| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第9-21页 |
| 1.1 胺氧化酶简介 | 第9-11页 |
| 1.2 环己胺氧化酶研究进展 | 第11-13页 |
| 1.3 蛋白质结构解析简介 | 第13-14页 |
| 1.3.1 X射线晶体衍射法 | 第13页 |
| 1.3.2 核磁共振法 | 第13-14页 |
| 1.3.3 冷冻电镜法 | 第14页 |
| 1.4 蛋白质结晶的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.4.1 蛋白质结晶的流程 | 第15页 |
| 1.4.2 蛋白质结晶的方法 | 第15-16页 |
| 1.4.3 影响结晶的主要因素 | 第16-17页 |
| 1.5 定点突变的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.6 本课题的研究目的和研究意义 | 第19-21页 |
| 第2章 材料与方法 | 第21-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 菌种与质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 主要仪器和设备 | 第21-22页 |
| 2.1.3 实验所用引物 | 第22页 |
| 2.1.4 主要试剂和溶液 | 第22-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-34页 |
| 2.2.1 环己胺氧化酶及其突变体酶活检测方法 | 第24-25页 |
| 2.2.2 CHAO_(YT-02) 蛋白的表达纯化及浓度确定 | 第25-28页 |
| 2.2.3 蛋白质结晶及晶体优化 | 第28页 |
| 2.2.4 晶体衍射和衍射数据的收集与处理 | 第28页 |
| 2.2.5 CHAO_(YT-02) 突变体的构建 | 第28-32页 |
| 2.2.6 CHAO_(YT-02) 突变体的表达纯化及活性测定 | 第32-34页 |
| 第3章 实验结果 | 第34-46页 |
| 3.1 CHAO_(YT-02) 蛋白的纯化及浓度 | 第34-35页 |
| 3.2 CHAO_(YT-02) 蛋白的结晶初筛与优化 | 第35-36页 |
| 3.2.1 CHAO_(YT-02) 蛋白结晶初筛结果 | 第35-36页 |
| 3.2.2 CHAO_(YT-02) 蛋白结晶优化结果 | 第36页 |
| 3.3 CHAO_(YT-02) 蛋白衍射数据收集处理及结构解析 | 第36-38页 |
| 3.4 CHAO_(YT-02) 突变体的构建及异源表达纯化 | 第38-44页 |
| 3.4.1 CHAO_(YT-02) 突变体的构建 | 第38-42页 |
| 3.4.2 CHAO_(YT-02) 突变体的表达纯化及浓度检测 | 第42-44页 |
| 3.5 CHAO_(YT-02) 突变体的活性及底物谱 | 第44-46页 |
| 3.5.1 突变体对环己胺的活性检测 | 第44页 |
| 3.5.2 突变体的底物谱 | 第44-46页 |
| 第4章 总结与展望 | 第46-48页 |
| 4.1 结论 | 第46页 |
| 4.2 讨论及展望 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第56页 |
