| 引 言 | 第1-10页 |
| 文 献 综 述 | 第10-20页 |
| 1 植物基因组学 | 第10-12页 |
| 2 EST技术概述 | 第12-20页 |
| 实 验 正 文 | 第20-42页 |
| 1 试验材料 | 第20页 |
| 2 试验技术路线及方法 | 第20-29页 |
| ·雪莲总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·cDNA文库构建 | 第21-25页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第21-22页 |
| ·cDNA的长距离PCR(LD- PCR) | 第22-23页 |
| ·蛋白酶K消化与酶切 | 第23页 |
| ·cDNA片段的分级分离 | 第23-25页 |
| ·文库质量的鉴定 | 第25-27页 |
| ·未扩增文库滴度测定 | 第25页 |
| ·重组克隆效率的确定 | 第25页 |
| ·文库扩增 | 第25-26页 |
| ·扩增文库滴度测定 | 第26页 |
| ·文库的PCR鉴定 | 第26-27页 |
| ·噬菌体环化成质粒 | 第27页 |
| ·碱裂解提取质粒 | 第27-29页 |
| 3 实验的结果与分析 | 第29-39页 |
| ·总RNA提取结果分析 | 第29页 |
| ·文库质量鉴定 | 第29-31页 |
| ·LD-PCR产物 | 第29-30页 |
| ·未扩增文库滴度测定 | 第30页 |
| ·重组效率的测定 | 第30页 |
| ·扩增文库滴度测定 | 第30-31页 |
| ·文库的PCR鉴定 | 第31页 |
| ·质粒提取结果分析 | 第31页 |
| ·有效EST的获得 | 第31-34页 |
| ·EST序列同源性比较分析和功能已知蛋白的功能分类 | 第34-35页 |
| ·今后研究重点 | 第35-39页 |
| ·金属硫蛋白 | 第35-36页 |
| ·植物防御素 | 第36-38页 |
| ·病原相关蛋白 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-42页 |
| 参考文献: | 第42-46页 |
| 附录1: 试剂 | 第46-47页 |
| 附录2: 主要仪器设备 | 第47-52页 |