目录 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
符号说明 | 第12-14页 |
第1章 文献综述 | 第14-52页 |
·稻米营养品质及其遗传改良现状概述 | 第15-22页 |
·稻米营养品质性状的组成 | 第15-17页 |
·我国水稻品种营养品质性状的现状及其改良目标 | 第17页 |
·稻米营养品质性状的遗传 | 第17-18页 |
·高赖氨酸含量水稻突变体的筛选 | 第18-19页 |
·基因工程技术改良稻米营养品质研究进展 | 第19-22页 |
·水稻种子贮藏蛋白合成的分子生物学研究进展 | 第22-41页 |
·水稻种子贮藏蛋白的特征、种类及其结构 | 第22-25页 |
·水稻种子贮藏蛋白基因的结构、表达及其调控 | 第25-32页 |
·水稻种子贮藏蛋白的合成、加工与沉积 | 第32-37页 |
·水稻种子贮藏蛋白的营养品质及其遗传改良研究进展 | 第37-41页 |
·基因工程改良作物种子蛋白质品质的研究进展 | 第41-50页 |
·蛋白质序列的修饰 | 第41-43页 |
·人工合成优质蛋白基因 | 第43-44页 |
·异源优质蛋白基因的转移和过量表达 | 第44-46页 |
·同源优质蛋白基因的过量表达 | 第46-47页 |
·增加游离的必需氨基酸的含量 | 第47-48页 |
·基因工程技术改良水稻种子蛋白营养品质研究进展 | 第48-50页 |
·本研究的目的及其研究内容 | 第50-52页 |
第2章 水稻种子贮藏蛋白基因启动子的克隆及其在转基因水稻中的表达 | 第52-84页 |
·前言 | 第52-54页 |
·材料与方法 | 第54-65页 |
·植物材料 | 第54页 |
·质粒与细菌菌株 | 第54页 |
·化学试剂 | 第54-55页 |
·水稻种子贮藏蛋白基因启动子序列的分离与克隆 | 第55-57页 |
·不同启动子与GUS嵌合基因的构建 | 第57-58页 |
·根癌农杆菌介导培育转基因水稻 | 第58-62页 |
·转基因水稻植株中GUS活性的分析 | 第62页 |
·转基因水稻植株潮霉素抗性鉴定 | 第62页 |
·转基因水稻植株总DNA的PCR分析 | 第62-63页 |
·转基因水稻植株总DNA的Southern杂交分析 | 第63-64页 |
·水稻种子总RNA的提取 | 第64页 |
·转基因水稻总RNA的Northern杂交分析 | 第64-65页 |
·结果与分析 | 第65-79页 |
·水稻种子贮藏蛋白基因5’端上游调控区的克隆及其序列分析 | 第65-68页 |
·不同启动子与GUS嵌合基因的构建 | 第68页 |
·转基因水稻植株的获得及其鉴定 | 第68-70页 |
·不同GUS嵌合基因在转基因水稻植株中的表达 | 第70页 |
·水稻种子贮藏蛋白基因启动子的胚乳特异性表达 | 第70-76页 |
·不同种子贮藏蛋白基因启动子在胚乳中表达强弱的比较 | 第76-77页 |
·醇溶蛋白RP5基因信号肽编码序列的作用 | 第77-79页 |
·小结与讨论 | 第79-84页 |
·本章主要研究结果 | 第79-80页 |
·水稻种子贮藏蛋白启动子表达的组织特异性 | 第80-82页 |
·不同贮藏蛋白基因启动子的表达强弱 | 第82页 |
·醇溶蛋白信号肽序列对外源蛋白表达的作用 | 第82-84页 |
第3章 高赖氨酸含量蛋白基因在转基因水稻种子中的表达 | 第84-144页 |
·前言 | 第84-85页 |
·材料与方法 | 第85-101页 |
·植物材料 | 第85页 |
·质粒与细菌菌株 | 第85页 |
·生化试剂 | 第85页 |
·载体的设计策略 | 第85-87页 |
·LRP嵌合基因及其转化载体的构建过程 | 第87-91页 |
·含LRP嵌合基因的农杆菌超双元载体的构建 | 第91-96页 |
·转基因水稻的培育 | 第96页 |
·转基因水稻植株中的GUS活性及潮霉抗性分析 | 第96页 |
