| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 缩写词及中英文对照 | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| 1 TRAP1 的结构和功能 | 第10-11页 |
| 2 TRAP1 与 ROS 及细胞死亡的关系 | 第11-12页 |
| 3 Trx 系统 | 第12-14页 |
| 4 凋亡通路与线粒体 | 第14-15页 |
| 5 ROS 与线粒体 | 第15-16页 |
| 6 Trx 系统与细胞凋亡的关系 | 第16-18页 |
| 7 Trx 系统在癌症中的作用 | 第18-20页 |
| 第二章 人 TRAP1 基因的克隆、原核表达及表达条件优化 | 第20-39页 |
| 1 实验材料和仪器 | 第21-24页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·仪器 | 第22-23页 |
| ·试剂配制 | 第23-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-31页 |
| ·引物设计 | 第24页 |
| ·RT-PCR 扩增 TRAP1 基因 | 第24-26页 |
| ·重组质粒 pET28a(+)-TRAP1 的构建 | 第26-27页 |
| ·重组质粒 pET28a(+)-TRAP1 转化大肠杆菌感受态 DH5α | 第27-29页 |
| ·重组质粒 pET28a(+)-TRAP1 转化大肠杆菌感受态 BL21(DE3) | 第29-30页 |
| ·目的蛋白 TRAP1 的表达和鉴定 | 第30页 |
| ·pET28a(+)-TRAP1 在大肠杆菌 BL21(DE3)中表达的诱导条件优化 | 第30-31页 |
| 3 实验结果 | 第31-38页 |
| ·K562/ADR 细胞总 RNA 的提取 | 第31页 |
| ·梯度 PCR 确定最适退火温度 | 第31-32页 |
| ·PCR 扩增目的基因 TRAP1 | 第32页 |
| ·菌液 PCR 筛选阳性克隆 | 第32-33页 |
| ·重组载体 pET28a(+)-TRAP1 的双酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·pET28a(+)-TRAP1 在大肠杆菌 BL21(DE3)中的表达及鉴定 | 第34-35页 |
| ·温度对 pET28a(+)-TRAP1 表达的影响 | 第35-36页 |
| ·IPTG 浓度对 pET28a(+)-TRAP1 表达的影响 | 第36-37页 |
| ·诱导时机对 pET28a(+)-TRAP1 表达的影响 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 第三章 TrxR 抑制剂 IG3 诱导宫颈癌细胞死亡的机制研究 | 第39-63页 |
| 1 实验材料和仪器 | 第40-45页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·仪器 | 第41-42页 |
| ·试剂配制 | 第42-45页 |
| 2 实验方法 | 第45-51页 |
| ·细胞培养 | 第45页 |
| ·IG3 对 CaSki 细胞和 SiHa 细胞体外增殖的抑制 | 第45-46页 |
| ·AnnexinV/P I 双染-流式检测细胞凋亡 | 第46页 |
| ·PI 单染-流式检测细胞周期 | 第46-47页 |
| ·JC-1 染色-流式测定线粒体膜电位 | 第47页 |
| ·DCFH-DA 法检测细胞内 ROS 水平 | 第47页 |
| ·Western Blot | 第47-50页 |
| ·蛋白芯片 | 第50-51页 |
| ·数据处理 | 第51页 |
| 3 实验结果 | 第51-61页 |
| ·IG3 对宫颈癌 CaSki 和 SiHa 细胞增殖的影响 | 第51-53页 |
| ·AnnexinV/PI 双染-流式检测 IG3 对 CaSki 和 SiHa 细胞凋亡的影响 | 第53-56页 |
| ·IG3 对 SiHa 细胞凋亡相关蛋白的影响 | 第56页 |
| ·PI 单染-流式检测 IG3 对 CaSki 和 SiHa 细胞周期的影响 | 第56-58页 |
| ·IG3 对 CaSki 和 SiHa 细胞内 ROS 水平的影响 | 第58页 |
| ·IG3 对 CaSki 和 SiHa 细胞线粒体膜电位的影响 | 第58-60页 |
| ·IG3 对 CaSki 和 SiHa 细胞 TrxR1 表达的影响 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-73页 |
| 硕士期间发表论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
