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果蝇(Drosophila)Wingless和Hedgehog信号传导途径的调控

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-13页
第一章 文献综述第13-35页
 1.1 Wg/Wnt信号传导途径的机理与调控第15-19页
  1.1.1 Wg/Wnt信号传导途径第15-16页
  1.1.2 Wg是果蝇发育中的一个关键形态发生素第16-17页
  1.1.3 Wg信号传导途径需要具有功能的硫酸肝素蛋白聚糖第17页
  1.1.4 小结第17-19页
 1.2 Hedgehog信号传导机理和调控第19-23页
  1.2.1 Hedgehog和Hedgehog信号传导第19-20页
  1.2.2 Hh是一个关键的形态发生素第20页
  1.2.3 Hh的细胞外调控第20-21页
  1.2.4 小结第21-23页
 1.3 硫酸肝素蛋白聚糖的生物合成及其在果蝇发育信号传导中的作用第23-33页
  1.3.1 硫酸肝素蛋白聚糖的结构,生物合成和修饰第23-24页
  1.3.2 硫酸肝素蛋白聚糖的生物功能第24-27页
   1.3.2.1 Wg信号传导需要硫酸肝素蛋白聚糖第24-25页
   1.3.2.2 FGF信号传导需要硫酸肝素蛋白聚糖第25-26页
   1.3.2.3 背腹轴形成需要硫酸肝素蛋白聚糖(Toll途径)第26页
   1.3.2.4 Dpp信号传导需要硫酸肝素蛋白聚糖第26-27页
   1.3.2.5 Hh信号传导需要硫酸肝素蛋白聚糖第27页
  1.3.3 硫酸肝素蛋白聚糖调控信号传导的机理第27-29页
  1.3.4 小结和展望第29-33页
 1.4 论文研究的背景、研究的问题和论文的组织第33-35页
第二章 材料与方法第35-40页
 2.1 材料第35-36页
  2.1.1 管子与瓶子第35页
  2.1.2 用于表皮制备的试剂与工具第35页
  2.1.3 限制性内切酶第35页
  2.1.4 PCR仪第35页
  2.1.5 聚合酶第35页
  2.1.6 DNA提取试剂盒第35页
  2.1.7 测序试剂与测序仪第35页
  2.1.8 原位杂交试剂第35页
  2.1.9 二抗与正常血清第35页
  2.1.10 果蝇品系第35-36页
  2.1.11 抗体第36页
 2.2 一般方法第36-40页
  2.2.1 果蝇饲料准备第36页
  2.2.2 果蝇处理第36页
  2.2.3 翅标本制作第36页
  2.2.4 生殖系克隆(GLC)第36-37页
  2.2.5 表皮制作第37-38页
  2.2.6 在翅成虫盘中产生克隆第38页
  2.2.7 果蝇胚胎抗体染色第38-39页
  2.2.8 果蝇成虫盘抗体染色第39-40页
第三章 一个用来筛选参与Wingless和Hedgehog信号传导途径基因突变体的大规模遗传筛选第40-51页
 3.1 材料和方法第41-43页
  3.1.1 果蝇品系第41页
  3.1.2 EMS (Ethyl MetaneSulfonate, also known as methane sulfonic acid ethyl ester)购自Sigma Aldrich公司(液体)。第41页
  3.1.3 EMS处理第41页
  3.1.4 F1遗传筛选的策略第41-43页
  3.1.5 生殖系克隆(GLC)第43页
  3.1.6 染色体臂确定与突变位点基因作用第43页
 3.2 结果第43-49页
  3.2.1 multiple wing hairs (mwh)作为一个内部参照第43-44页
  3.2.2 从F1遗传筛选中鉴定出来的已知基因突变体第44-45页
  3.2.3 来自F1遗传筛选的Wg信号传导相关翅表型第45-46页
  3.2.4 来自F1遗传筛选的Hh信号传导相关翅表型第46页
  3.2.5 来自F1遗传筛选的突变体呈现与Wg信号传导相关的生殖系克隆胚胎表皮表型(第3条染色体)第46-47页
  3.2.6 来自F1遗传筛选的突变体呈现与Hh信号传导相关的生殖系克隆胚胎表皮表型(第3条染色体)第47-48页
  3.2.7 来自于F1遗传筛选的有意义突变体第48-49页
 3.3 讨论第49-51页
第四章 Wingless信号传导需要Sll第51-64页
 4.1 材料和方法第51-52页
  4.1.1 生殖系克隆第51页
  4.1.2 产生用于表型分析的镶嵌体克隆第51-52页
  4.1.3 细胞外Wg染色步骤第52页
 4.2 结果第52-62页
  4.2.1 来自于F1遗传筛选的sll突变体等位基因的翅和表皮形态第52-55页
  4.2.2 sll基因的克隆第55-58页
  4.2.3 Sll是一个疏水、多次跨膜的蛋白第58-59页
  4.2.4 测序鉴定sll突变位点第59页
  4.2.5 果蝇胚胎发育需要Sll第59-60页
  4.2.6 翅成虫盘细胞外Wg蛋白的分布需要Sll第60-62页
 4.3 讨论第62-64页
第五章 果蝇Wingless和Hedgehog信号传导需要oxt第64-78页
 5.1 材料与方法第64-66页
  5.1.1 生殖系克隆第64页
  5.1.2 产生用于表型分析的镶嵌体克隆第64-65页
  5.1.3 眼成虫盘Ci染色第65页
  5.1.4 GFP标记的Oxt第65页
  5.1.5 序列比对,293T细胞培养,瞬时转染,染色和照相第65-66页
 5.2 结果第66-76页
  5.2.1 来自F1遗传筛选的oxt突变体等位基因的翅和表皮表型第66-68页
  5.2.2 oxt基因的克隆第68-71页
  5.2.3 Oxt保守结构域与哺乳动物Oxt保守结构域的比较第71页
  5.2.4 Oxt的细胞定位第71-72页
  5.2.5 测序检测突变体中oxt基因突变位点第72-73页
  5.2.6 果蝇胚胎发育需要oxt基因的参与第73-75页
  5.2.7 眼成虫盘Hh信号传导需要Oxt第75-76页
 5.3 讨论第76-78页
第六章 pygo的细胞定位及其果蝇发育过程中的表达第78-85页
 6.1 材料与方法第79-80页
  6.1.1 质粒构建第79页
  6.1.2 序列比对,293T细胞培养,瞬时转染,染色和照相第79页
  6.1.3 原位杂交第79-80页
 6.2 结果第80-83页
  6.2.1 pygo突变体等位基因突变位点检测第80-81页
  6.2.2 细胞定位第81-83页
  6.2.3 胚胎原位杂交第83页
  6.2.4 成虫盘原位杂交第83页
 6.3 讨论第83-85页
第七章 结论与展望第85-89页
 7.1 结论第85-87页
  7.1.1 遗传筛选分离信号传导途径所需基因第85-86页
  7.1.2 Wg信号传导途径需要Sll第86页
  7.1.3 果蝇Wg信号传导和Hh信号传导需要Oxt第86-87页
  7.1.4 Pygo的细胞定位及其在果蝇中发育的表达第87页
 7.2 展望第87-89页
  7.2.1 发育中的信号传导第87-88页
  7.2.2 通过遗传工具增强细胞生物学和信号传导领域的联系第88页
  7.2.3 功能基因组学对发育生物学的影响第88-89页
参考文献第89-96页

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