·转基因水稻植株总DNA的PCR分析 | 第96-97页 |
·转基因水稻植株总DNA的Southern杂交分析 | 第97页 |
·转基因水稻总RNA的RT-PCR分析 | 第97页 |
·转基因水稻总RNA的Northern杂交分析 | 第97页 |
·水稻种子蛋白的提取 | 第97-98页 |
·水稻种子蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第98-99页 |
·水稻种子蛋白的Western杂交分析 | 第99页 |
·转基因水稻种子中LRP表达的组织印迹免疫杂交分析 | 第99页 |
·氨基酸含量分析 | 第99-100页 |
·转基因水稻的后代遗传分析 | 第100-101页 |
·结果与分析 | 第101-139页 |
·载体的构建及其鉴定 | 第101页 |
·不同LRP嵌合基因向水稻的导入 | 第101-107页 |
·转LRP嵌合基因水稻植株的分子鉴定及其整合位点分析 | 第107-115页 |
·LRP嵌合基因在转基因水稻种子中的转录 | 第115-118页 |
·LRP在转基因水稻种子中的表达与积累 | 第118-129页 |
·转LRP嵌合基因水稻种子中的氨基酸含量 | 第129-135页 |
·LRP嵌合基因在转基因水稻后代中的遗传与表达 | 第135-139页 |
·小结与讨论 | 第139-144页 |
·本章主要研究结果 | 第139-140页 |
·异源蛋白LRP在转基因水稻种子中的表达 | 第140页 |
·不同5’-末端调控序列指导LRP表达的作用 | 第140-141页 |
·表达LRP对提高种子中赖氨酸含量的作用 | 第141-142页 |
·无抗性选择标记转基因水稻的筛选 | 第142-144页 |
第4章 Gt∶∶LRP融合蛋白在转基因水稻种子中的表达 | 第144-194页 |
·前言 | 第144-145页 |
·材料与方法 | 第145-153页 |
·植物材料、质粒及化学试剂 | 第145页 |
·谷蛋白Gt1基因全序列的分离与克隆 | 第145-147页 |
·谷蛋白与LRP融合蛋白基因及其载体的构建 | 第147-151页 |
·含水稻谷蛋白基因的双元载体的构建 | 第151页 |
·含融合蛋白基因的农杆菌超双元载体的构建 | 第151-152页 |
·转基因水稻的培育 | 第152页 |
·转基因水稻植株的Southern和Northern杂交分析 | 第152页 |
·SDS-PAGE和Western杂交分析 | 第152页 |
·氨基酸含量分析 | 第152-153页 |
·结果与分析 | 第153-187页 |
·谷蛋白基因全长基因组序列的分离与克隆 | 第153-154页 |
·融合蛋白基因的设计及其构建 | 第154-156页 |
·含融合蛋白基因的转基因水稻植株的培育 | 第156-157页 |
·融合蛋白基因在转基因水稻基因组中的整合 | 第157-160页 |
·Gt∶∶LRP融合蛋白基因在转基因水稻种子中的转录 | 第160-164页 |
·融合蛋白在转基因水稻种子中的表达与积累 | 第164-181页 |
·转基因水稻成熟种子中的氨基酸含量 | 第181-186页 |
·融合蛋白基因在转水稻植株中的遗传及其表达 | 第186-187页 |
·小结与讨论 | 第187-194页 |
·本章主要研究结果 | 第187-188页 |
·有关融合蛋白及其设计 | 第188-189页 |
·融合蛋白在转基因水稻种子中的表达与沉积 | 第189-191页 |
·LRP插入位点对融合蛋白翻译及其翻译后加工的影响 | 第191-192页 |
·转基因水稻种子中融合蛋白的表达对内源贮藏蛋白的影响 | 第192-193页 |
·融合蛋白途径改良稻米营养品质的效果 | 第193-194页 |
参考文献 | 第194-208页 |
致谢 | 第208-209页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第209页 |