-25页
 第二节:虾贝类序列表达标签(ESTs)测定及分析概况第25-37页
  一、对虾EST 测序及分析情况第26-35页
   1、中国明对虾EST 分析概况第27-30页
   2、凡纳滨对虾和白滨对虾第30页
   3、斑节对虾第30-35页
   4、日本囊对虾第35页
  二、贝类ESTs 测序和分析工作第35-37页
   1、牡蛎第35-36页
   2、扇贝第36-37页
 第三节:虾贝类免疫基因研究概况及应用前景第37-46页
  一、对虾养殖业的现状第37-38页
  二、对虾病害发生及控制策略第38-39页
  三、国内外对虾免疫基因研究现状第39-44页
  四、对虾免疫功能基因应用的途径及前景第44-46页
 第四节 细胞黏附蛋白的研究概况第46-47页
 第五节 本论文研究的目的意义第47-48页
第二章 生物信息学分析平台及海洋生物基因组网站的构建第48-59页
 第一节 BLC 生物信息学分析平台的构建第48-57页
  一、BLC 系统安装的软硬件需求第48-50页
   1、硬件需求第48-50页
   2、软件需求第50页
  二、软件安装第50-52页
   1、 Linux 操作系统的安装第50页
   2、 JDK1.4 的安装第50-51页
   3、 BLC2003 SERVER 的安装第51页
   4、生物信息学分析软件的安装第51页
   5、安装PERL第51页
   6、安装GD 库第51-52页
  三、BLC 系统配置与试运行第52-53页
   1、主控服务器的初始化第52页
   2、运行终端的初始化第52页
   3、试运行BLC 系统应用第52页
   4、终端的运行第52-53页
   5、通过网络访问BLC 系统第53页
  四、BLC 系统应用软件介绍第53-57页
   1、 BLAST (Basic Local Alignment Search Tool)第54-55页
   2、 Sim4第55页
   3、 PHRAP第55页
   4、 PHRED第55页
   5、 PROSPECT第55-56页
   6、 INTERPRO第56页
   7、 PFAM第56页
   8、 CROSSMATCH第56-57页
 第二节 中国经济类海洋生物基因组网站第57-59页
  一、系统架构及基本配置第57页
  二、页面内容第57-59页
第三章 文蛤幼虫不同发育时期cDNA 文库的构建第59-68页
 一、实验材料与方法第60-63页
  1、不同发育时期幼虫样品的收集第60页
  2、总RNA 提取第60-61页
  3、mRNA 的分离第61-62页
  4、后续其它步骤第62-63页
 二、结果与分析第63-67页
  1、total RNA 质量鉴定第63-64页
  2、mRNA 分离第64页
  3、一链,二链合成第64-65页
  4、胶回收第65-66页
  5、菌落PCR 鉴定第66-67页
 三、讨论第67-68页
第四章 中国明对虾和文蛤表达序列标签(ESTs)的生物信息学分析第68-103页
 第一节 中国明对虾血液、眼柄和卵巢EST 序列分析与比较第68-77页
  一、实验方法第68-69页
   1、序列处理第68页
   2、序列分析和注释第68-69页
  二、结果与分析第69-74页
   1、序列测定结果第69-70页
   2、序列比对结果第70-71页
   3、已知基因的功能分类第71-74页
  三、讨论第74-77页
   1、 EST 序列和分析第74页
   2、不同组织EST 的比较分析第74-77页
 第二节 中国明对虾血液EST 库中免疫相关基因的发现与分析第77-91页
  一、实验材料与方法第78-79页
   1、数据资源第78页
   2、分析平台及相应软件第78-79页
  二、结果与分析第79-82页
  三、讨论第82-91页
   1、抗菌肽类第83-84页
   2、凝结蛋白类第84-86页
   3、细胞间信号传导类第86页
   4、伴侣蛋白类第86页
   5、酚氧化酶激活系统第86-91页
 第三节 文蛤壳顶期幼虫EST 数据库的分析第91-103页
  一、实验材料与方法第92页
  二、结果与分析第92-95页
   1、序列测定结果第92页
   2、序列比对结果第92-93页
   3、已知基因的功能分类第93-94页
   4、 Pfam 查询结果第94页
   5、 Pathway 结果第94-95页
  三、讨论第95-103页
   1、生长和结构相关基因第96页
   2、代谢酶类第96-97页
   3、免疫相关基因第97页
   4、调控基因第97页
   5、其它基因第97-103页
第五章 中国明对虾细胞黏附蛋白cDNA 全长克隆和体内表达规律第103-133页
 第一节 中国明对虾细胞黏附蛋白cDNA 全长的克隆和序列解析第103-121页
  一、材料与方法第103-110页
   1、实验动物第103-104页
   2、引物序列第104页
   3、培养基和试剂的配制第104-105页
   4、血细胞总RNA 的提取和处理第105页
   5、第一链cDNA 的合成第105-106页
   6、peroxinectin 片段的克隆第106-107页
   7、3’RACE第107-108页
   8、5’RACE第108-109页
   9、序列分析第109-110页
  二、结果与讨论第110-121页
   1、中国明对虾Peroxinectin 基因全长cDNA 的获得第110-114页
   2、 中国明对虾 Peroxinectin 蛋白结构预测第114-117页
   3、细胞黏附蛋白功能域或基序的查找第117-118页
   4、 Peroxinectin 的分子系统进化分析第118-121页
 第二节 细菌刺激后中国明对虾细胞黏附蛋白基因的表达谱第121-133页
  一、材料与方法第121-125页
   1、实验动物第121-122页
   2、组织特异性表达的RT-PCR 法测定第122-123页
   3、病原注射实验第123-124页
   4、实时定量PCR第124-125页
  二、结果与讨论第125-133页
   1、对虾细胞黏附蛋白基因的组织表达特异性第125-126页
   2、灭活细菌刺激不同时间对虾细胞黏附蛋白基因的 mRNA 表达变化规律第126-133页
第六章 结论第133-134页
参考文献第134-147页
攻读博士学位期间发表的主要文章目录第147-148页
致谢第148-150页

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