| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-16页 |
| ·植酸酶基因对于提高土壤有机磷利用效率具有重要作用 | 第10-11页 |
| ·农杆菌介导与花粉管通道是实现大豆转基因的关键技术 | 第11-14页 |
| ·农杆菌介导转化技术及其在大豆中的应用 | 第11-12页 |
| ·花粉管通道转化技术及其在大豆中的应用 | 第12-14页 |
| ·转基因安全性已成为近年来植物基因工程的研究热点 | 第14-15页 |
| ·本研究的目的意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-25页 |
| ·试验材料 | 第16-17页 |
| ·供试大豆品种 | 第16页 |
| ·转化载体 | 第16-17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| ·试验方法 | 第17-25页 |
| ·PCR 引物 | 第17-18页 |
| ·农杆菌介导的大豆遗传转化 | 第18-22页 |
| ·花粉管通道法转化质粒DNA | 第22-23页 |
| ·转基因后代根系分泌植酸酶活性检测 | 第23页 |
| ·土壤微生物含量测定-稀释平板法 | 第23-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-39页 |
| ·无选择标记表达载体PX6-PHYA 的转化 | 第25-28页 |
| ·无选择标记表达载体pX6-phyA 转化农杆菌菌株 | 第25-26页 |
| ·无标记载体pX6-phyA 的农杆菌介导子叶节遗传转化 | 第26-27页 |
| ·无标记载体pX6-phyA 的花粉管通道遗传转化 | 第27-28页 |
| ·植酸酶PHYA 有选择标记载体的农杆菌介导遗传转化 | 第28-31页 |
| ·植酸酶phyA 有选择标记载体转化农杆菌菌株 | 第28页 |
| ·农杆菌介导转化pC-KSA 载体的T0 植株PCR 检测 | 第28-29页 |
| ·转基因阳性植株的自交纯合及后代材料PCR 检测 | 第29-31页 |
| ·植酸酶PHYA 的花粉管通道遗传转化 | 第31-35页 |
| ·植酸酶phyA 线性片段的花粉管通道遗传转化 | 第31-34页 |
| ·植酸酶phyA 表达载体pC-KSA 的花粉管通道遗传转化 | 第34-35页 |
| ·转植酸酶PHYA 大豆新材料根系植酸酶活性的测定 | 第35-37页 |
| ·转植酸酶PHYA 大豆新材料根际土壤微生物含量测定 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-42页 |
| ·曲霉中的植酸酶基因目前应用广泛 | 第39-40页 |
| ·转PHYA 新材料为磷高效新品种培育提供了重要资源 | 第40页 |
| ·选择适合的遗传转化方法对于转基因成功至关重要 | 第40-41页 |
| ·转基因生物安全性已成为目前转基因研究热点问题 | 第41-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 附录 试验中所用培养基配方 | 第52-54页 |
