缩写词 | 第1-12页 |
中文摘要 | 第12-13页 |
英文摘要 | 第13-15页 |
第一章 引言 | 第15-31页 |
1. 果树基因工程研究进展 | 第15-27页 |
1.1 果树基因工程的研究概况 | 第15-19页 |
1.2 影响果树基因工程研究的因素 | 第19-26页 |
1.3 果树基因工程中存在的问题与解决途径 | 第26-27页 |
2 荔枝体胚发生与植株再生研究 | 第27-30页 |
2.1 荔枝体胚发生研究概况 | 第27-29页 |
2.2 荔枝体胚发生存在的问题 | 第29页 |
2.3 荔枝体胚发生系统作为遗传转化的再生系统仍需要优化 | 第29-30页 |
3 本研究的内容和意义 | 第30-31页 |
3.1 本研究的主要内容 | 第30页 |
3.2 本研究的意义 | 第30-31页 |
第二章 荔枝体胚发生系统的优化与植株再生 | 第31-40页 |
1. 材料与方法 | 第31-32页 |
1.1 材料 | 第31页 |
1.2 方法 | 第31-32页 |
2 结果与分析 | 第32-37页 |
2.1 荔枝EC的继代保持 | 第32-33页 |
2.2 影响体胚发生的因素 | 第33-36页 |
2.3 体胚成熟 | 第36-37页 |
2.4 诱导成苗 | 第37页 |
3 讨论 | 第37-40页 |
3.1 继代培养中的异化现象 | 第37页 |
3.2 荔枝EC体胚发生条件优化 | 第37-38页 |
3.3 荔枝体胚发育阶段性不明显 | 第38页 |
3.4 椰子汁促进荔枝体胚成熟 | 第38-39页 |
3.5 影响成苗的因素 | 第39-40页 |
第三章 荔枝基因转化受体系统的建立 | 第40-51页 |
1. 材料与方法 | 第40-42页 |
1.1 材料 | 第40页 |
1.2 方法 | 第40-42页 |
2.结果与分析 | 第42-48页 |
2.1 荔枝EC生长规律 | 第42-44页 |
2.2 荔枝EC在不同继代培养基上的生长差异 | 第44页 |
2.3 抗生素敏感性试验 | 第44-47页 |
2.4 甘露醇对荔枝EC生长的影响 | 第47-48页 |
2.5 羧苄青霉素对荔枝EC生长的影响 | 第48页 |
3. 讨论 | 第48-51页 |
3.1 荔枝EC转基因受体细胞的选择 | 第48-49页 |
3.2 荔枝遗传转化受体应选择在LMS培养基上继代的EC | 第49页 |
3.3 筛选系统的选择 | 第49-50页 |
3.4 甘露醇对荔枝EC生长有抑制作用 | 第50页 |
3.5 羧苄青霉素不会对荔枝EC产生不良影响 | 第50-51页 |
第四章 荔枝基因枪转化及轰击条件优化 | 第51-63页 |
1 材料与方法 | 第51-57页 |
1.1 材料 | 第51页 |
1.2 方法 | 第51-57页 |
2 结果与分析 | 第57-62页 |
2.1 GUS瞬时表达检测时间的选择 | 第57-58页 |
2.2 氦气压力对GUS瞬时表达的影响 | 第58页 |
2.3 真空度对GUS瞬时表达的影响 | 第58-59页 |
2.4 射程对GUS瞬时表达的影响 | 第59页 |
2.5 甘露醇浓度对GUS瞬时表达的影响 | 第59-60页 |
2.6 高渗处理时间对GUS瞬时表达的影响 | 第60-61页 |
2.7 质粒DNA用量对GUS瞬时表达的影响 | 第61页 |
2.8 金粉用量对GUS瞬时表达的影响 | 第61-62页 |
2.9 轰击次数的影响 | 第62页 |
3 讨论 | 第62-63页 |
第五章 荔枝根癌农杆菌转化初探 | 第63-67页 |
1. 材料与方法 | 第63-64页 |
1.1 材料 | 第63页 |
1.2 方法 | 第63-64页 |
2 结果与分析 | 第64-65页 |
