| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一部分 综述 | 第7-16页 |
| 一、 白细胞介素2概述 | 第7-8页 |
| 1 白细胞介素概述 | 第7页 |
| 2 白细胞介素2的理化性质和特点 | 第7页 |
| 3 白细胞介素2与受体作用的机制 | 第7-8页 |
| 4 白细胞介素2的生物学功能 | 第8页 |
| 二、 白细胞介素2研究进展 | 第8-11页 |
| 1 动物白细胞介素2基因克隆和表达研究进展 | 第8-9页 |
| 2 白细胞介素2应用研究进展 | 第9-11页 |
| 3 白细胞介素2应用前景展望 | 第11页 |
| 三、 巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统概述 | 第11-13页 |
| 1 Pichia pastoris的生物学和遗传学特点 | 第11-12页 |
| 2 Pichia pastoris表达体系的特点及优点 | 第12-13页 |
| 3 外源蛋白在Pichia pastoris中的成功表达 | 第13页 |
| 4 Pichia pastoris表达系统的应用前景与展望 | 第13页 |
| 四、 研究目的、方法和结果 | 第13-16页 |
| 1 研究目的 | 第14页 |
| 2 研究方法 | 第14-15页 |
| 3 研究结果 | 第15-16页 |
| 第二部分 BOIL2基因真核表达载体的构建和高抗性重组菌株的筛选及鉴定 | 第16-32页 |
| 前言 | 第16页 |
| 一、 实验材料 | 第16-17页 |
| 二、 实验方法 | 第17-26页 |
| 1 试剂配制 | 第17-19页 |
| 2 牛白介素2基因表达载体pPICZB-BOIL2的构建及鉴定 | 第19-23页 |
| 3 重组质粒电穿孔转化酵母细胞 | 第23-25页 |
| 4 阳性转化子的筛选及鉴定 | 第25-26页 |
| 5 二次转化筛选高抗性菌株 | 第26页 |
| 三、 实验结果 | 第26-29页 |
| 1 牛白介素2基因表达载体的构建及鉴定 | 第26页 |
| 2 重组质粒电穿孔转化酵母细胞及电转参数的确定 | 第26-29页 |
| 3 阳性转化子的筛选及鉴定 | 第29页 |
| 四、 讨论 | 第29-32页 |
| 第三部分 牛白介素2在毕赤酵母中的表达、纯化及生物学活性的检测 | 第32-46页 |
| 前言 | 第32页 |
| 一、 实验材料 | 第32-33页 |
| 二、 实验方法 | 第33-38页 |
| 1 试剂配制 | 第33-35页 |
| 2 重组菌株的诱导表达和表达产物的检测 | 第35-36页 |
| 3 表达蛋白的亲和层析纯化 | 第36-37页 |
| 4 表达蛋白生物活性的检测 | 第37-38页 |
| 三、 实验结果 | 第38-42页 |
| 1 重组菌株的诱导表达和表达产物的检测 | 第38-40页 |
| 2 表达蛋白的亲和层析纯化 | 第40-41页 |
| 3 表达蛋白生物活性的检测 | 第41-42页 |
| 四、 讨论 | 第42-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附录 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
