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人类激酶基因CK1γ1L2和PDIK1L的克隆和功能研究

中文摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
英文缩略词第9-10页
第一章 前言第10-15页
第二章 材料和方法第15-41页
   ·材料与试剂第15-26页
     ·材料第15页
     ·试剂盒,酶类,抗体,常用试剂等第15-19页
     ·菌株、质粒和细胞株第19页
     ·主要仪器设备第19-20页
     ·常用试剂配制第20-23页
     ·计算机软件及数据库第23-24页
     ·引物第24-26页
   ·方法第26-41页
     ·cDNA文库的构建、测序以及生物信息学初步分析第26页
     ·Northern表达谱分析第26-28页
     ·MTC Panel表达谱分析第28页
     ·GST- CK1γ1L2和GST-PDIK1L融合蛋白的原核表达和纯化第28-33页
     ·激酶活性测定第33-34页
     ·真核细胞的培养和转染第34-35页
     ·亚细胞定位第35-36页
     ·酵母双杂交系统筛选与CK1γ1L2和PDIK1L蛋白相作用的蛋白第36-38页
     ·免疫共沉淀第38-39页
     ·用GST-Pull Down方法来检测蛋白相互作用第39-41页
第三章 实验结果第41-89页
   ·人类酪蛋白激酶基因CK1γ1L2的克隆和功能研究第41-63页
     ·CK1γ1L2基因的克隆和生物信息学分析第41-49页
     ·CK1γ1L2基因的表达谱分析第49-56页
     ·CK1γ1L2蛋白的原核表达和纯化第56-59页
     ·CK1γ1L2激酶活性的测定第59-61页
     ·CK1γ1L2基因的亚细胞定位第61-62页
     ·尝试进行CK1γ1L2基因的酵母双杂交第62-63页
   ·人类激酶基因PDIK1L的克隆和功能研究第63-89页
     ·PDIK1L基因的克隆和生物信息学分析第63-72页
     ·PDIK1L基因的SAGE分析第72-77页
     ·PDIK1L基因的MTC Panel表达谱分析第77-79页
     ·PDIK1L蛋白的原核表达和纯化第79-80页
     ·PDIK1L激酶活性的测定第80-82页
     ·PDIK1L基因的亚细胞定位第82-83页
     ·PDIK1L基因的酵母双杂交第83-85页
     ·PDIK1L基因与GRINL1A基因的免疫共沉淀第85-87页
     ·用GST-Pull Down方法来尝试检测PDIK1L与GRINL1A蛋白的相互作用第87-89页
第四章 讨论第89-95页
   ·CK1γ1L2的功能探讨第89-91页
     ·CK1γ1L2的活性检测第89-90页
     ·CK1γ1L2的功能推测第90-91页
   ·PDIK1L的功能探讨第91-95页
     ·PDIK1L的家族归属第91-93页
     ·PDIK1L的功能推测第93-95页
参 考 文 献第95-101页
综述: 酪蛋白激酶的研究进展第101-131页
 一、 蛋白激酶概述第101-102页
 二、 酪蛋白激酶概述第102-104页
 三、 酪蛋白激酶CK1第104-109页
  1 CK1家族成员概述和分类第104-107页
  2 CK1蛋白的结构和功能第107-109页
 四、 酪蛋白激酶CK2第109-115页
  1 CK2激酶的组成和结构第109-113页
  2 CK2激酶的功能和调控第113-115页
 五、 酪蛋白激酶的近几年研究进展第115-131页
  1 CK1的研究进展简述第115-117页
  2 CK2的研究进展简述第117-131页
攻读博士学位期间发表论文第131-133页
致   谢第133-134页

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