| 摘要 | 第1-9页 |
| 英文缩写说明 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-22页 |
| ·原生质体培养部分 | 第10-13页 |
| ·植物原生质体培养研究进展 | 第10-11页 |
| ·猕猴桃原生质体培养研究进展 | 第11-13页 |
| ·转基因部分 | 第13-22页 |
| ·基因转化的方法 | 第13页 |
| ·绿色荧光蛋白基因(GFP)研究进展 | 第13-17页 |
| ·绿色荧光蛋白的生化特性及光谱特征 | 第13-15页 |
| ·GFP基因应用特点及其改进 | 第15-17页 |
| ·GFP在植物研究中的应用 | 第17-20页 |
| ·用做报告基因和细胞标记 | 第17-18页 |
| ·用于植物亚细胞定位 | 第18-19页 |
| ·用于研究植物与微生物的关系 | 第19页 |
| ·用于完整植株的信号传导研究 | 第19-20页 |
| ·转基因植物的生态检测 | 第20页 |
| ·GFP荧光的检测 | 第20-22页 |
| 2 引言 | 第22-23页 |
| 3 试验材料与方法 | 第23-31页 |
| ·试验材料及条件 | 第23-24页 |
| ·试验材料 | 第23-24页 |
| ·试验时间及地点 | 第24页 |
| ·组培室条件 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-25页 |
| ·软枣猕猴桃组织培养体系的建立 | 第24-25页 |
| ·悬浮系的建立 | 第25页 |
| ·原生质体培养 | 第25-28页 |
| ·酶液的组成与配制 | 第25页 |
| ·原生质体培养基 | 第25-26页 |
| ·原生质体的游离 | 第26-28页 |
| ·材料的酶解 | 第26页 |
| ·原生质体的收集与纯化 | 第26-27页 |
| ·原生质体密度及植板率的测定 | 第27页 |
| ·原生质体的培养 | 第27-28页 |
| ·软枣猕猴桃的基因转化 | 第28-31页 |
| ·细菌培养基与试剂 | 第28-29页 |
| ·质粒的提取与遗传转化步骤 | 第29-31页 |
| ·E.coli感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·mGFP5基因的转化与质粒的提取 | 第29-30页 |
| ·mGFP5基因转化原生质体 | 第30页 |
| ·mGFP5基因的荧光显微检测 | 第30-31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-38页 |
| ·原生质体培养 | 第31-36页 |
| ·材料体系的建立 | 第31页 |
| ·不同培养基对猕猴桃组培幼苗生长状况的影响 | 第31-32页 |
| ·培养方法对原生质体培养效果的影响 | 第32-33页 |
| ·不同培养基对原生质体培养的影响 | 第33-34页 |
| ·不同愈伤组织类型对原生质体产量和活力的影响 | 第34-35页 |
| ·不同品系之间原生质体培养状况的差异比较 | 第35-36页 |
| ·转基因部分 | 第36-38页 |
| ·转基因部分pCAMBIA1304质粒的提取 | 第36-37页 |
| ·不同PEG浓度对原生质体及其表达的影响 | 第37页 |
| ·材料状态对GFP转换率的影响 | 第37-38页 |
| 5 结论和讨论 | 第38-43页 |
| ·游离材料的处理和选择 | 第38-39页 |
| ·培养方法对软枣猕猴桃原生质体培养效果的影响 | 第39页 |
| ·影响GFP转化效果的因素 | 第39-43页 |
| ·PEG浓度 | 第39-40页 |
| ·热激处理对瞬间表达的影响 | 第40页 |
| ·材料状态对瞬间表达的影响 | 第40-41页 |
| ·mgfp5的荧光显微检测 | 第41-43页 |
| 图版说明 | 第43-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 英文摘要 | 第53-55页 |
| 附录1: GFP和mGFP5的序列比较 | 第55-56页 |
| 附录2: 双元载体pCAMBIA-1304中mgfp5 -gusA(2-730/731-2569)序列 | 第56页 |