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荔枝(Litchi chinensis Sonn.)基因枪转化系统的建立与优化研究

缩写词第1-12页
中文摘要第12-13页
英文摘要第13-15页
第一章 引言第15-31页
 1. 果树基因工程研究进展第15-27页
  1.1 果树基因工程的研究概况第15-19页
  1.2 影响果树基因工程研究的因素第19-26页
  1.3 果树基因工程中存在的问题与解决途径第26-27页
 2 荔枝体胚发生与植株再生研究第27-30页
  2.1 荔枝体胚发生研究概况第27-29页
  2.2 荔枝体胚发生存在的问题第29页
  2.3 荔枝体胚发生系统作为遗传转化的再生系统仍需要优化第29-30页
 3 本研究的内容和意义第30-31页
  3.1 本研究的主要内容第30页
  3.2 本研究的意义第30-31页
第二章 荔枝体胚发生系统的优化与植株再生第31-40页
 1. 材料与方法第31-32页
  1.1 材料第31页
  1.2 方法第31-32页
 2 结果与分析第32-37页
  2.1 荔枝EC的继代保持第32-33页
  2.2 影响体胚发生的因素第33-36页
  2.3 体胚成熟第36-37页
  2.4 诱导成苗第37页
 3 讨论第37-40页
  3.1 继代培养中的异化现象第37页
  3.2 荔枝EC体胚发生条件优化第37-38页
  3.3 荔枝体胚发育阶段性不明显第38页
  3.4 椰子汁促进荔枝体胚成熟第38-39页
  3.5 影响成苗的因素第39-40页
第三章 荔枝基因转化受体系统的建立第40-51页
 1. 材料与方法第40-42页
  1.1 材料第40页
  1.2 方法第40-42页
 2.结果与分析第42-48页
  2.1 荔枝EC生长规律第42-44页
  2.2 荔枝EC在不同继代培养基上的生长差异第44页
  2.3 抗生素敏感性试验第44-47页
  2.4 甘露醇对荔枝EC生长的影响第47-48页
  2.5 羧苄青霉素对荔枝EC生长的影响第48页
 3. 讨论第48-51页
  3.1 荔枝EC转基因受体细胞的选择第48-49页
  3.2 荔枝遗传转化受体应选择在LMS培养基上继代的EC第49页
  3.3 筛选系统的选择第49-50页
  3.4 甘露醇对荔枝EC生长有抑制作用第50页
  3.5 羧苄青霉素不会对荔枝EC产生不良影响第50-51页
第四章 荔枝基因枪转化及轰击条件优化第51-63页
 1 材料与方法第51-57页
  1.1 材料第51页
  1.2 方法第51-57页
 2 结果与分析第57-62页
  2.1 GUS瞬时表达检测时间的选择第57-58页
  2.2 氦气压力对GUS瞬时表达的影响第58页
  2.3 真空度对GUS瞬时表达的影响第58-59页
  2.4 射程对GUS瞬时表达的影响第59页
  2.5 甘露醇浓度对GUS瞬时表达的影响第59-60页
  2.6 高渗处理时间对GUS瞬时表达的影响第60-61页
  2.7 质粒DNA用量对GUS瞬时表达的影响第61页
  2.8 金粉用量对GUS瞬时表达的影响第61-62页
  2.9 轰击次数的影响第62页
 3 讨论第62-63页
第五章 荔枝根癌农杆菌转化初探第63-67页
 1. 材料与方法第63-64页
  1.1 材料第63页
  1.2 方法第63-64页
 2 结果与分析第64-65页
  2.1 酚类物质对农杆菌感染荔枝EC的影响第64页
  2.2 农杆菌悬浊液细菌浓度对农杆菌感染荔枝EC的影响第64-65页
  2.3 共培养时间对农杆菌感染荔枝EC的影响第65页
  2.4 基因枪结合农杆菌感染的尝试第65页
 3 讨论第65-67页
  3.1 农杆菌对荔枝EC有毒害作用第65-66页
  3.2 农杆菌感染荔枝EC应寻求其他的处理方法第66-67页
第六章 抗性愈伤组织的筛选与保持第67-71页
 1 材料与方法第67-68页
  1.1 材料第67页
  1.2 方法第67-68页
 2 结果与分析第68-69页
  2.1 荔枝抗性愈伤组织筛选情况概述第68页
  2.2 抗性愈伤组织的产生过程与形态差异第68-69页
  2.3 抗性愈伤组织优化与筛选第69页
 3 讨论第69-71页
  3.1 一部分抗性愈伤组织与体胚相伴而生第69页
  3.2 同一次轰击的荔枝EC可以产生大量的抗性愈伤组织第69-71页
第七章 荔枝抗性愈伤组织再生植株的研究第71-74页
 1 材料和方法第71页
  1.1 材料第71页
  1.2 方法第71页
 2 结果与分析第71-72页
  2.1 抗性愈伤组织的体胚发生情况比较第71-72页
  2.2 体胚诱导再生植株的频率第72页
  2.3 由成熟体胚诱导再生植株的形态描述第72页
 3 讨论第72-74页
  3.1 转基因抗性细胞系诱导的体胚萌发率提高第72-73页
  3.2 白化苗的问题第73-74页
第八章 荔枝抗性愈伤组织与再生植株的检测第74-84页
 1 材料与方法第74-79页
  1.1 材料第74页
  1.2 方法第74-79页
 2 结果与分析第79-82页
  2.1 荔枝抗性愈伤组织GUS荧光检测第79页
  2.2 荔枝抗性细胞系GUS组织化学检测第79-81页
  2.3 荔枝抗性愈伤组织PCR检测第81-82页
 3 讨论第82-84页
  3.1 不同抗性细胞系GUS表达活性有差异第82页
  3.2 抗性细胞系GUS表达的嵌合问题第82页
  3.3 抗性细胞系再生植株表达或不表达GUS第82-83页
  3.4 荔枝基因组中可能存在GUS同源基因第83页
  3.5 关于没有对再生植株进行PCR检测和SOUTHERN检测的说明第83-84页
第九章 小结第84-88页
 1 荔枝遗传转化再生系统的优化第84页
  1.1 荔枝体胚再生系统的优化第84页
  1.2 荔枝EC基因枪转化受体选择第84页
  1.3 荔枝EC遗传转化筛选系统的建立第84页
 2 荔枝EC基因枪转化体系的建立与优化第84-85页
 3 荔枝抗性愈伤组织的筛选与再生植株第85页
 4 转基因检测与嵌合问题第85-86页
  4.1 转基因检测第85-86页
  4.2 抗性愈伤组织的嵌合表达问题第86页
 5 荔枝转基因系统建立的应用价值第86-88页
  5.1 加快荔枝遗传改良步伐第86-87页
  5.2 提供有用的选择标记第87页
  5.3 为转基因表达调控研究提供良好材料第87-88页
参考文献第88-99页
附录一 培养基配方第99-101页
附录二 图版及图版说明第101-113页
附录三 在学期间发表论文与参加学术活动情况第113-115页
致谢第115页

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