中文摘要 | 第1-12页 |
英文摘要 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-35页 |
1.1 Wg/Wnt信号传导途径的机理与调控 | 第15-19页 |
1.1.1 Wg/Wnt信号传导途径 | 第15-16页 |
1.1.2 Wg是果蝇发育中的一个关键形态发生素 | 第16-17页 |
1.1.3 Wg信号传导途径需要具有功能的硫酸肝素蛋白聚糖 | 第17页 |
1.1.4 小结 | 第17-19页 |
1.2 Hedgehog信号传导机理和调控 | 第19-23页 |
1.2.1 Hedgehog和Hedgehog信号传导 | 第19-20页 |
1.2.2 Hh是一个关键的形态发生素 | 第20页 |
1.2.3 Hh的细胞外调控 | 第20-21页 |
1.2.4 小结 | 第21-23页 |
1.3 硫酸肝素蛋白聚糖的生物合成及其在果蝇发育信号传导中的作用 | 第23-33页 |
1.3.1 硫酸肝素蛋白聚糖的结构,生物合成和修饰 | 第23-24页 |
1.3.2 硫酸肝素蛋白聚糖的生物功能 | 第24-27页 |
1.3.2.1 Wg信号传导需要硫酸肝素蛋白聚糖 | 第24-25页 |
1.3.2.2 FGF信号传导需要硫酸肝素蛋白聚糖 | 第25-26页 |
1.3.2.3 背腹轴形成需要硫酸肝素蛋白聚糖(Toll途径) | 第26页 |
1.3.2.4 Dpp信号传导需要硫酸肝素蛋白聚糖 | 第26-27页 |
1.3.2.5 Hh信号传导需要硫酸肝素蛋白聚糖 | 第27页 |
1.3.3 硫酸肝素蛋白聚糖调控信号传导的机理 | 第27-29页 |
1.3.4 小结和展望 | 第29-33页 |
1.4 论文研究的背景、研究的问题和论文的组织 | 第33-35页 |
第二章 材料与方法 | 第35-40页 |
2.1 材料 | 第35-36页 |
2.1.1 管子与瓶子 | 第35页 |
2.1.2 用于表皮制备的试剂与工具 | 第35页 |
2.1.3 限制性内切酶 | 第35页 |
2.1.4 PCR仪 | 第35页 |
2.1.5 聚合酶 | 第35页 |
2.1.6 DNA提取试剂盒 | 第35页 |
2.1.7 测序试剂与测序仪 | 第35页 |
2.1.8 原位杂交试剂 | 第35页 |
2.1.9 二抗与正常血清 | 第35页 |
2.1.10 果蝇品系 | 第35-36页 |
2.1.11 抗体 | 第36页 |
2.2 一般方法 | 第36-40页 |
2.2.1 果蝇饲料准备 | 第36页 |
2.2.2 果蝇处理 | 第36页 |
2.2.3 翅标本制作 | 第36页 |
2.2.4 生殖系克隆(GLC) | 第36-37页 |
2.2.5 表皮制作 | 第37-38页 |
2.2.6 在翅成虫盘中产生克隆 | 第38页 |
2.2.7 果蝇胚胎抗体染色 | 第38-39页 |
2.2.8 果蝇成虫盘抗体染色 | 第39-40页 |
第三章 一个用来筛选参与Wingless和Hedgehog信号传导途径基因突变体的大规模遗传筛选 | 第40-51页 |
3.1 材料和方法 | 第41-43页 |
3.1.1 果蝇品系 | 第41页 |
3.1.2 EMS (Ethyl MetaneSulfonate, also known as methane sulfonic acid ethyl ester)购自Sigma Aldrich公司(液体)。 | 第41页 |
3.1.3 EMS处理 | 第41页 |
3.1.4 F1遗传筛选的策略 | 第41-43页 |
3.1.5 生殖系克隆(GLC) | 第43页 |
3.1.6 染色体臂确定与突变位点基因作用 | 第43页 |
3.2 结果 | 第43-49页 |
3.2.1 multiple wing hairs (mwh)作为一个内部参照 | 第43-44页 |
3.2.2 从F1遗传筛选中鉴定出来的已知基因突变体 | 第44-45页 |
