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Dlk1-Dio3印记区域Meg8基因及IG-DMR在体细胞核移植牛中DNA甲基化状态分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 引言第10-21页
   ·印记基因的发现第10页
   ·印记基因的特征及建立、维持和消失第10-11页
   ·印记基因可能的机制第11-13页
     ·DNA 甲基化第11-12页
     ·组蛋白乙酰化第12页
     ·非编码RNA第12-13页
   ·基因组印记的研究意义第13-14页
     ·基因组印记与疾病第13页
     ·基因组印记与动物体细胞核移植第13-14页
   ·主要研究方法第14-18页
     ·PCR-SSCP 技术第14-17页
     ·DNA 甲基化检测方法-亚硫酸盐测序法(bisulfite sequence PCR, BSP)第17-18页
   ·所研究基因的研究现状第18-20页
     ·Dlk1-Dio3 印记区域的研究进展第18-19页
     ·Meg8 印记基因的研究现状第19-20页
     ·IG-DMR 区的研究进展第20页
   ·研究内容及意义第20-21页
2 材料与方法第21-36页
   ·实验材料第21-23页
     ·牛组织材料第21页
     ·生化药品及试剂第21页
     ·培养基的配置第21-22页
     ·其他试剂的配制第22-23页
     ·主要仪器和设备第23页
   ·实验方法第23-36页
     ·PCR-SSCP 检测Meg8 内含子3 处SNP 杂合子第23-26页
     ·杂合子动物基因组DNA 亚硫酸盐处理和PCR 扩增第26-30页
     ·Meg8 基因印记状态分析第30-32页
     ·IG-DMR 印记区域等位甲基化状态分析第32-36页
3 结果与分析第36-48页
   ·Meg8 基因内含子3 处CpG 岛等位基因特异的甲基化分析第36-41页
     ·基因组DNA 的提取和检测结果第36页
     ·PCR-SSCP 寻找Meg8 内含子3 处CpG 岛杂合子第36-38页
     ·自然繁殖牛杂合子中Meg8 基因内含子3 处CpG 岛甲基化状态的分析第38-40页
     ·体细胞核移植牛中Meg8 基因内含子3 甲基化状态第40页
     ·体细胞核移植牛与正常繁殖牛Meg8 基因内含子3 处甲基化水平比较第40-41页
   ·印记状态第41-43页
     ·PCR-SSCP 方法寻找表达序列杂合子第41-42页
     ·RT-PCR 产物直接测序分析Meg8 基因印记状态第42-43页
   ·Dlk1-Dio3 印记域内 IG-DMR 区等位基因特异甲基化状态分析第43-48页
     ·PCR 产物直接测序法寻找IG-DMR 区序列杂合子第43-45页
     ·杂合子牛中IG-DMR 区甲基化状态分析第45-48页
4 讨论第48-50页
   ·体细胞核移植牛中Meg8 基因内含子3 等位基因特异甲基化状态分析及Meg8 基因印记状态分析第48-49页
   ·体细胞核移植牛中IG-DMR 区域等位基因特异甲基化状态分析第49-50页
5 结论第50-51页
   ·牛Meg8 基因内含子3 的甲基化状态分析第50页
   ·体细胞核移植牛Meg8 基因的印记状态分析第50页
   ·体细胞核移植牛IG-DMR 区域CpG 岛1 等位基因甲基化状态分析第50-51页
参考文献第51-57页
在读期间发表学术论文第57-59页
简历第59-60页
致谢第60-61页

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