摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
1 引言 | 第10-21页 |
·印记基因的发现 | 第10页 |
·印记基因的特征及建立、维持和消失 | 第10-11页 |
·印记基因可能的机制 | 第11-13页 |
·DNA 甲基化 | 第11-12页 |
·组蛋白乙酰化 | 第12页 |
·非编码RNA | 第12-13页 |
·基因组印记的研究意义 | 第13-14页 |
·基因组印记与疾病 | 第13页 |
·基因组印记与动物体细胞核移植 | 第13-14页 |
·主要研究方法 | 第14-18页 |
·PCR-SSCP 技术 | 第14-17页 |
·DNA 甲基化检测方法-亚硫酸盐测序法(bisulfite sequence PCR, BSP) | 第17-18页 |
·所研究基因的研究现状 | 第18-20页 |
·Dlk1-Dio3 印记区域的研究进展 | 第18-19页 |
·Meg8 印记基因的研究现状 | 第19-20页 |
·IG-DMR 区的研究进展 | 第20页 |
·研究内容及意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-36页 |
·实验材料 | 第21-23页 |
·牛组织材料 | 第21页 |
·生化药品及试剂 | 第21页 |
·培养基的配置 | 第21-22页 |
·其他试剂的配制 | 第22-23页 |
·主要仪器和设备 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-36页 |
·PCR-SSCP 检测Meg8 内含子3 处SNP 杂合子 | 第23-26页 |
·杂合子动物基因组DNA 亚硫酸盐处理和PCR 扩增 | 第26-30页 |
·Meg8 基因印记状态分析 | 第30-32页 |
·IG-DMR 印记区域等位甲基化状态分析 | 第32-36页 |
3 结果与分析 | 第36-48页 |
·Meg8 基因内含子3 处CpG 岛等位基因特异的甲基化分析 | 第36-41页 |
·基因组DNA 的提取和检测结果 | 第36页 |
·PCR-SSCP 寻找Meg8 内含子3 处CpG 岛杂合子 | 第36-38页 |
·自然繁殖牛杂合子中Meg8 基因内含子3 处CpG 岛甲基化状态的分析 | 第38-40页 |
·体细胞核移植牛中Meg8 基因内含子3 甲基化状态 | 第40页 |
·体细胞核移植牛与正常繁殖牛Meg8 基因内含子3 处甲基化水平比较 | 第40-41页 |
·印记状态 | 第41-43页 |
·PCR-SSCP 方法寻找表达序列杂合子 | 第41-42页 |
·RT-PCR 产物直接测序分析Meg8 基因印记状态 | 第42-43页 |
·Dlk1-Dio3 印记域内 IG-DMR 区等位基因特异甲基化状态分析 | 第43-48页 |
·PCR 产物直接测序法寻找IG-DMR 区序列杂合子 | 第43-45页 |
·杂合子牛中IG-DMR 区甲基化状态分析 | 第45-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
·体细胞核移植牛中Meg8 基因内含子3 等位基因特异甲基化状态分析及Meg8 基因印记状态分析 | 第48-49页 |
·体细胞核移植牛中IG-DMR 区域等位基因特异甲基化状态分析 | 第49-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
·牛Meg8 基因内含子3 的甲基化状态分析 | 第50页 |
·体细胞核移植牛Meg8 基因的印记状态分析 | 第50页 |
·体细胞核移植牛IG-DMR 区域CpG 岛1 等位基因甲基化状态分析 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
在读期间发表学术论文 | 第57-59页 |
简历 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |