茉莉酸甲脂诱导的南方红豆杉(Taxus chinensis var. mairei)差异表达cDNA的研究
| 目录 | 第1-6页 |
| 缩写词及专用名词 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 综述 | 第11-30页 |
| 1 紫杉醇研究背景及现状 | 第11-20页 |
| ·红豆杉及紫杉醇概况 | 第11页 |
| ·紫杉醇作用机理 | 第11-12页 |
| ·紫杉醇研究历史及现状 | 第12-17页 |
| ·紫杉醇分离纯化及检测 | 第17页 |
| ·紫杉醇生物合成途径的研究及关键酶的克隆 | 第17-20页 |
| 2 mRNA差异显示技术及研究进展 | 第20-28页 |
| ·mRNA差异显示技术的应用 | 第20-23页 |
| ·mRNA差异显示技术的改良发展 | 第23-28页 |
| 3 茉莉酸类物质的研究概况及功能 | 第28-30页 |
| 实验材料 | 第30-32页 |
| 1 红豆杉细胞培养及MJ诱导 | 第30页 |
| ·材料和培养方法 | 第30页 |
| ·悬浮系建立及MJ诱导方法 | 第30页 |
| 2 工具酶及主要试剂 | 第30-32页 |
| 实验方法 | 第32-39页 |
| 1 悬浮培养细胞总RNA的提取和鉴定 | 第32页 |
| 2 反转录 | 第32-33页 |
| 3 PCR扩增 | 第33页 |
| 4 电泳程序 | 第33-34页 |
| 5 银染程序 | 第34页 |
| 6 cDNA差异片段的回收及二次扩增 | 第34-35页 |
| 7 Reverse Northern | 第35-36页 |
| 8 cDNA差异片段克隆测序及同源性比较 | 第36-39页 |
| ·cDNA差异片段的纯化 | 第36-37页 |
| ·cDNA差异片段的连接 | 第37页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第37页 |
| ·转化 | 第37-38页 |
| ·挑克隆 | 第38页 |
| ·质粒的快速提取 | 第38页 |
| ·菌液PCR鉴定 | 第38页 |
| ·测序及同源性比较 | 第38-39页 |
| 结果与分析 | 第39-48页 |
| 1 悬浮培养细胞总RNA的检测 | 第39页 |
| 2 mRNA差异显示银染结果 | 第39-41页 |
| 3 cDNA差异片段回收及二次扩增 | 第41页 |
| 4 Reverse Northern结果 | 第41-42页 |
| 5 cDNA差异片段的克隆 | 第42页 |
| 6 重组质粒的鉴定 | 第42-43页 |
| ·质粒的提取 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的菌液PCR鉴定 | 第43页 |
| 7 测序 | 第43-46页 |
| 8 测序结果在GeneBank的查询比对 | 第46-48页 |
| 讨论 | 第48-51页 |
| 1 红豆杉细胞的悬浮培养及茉莉酸甲酯的诱导作用 | 第48-49页 |
| 2 mRNA差异显示技术 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录 | 第62-66页 |
| 个人简历 | 第66页 |