2.1 酚类物质对农杆菌感染荔枝EC的影响 | 第64页 |
2.2 农杆菌悬浊液细菌浓度对农杆菌感染荔枝EC的影响 | 第64-65页 |
2.3 共培养时间对农杆菌感染荔枝EC的影响 | 第65页 |
2.4 基因枪结合农杆菌感染的尝试 | 第65页 |
3 讨论 | 第65-67页 |
3.1 农杆菌对荔枝EC有毒害作用 | 第65-66页 |
3.2 农杆菌感染荔枝EC应寻求其他的处理方法 | 第66-67页 |
第六章 抗性愈伤组织的筛选与保持 | 第67-71页 |
1 材料与方法 | 第67-68页 |
1.1 材料 | 第67页 |
1.2 方法 | 第67-68页 |
2 结果与分析 | 第68-69页 |
2.1 荔枝抗性愈伤组织筛选情况概述 | 第68页 |
2.2 抗性愈伤组织的产生过程与形态差异 | 第68-69页 |
2.3 抗性愈伤组织优化与筛选 | 第69页 |
3 讨论 | 第69-71页 |
3.1 一部分抗性愈伤组织与体胚相伴而生 | 第69页 |
3.2 同一次轰击的荔枝EC可以产生大量的抗性愈伤组织 | 第69-71页 |
第七章 荔枝抗性愈伤组织再生植株的研究 | 第71-74页 |
1 材料和方法 | 第71页 |
1.1 材料 | 第71页 |
1.2 方法 | 第71页 |
2 结果与分析 | 第71-72页 |
2.1 抗性愈伤组织的体胚发生情况比较 | 第71-72页 |
2.2 体胚诱导再生植株的频率 | 第72页 |
2.3 由成熟体胚诱导再生植株的形态描述 | 第72页 |
3 讨论 | 第72-74页 |
3.1 转基因抗性细胞系诱导的体胚萌发率提高 | 第72-73页 |
3.2 白化苗的问题 | 第73-74页 |
第八章 荔枝抗性愈伤组织与再生植株的检测 | 第74-84页 |
1 材料与方法 | 第74-79页 |
1.1 材料 | 第74页 |
1.2 方法 | 第74-79页 |
2 结果与分析 | 第79-82页 |
2.1 荔枝抗性愈伤组织GUS荧光检测 | 第79页 |
2.2 荔枝抗性细胞系GUS组织化学检测 | 第79-81页 |
2.3 荔枝抗性愈伤组织PCR检测 | 第81-82页 |
3 讨论 | 第82-84页 |
3.1 不同抗性细胞系GUS表达活性有差异 | 第82页 |
3.2 抗性细胞系GUS表达的嵌合问题 | 第82页 |
3.3 抗性细胞系再生植株表达或不表达GUS | 第82-83页 |
3.4 荔枝基因组中可能存在GUS同源基因 | 第83页 |
3.5 关于没有对再生植株进行PCR检测和SOUTHERN检测的说明 | 第83-84页 |
第九章 小结 | 第84-88页 |
1 荔枝遗传转化再生系统的优化 | 第84页 |
1.1 荔枝体胚再生系统的优化 | 第84页 |
1.2 荔枝EC基因枪转化受体选择 | 第84页 |
1.3 荔枝EC遗传转化筛选系统的建立 | 第84页 |
2 荔枝EC基因枪转化体系的建立与优化 | 第84-85页 |
3 荔枝抗性愈伤组织的筛选与再生植株 | 第85页 |
4 转基因检测与嵌合问题 | 第85-86页 |
4.1 转基因检测 | 第85-86页 |
4.2 抗性愈伤组织的嵌合表达问题 | 第86页 |
5 荔枝转基因系统建立的应用价值 | 第86-88页 |
5.1 加快荔枝遗传改良步伐 | 第86-87页 |
5.2 提供有用的选择标记 | 第87页 |
5.3 为转基因表达调控研究提供良好材料 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-99页 |
附录一 培养基配方 | 第99-101页 |
附录二 图版及图版说明 | 第101-113页 |
附录三 在学期间发表论文与参加学术活动情况 | 第113-115页 |
致谢 | 第115页 |