| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一部分:综述 | 第8-21页 |
| 第一章 荧光假单胞菌和蝎昆虫毒素的植物保护作用 | 第8-21页 |
| 1 荧光假单胞菌抑制植物病害与促进植物生长的机制 | 第8-11页 |
| ·荧光假单胞菌的生物活性物质能抑制植物病原菌 | 第8-10页 |
| ·荧光假单胞菌高密度的分布能控制植物病害 | 第10页 |
| ·荧光假单胞菌的物质转化功能可改善植物营养 | 第10页 |
| ·荧光假单胞菌的分解作用能消除根际土壤的有毒物质 | 第10-11页 |
| ·荧光假单胞菌在植物体内外的定植能诱导系统抗性作用 | 第11页 |
| 2 荧光假单胞菌工程菌的构建与植保作用增强的研究 | 第11-13页 |
| ·荧光假单胞菌作为工程菌的优势 | 第11-12页 |
| ·导入外源基因提高荧光假单胞菌保护植物的能力 | 第12页 |
| ·导入外源基因增加假单胞菌治理环境、清除污染的能力 | 第12-13页 |
| 3 可用于植物保护的蝎毒及其编码基因的重组与表达 | 第13-21页 |
| ·蝎毒的种类 | 第14-15页 |
| ·北非蝎的昆虫毒素 | 第15页 |
| ·蝎昆虫毒素的结构及其编码基因 | 第15-16页 |
| ·蝎毒的作用 | 第16-17页 |
| ·蝎昆虫神经毒素基因的表达与重组 | 第17-21页 |
| 第二部分:研究论文 | 第21-56页 |
| 第二章 荧光假单胞菌的分离及鉴定 | 第21-36页 |
| 前言 | 第21-22页 |
| 材料与方法 | 第22-29页 |
| 1 材料 | 第22-24页 |
| ·仪器与设备 | 第22页 |
| ·菌种和质粒 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·试剂 | 第23-24页 |
| 2 方法 | 第24-27页 |
| ·菌种的采集和筛选 | 第24页 |
| ·形态观察 | 第24-25页 |
| 1)鞭毛染色与显微观察 | 第24-25页 |
| 2)超显微观察 | 第25页 |
| ·生化鉴定 | 第25-27页 |
| 1)革兰氏染色 | 第25页 |
| 2)明胶液化 | 第25-26页 |
| 3)接触酶 | 第26页 |
| 4)柠檬酸盐利用 | 第26页 |
| 5)淀粉水解 | 第26页 |
| 6)反硝化 | 第26页 |
| 7)脂酶 | 第26页 |
| 8)糖发酵 | 第26页 |
| 9)运动性分析 | 第26-27页 |
| ·致病菌拮抗实验 | 第27页 |
| ·分子生物学检测 | 第27-29页 |
| ·基因组DNA 的抽提 | 第27页 |
| ·PCR 扩增 | 第27-28页 |
| ·电泳产物的回收 | 第28页 |
| ·连接反应 | 第28-29页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·转化 | 第29页 |
| ·质粒鉴定 | 第29页 |
| ·测序 | 第29页 |
| 结果与讨论 | 第29-36页 |
| 1 菌种的筛选 | 第29-30页 |
| 2 形态特征的观察 | 第30-31页 |
| 3 生化鉴定 | 第31-33页 |
| 4 致病菌拮抗实验 | 第33-34页 |
| 5 X21022 和X21023 菌株phlD 基因的检测结果 | 第34-36页 |
| 第三章 蝎毒素基因的原核表达 | 第36-56页 |
| 前言 | 第36-37页 |
| 材料与方法 | 第37-43页 |
| 1 材料 | 第37-38页 |
| ·仪器与设备 | 第37页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·培养基成分 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37-38页 |
| 2 方法 | 第38-43页 |
| ·毒蛋白基因AaHIT1 的合成 | 第38-40页 |
| ·毒蛋白基因AaHIT1 的设计 | 第38-39页 |
| ·测序载体pMD18-T/ AaHIT1 的构建 | 第39-40页 |
| ·原核表达系统pET32a/AaHIT1 的构建 | 第40页 |
| ·AaHIT1 的诱导表达 | 第40页 |
| ·诱导产物活性的鉴定 | 第40-41页 |
| ·AaHIT1 在荧光假单胞菌原核表达体系中的表达 | 第41-43页 |
| ·pSUP106/ AaHIT1 的构建 | 第41-43页 |
| ·pSUP106/ AaHIT1 转化荧光假单胞菌X21022 | 第43页 |
| ·带有pSUP106/ AaHIT1 质粒的荧光假单胞菌的表达 | 第43页 |
| 结果与讨论 | 第43-56页 |
| 1 毒蛋白基因AaHIT1 的合成 | 第43-48页 |
| ·毒蛋白基因AaHIT1 的设计 | 第43-47页 |
| ·测序载体的构建及测序结果 | 第47-48页 |
| 2 原核表达载体的构建 | 第48-49页 |
| 3 AaHIT1 的诱导表达 | 第49-50页 |
| 4 表达产物活性的测定——甜菜夜蛾的生物测定 | 第50-51页 |
| 5 AaHIT1 在荧光假单胞菌原核表达体系中的表达 | 第51-56页 |
| ·pSUP106/AaHIT1 的构建 | 第51-53页 |
| ·pSUP106/AaHIT1 转化荧光假单胞菌 X21022 | 第53-54页 |
| ·表达转化有pSUP106/ AaHIT1 质粒的荧光假单胞菌 X21022 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