3.2.3 来自F1遗传筛选的Wg信号传导相关翅表型 | 第45-46页 |
3.2.4 来自F1遗传筛选的Hh信号传导相关翅表型 | 第46页 |
3.2.5 来自F1遗传筛选的突变体呈现与Wg信号传导相关的生殖系克隆胚胎表皮表型(第3条染色体) | 第46-47页 |
3.2.6 来自F1遗传筛选的突变体呈现与Hh信号传导相关的生殖系克隆胚胎表皮表型(第3条染色体) | 第47-48页 |
3.2.7 来自于F1遗传筛选的有意义突变体 | 第48-49页 |
3.3 讨论 | 第49-51页 |
第四章 Wingless信号传导需要Sll | 第51-64页 |
4.1 材料和方法 | 第51-52页 |
4.1.1 生殖系克隆 | 第51页 |
4.1.2 产生用于表型分析的镶嵌体克隆 | 第51-52页 |
4.1.3 细胞外Wg染色步骤 | 第52页 |
4.2 结果 | 第52-62页 |
4.2.1 来自于F1遗传筛选的sll突变体等位基因的翅和表皮形态 | 第52-55页 |
4.2.2 sll基因的克隆 | 第55-58页 |
4.2.3 Sll是一个疏水、多次跨膜的蛋白 | 第58-59页 |
4.2.4 测序鉴定sll突变位点 | 第59页 |
4.2.5 果蝇胚胎发育需要Sll | 第59-60页 |
4.2.6 翅成虫盘细胞外Wg蛋白的分布需要Sll | 第60-62页 |
4.3 讨论 | 第62-64页 |
第五章 果蝇Wingless和Hedgehog信号传导需要oxt | 第64-78页 |
5.1 材料与方法 | 第64-66页 |
5.1.1 生殖系克隆 | 第64页 |
5.1.2 产生用于表型分析的镶嵌体克隆 | 第64-65页 |
5.1.3 眼成虫盘Ci染色 | 第65页 |
5.1.4 GFP标记的Oxt | 第65页 |
5.1.5 序列比对,293T细胞培养,瞬时转染,染色和照相 | 第65-66页 |
5.2 结果 | 第66-76页 |
5.2.1 来自F1遗传筛选的oxt突变体等位基因的翅和表皮表型 | 第66-68页 |
5.2.2 oxt基因的克隆 | 第68-71页 |
5.2.3 Oxt保守结构域与哺乳动物Oxt保守结构域的比较 | 第71页 |
5.2.4 Oxt的细胞定位 | 第71-72页 |
5.2.5 测序检测突变体中oxt基因突变位点 | 第72-73页 |
5.2.6 果蝇胚胎发育需要oxt基因的参与 | 第73-75页 |
5.2.7 眼成虫盘Hh信号传导需要Oxt | 第75-76页 |
5.3 讨论 | 第76-78页 |
第六章 pygo的细胞定位及其果蝇发育过程中的表达 | 第78-85页 |
6.1 材料与方法 | 第79-80页 |
6.1.1 质粒构建 | 第79页 |
6.1.2 序列比对,293T细胞培养,瞬时转染,染色和照相 | 第79页 |
6.1.3 原位杂交 | 第79-80页 |
6.2 结果 | 第80-83页 |
6.2.1 pygo突变体等位基因突变位点检测 | 第80-81页 |
6.2.2 细胞定位 | 第81-83页 |
6.2.3 胚胎原位杂交 | 第83页 |
6.2.4 成虫盘原位杂交 | 第83页 |
6.3 讨论 | 第83-85页 |
第七章 结论与展望 | 第85-89页 |
7.1 结论 | 第85-87页 |
7.1.1 遗传筛选分离信号传导途径所需基因 | 第85-86页 |
7.1.2 Wg信号传导途径需要Sll | 第86页 |
7.1.3 果蝇Wg信号传导和Hh信号传导需要Oxt | 第86-87页 |
7.1.4 Pygo的细胞定位及其在果蝇中发育的表达 | 第87页 |
7.2 展望 | 第87-89页 |
7.2.1 发育中的信号传导 | 第87-88页 |
7.2.2 通过遗传工具增强细胞生物学和信号传导领域的联系 | 第88页 |
7.2.3 功能基因组学对发育生物学的影响 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-96页 |